Книги
чёрным по белому
Главное меню
Главная О нас Добавить материал Поиск по сайту Карта книг Карта сайта
Книги
Археология Архитектура Бизнес Биология Ветеринария Военная промышленность География Геология Гороскоп Дизайн Журналы Инженерия Информационные ресурсы Искусство История Компьютерная литература Криптология Кулинария Культура Лингвистика Математика Медицина Менеджмент Металлургия Минералогия Музыка Научная литература Нумизматика Образование Охота Педагогика Политика Промышленные производства Психология Путеводители Религия Рыбалка Садоводство Саморазвитие Семиотика Социология Спорт Столярное дело Строительство Техника Туризм Фантастика Физика Футурология Химия Художественная литература Экология Экономика Электроника Энергетика Этика Юриспруденция
Новые книги
Цуканов Б.И. "Время в психике человека" (Медицина)

Суворов С. "Танк Т-64. Первенец танков 2-го поколения " (Военная промышленность)

Нестеров В.А. "Основы проэктирования ракет класса воздух- воздух и авиационных катапульных установок для них" (Военная промышленность)

Фогль Б. "101 вопрос, который задала бы ваша кошка своему ветеринару если бы умела говорить" (Ветеринария)

Яблоков Н.П. "Криминалистика" (Юриспруденция)
Реклама

Основы учения об антибиотиках - Егоров Н.С.

Егоров Н.С. Основы учения об антибиотиках — М.: Наука, 2004. — 528 c.
ISBN 5-211-04669-2
Скачать (прямая ссылка): osnoviucheniyaobantibiotikah2004.djvu
Предыдущая << 1 .. 38 39 40 41 42 43 < 44 > 45 46 47 48 49 50 .. 212 >> Следующая

В процессе формирования спор резко уменьшается количество антибиотика,
находящегося в культуральной жидкости. При формировании спор бактерий не
образующим грамицидин С штаммом (Р"-вариант) также наблюдается уменьшение
внесенного в среду антибиотика. В этих условиях грамицидин С, добавленный
к субстрату в концентрации 30 мкг/мл, уже через 23-24 ч культивирования
бактерий в среде не обнаруживается. При спорообразовании В. bacillus до
50% грамицидина, содержащегося в вегетативных клетках бактерий, переходит
в споры. Например, концентрация грамицидина С в вегетативных клетках
перед спорообразованием равна 190 мкг, а в спорах - 95 мкг на 1 мг сухой
биомассы.
Динамика изменения концентрации грамицидина С в спорах при прорастании их
в синтетической среде, в среде с бульоном Хоттингера и в физиологическом
растворе показана в табл. 19.
Данные табл. 19 убедительно показывают, что споры В. bacillus, помещенные
в питательные среды, уже в первые 6-9 ч теряют практически весь
антибиотик, в них содержащийся. На более богатой по составу среде (бульон
Хоттингера) грамицидин в спорах не обнаруживается уже через 6 ч после
начала их инкубации, при этом антибиотик отсутствует и в окружающей
среде.
Затем количество антибиотика в вегетативных клетках вновь начинает
накапливаться и уже к 21-му ч его содержится в 2 раза больше, чем в
исходных спорах. На синтетической среде этот процесс несколько растянут,
но имеет ту же тенденцию (рис. 5).
При помещении спор в физиологический раствор (0,8%-й раствор NaCl) они не
прорастают, и количество антибиотика в этих условиях уменьшается всего
лишь на 16%. При этом и масса спор снижается на 16,5%. В синхронно
прорастающих спорах В. bacillus R-варианта через 4 ч инкубации грамицидин
С обнаруживается в разрушенных ультразвуком проросших спорах. Это
указывает на то, что при инкубации спор антибиотик разрушается,
связывается с клеточной мембраной и не экстрагируется этиловым спиртом.
108
Таблица 19
Изменение биомассы клеток в мг/100 мл культуральной жидкости (I) и
концентрации грамицидина С в мкг/мг биомассы (II) в процессе прорастания
спор В. bacillus на разных средах
(по Егорову, Коршунову, 1963)
Время культивирования, ч Синтетическая среда Бульон Хоттингера
Физиологический раствор
I II I II I II
0 12 95 12 95 12 95
6 4 60 13 0 12 93
8 - - 45 6 - -
9 8 8 113 16 - -
10 - - 172 24 - -
12 108 19 260 60 - -
15 255 50 362 102 - -
18 383 95 450 144 10 80
21 493 137 550 192 - -
24 584 183 532 185 - -
Грамицидин С, добавленный к среде для культивирования В. bacillus в
концентрации от 30 до 100 мкг/мл, тормозит или, наоборот, ускоряет
процесс спорообразования клеток этого организма. Например, при внесении
антибиотика в концентрации 30 мкг/мл в среду, в которой происходит
нормальный синтез грамицидина С культурой В. bacillus Р+-варианта, или
при ингибировании процесса биосинтеза (среда с р-фе-нил-р-аланином) через
13 ч развития бактерий наблюдается заметная стимуляция спорообразования
изучае-
Рис. 5. Динамика содержания грамицидина С в прорастающих спорах и
вегетативных клетках Brevi bacillus при развитии на бульоне Хот-тингера
(по Егорову, Коршунову, 1963)
В 12 18
Время культивирования,
мой культурой. Но такая же концентрация грамицидина С при добавлении к
среде, содержащей стимулятор биосинтеза антибиотика (р-фенил-ос-аланин),
задерживает процесс спорообразования при нормальном росте бактерий.
Имеющийся в спорах В. bacillus R-варианта грамицидин С (примерно 35-50%
от количества антибиотика, накапливающегося в вегетативных клетках)
задерживает их прорастание на 4-5 ч по сравнению со временем прорастания
спор Р"- и S-вариантов В. bacillus, не синтезирующих грамицидин С, а
также по сравнению со временем прорастания спор R-варианта, полученных в
109
результате развития бактерий на синтетической среде с Р-фенил-р-аланином
(ингибитор образования грамицидина С).
Ранее считалось, что молекула грамицидина С благодаря наличию в ее
структуре двух остатков D-фенилаланина устойчива к протеолитическим
ферментам. Однако в 1960 г. из культуры В. subtilis была выделена
протеиназа, способная расщеплять некоторые полипептидные антибиотики, в
том числе грамицидин. Под действием этой протеиназы молекула грамицидина
С подвергается гидролизу в звене L-валин-Ь-орнитин.
Комплексный ферментный препарат проназа, образуемый одним видом
стрептомицета, и нейтральная протеиназа фирмы Nagaso, выделенная из В.
subtilis, инактивируют грамицидин (на 50%). Субтилизин таким действием не
обладает (табл. 20).
Наши исследования показали, что сами клетки и прорастающие споры
продуцента грамицидина С способны образовывать фермент грамицидиназу,
инактивирующий этот антибиотик. Данные табл. 21 показывают, что более 45%
грамицидина С под действием фермента, изолированного из прорастающих спор
В. bacillus, разрушается в течение 24 ч при 37 °С.
Таблица 20
Действие некоторых протеолитических ферментов на грамицидин С при 37 °С
Предыдущая << 1 .. 38 39 40 41 42 43 < 44 > 45 46 47 48 49 50 .. 212 >> Следующая