Книги
чёрным по белому
Главное меню
Главная О нас Добавить материал Поиск по сайту Карта книг Карта сайта
Книги
Археология Архитектура Бизнес Биология Ветеринария Военная промышленность География Геология Гороскоп Дизайн Журналы Инженерия Информационные ресурсы Искусство История Компьютерная литература Криптология Кулинария Культура Лингвистика Математика Медицина Менеджмент Металлургия Минералогия Музыка Научная литература Нумизматика Образование Охота Педагогика Политика Промышленные производства Психология Путеводители Религия Рыбалка Садоводство Саморазвитие Семиотика Социология Спорт Столярное дело Строительство Техника Туризм Фантастика Физика Футурология Химия Художественная литература Экология Экономика Электроника Энергетика Этика Юриспруденция
Новые книги
Цуканов Б.И. "Время в психике человека" (Медицина)

Суворов С. "Танк Т-64. Первенец танков 2-го поколения " (Военная промышленность)

Нестеров В.А. "Основы проэктирования ракет класса воздух- воздух и авиационных катапульных установок для них" (Военная промышленность)

Фогль Б. "101 вопрос, который задала бы ваша кошка своему ветеринару если бы умела говорить" (Ветеринария)

Яблоков Н.П. "Криминалистика" (Юриспруденция)
Реклама

Основы учения об антибиотиках - Егоров Н.С.

Егоров Н.С. Основы учения об антибиотиках — М.: Наука, 2004. — 528 c.
ISBN 5-211-04669-2
Скачать (прямая ссылка): osnoviucheniyaobantibiotikah2004.djvu
Предыдущая << 1 .. 52 53 54 55 56 57 < 58 > 59 60 61 62 63 64 .. 212 >> Следующая

pH. Точно взятый объем фильтрата подвергают лиофильной сушке, затем
лиофилизат взвешивают и разделяют на две части, одну из которых
растворяют в воде, а другую экстрагируют безводным этанолом при
встряхивании в
139
течение часа. Растворители берут в таком количестве, которое, как
правило, позволяет получить 5-10-кратные концентрации по сравнению с
исходной культуральной жидкостью. Антибиотическую активность водного
раствора и спиртового экстракта определяют методом бумажных дисков.
Если антибиотическая активность спиртового экстракта близка к активности
водного раствора лиофилизата, то проводят хроматографирование в
соответствующей системе. Хроматограммы проявляют биоавтографически на
чашках с В. subilis. Одновременно проводят электрофорез в ацетатном и
фосфатном буферных растворах.
Если для изучаемого антибиотика во всех системах первого типа значение
убудет около 0,8 и выше, то спиртовой экстракт хроматографируют в другой
системе. При помощи набора этой системы можно увереннее отличить
антибиотики типа эритромицина - олеандомицина, типа карбомицина, типа
актиноми-цина и хлорамфеникола.
Полученные данные позволяют в определенной степени идентифицировать
антибиотик, или включить его в группу химически близких веществ, или,
наконец, идентифицировать его как новый.
Антибиотик, отнесенный к группе макролидных веществ, наиболее детально
идентифицируется с помощью нисходящей хроматографии в системах типа
Заффарони: бензолформамид и хло-роформформамид. Если же антибиотик
принадлежит к другим группам соединений, то используют групповые системы.
Итак, если в результате идентификации выделенного микроорганизма
установлено, что он является новым видом и антибиотическое вещество,
образуемое им, не принадлежит к уже описанным соединениям, то и организм,
и антибиотик должны быть детально исследованы. С этой целью прежде всего
изучают условия культивирования микроба, обеспечивающие максимальное
образование антибиотика. При подборе сред необходимо иметь в виду, что
чем сложнее среда, тем труднее выделять и очищать антибиотик, поэтому
среда для культивирования должна быть по возможности простой по составу и
обеспечивать максимальную выработку антибиотического вещества.
МЕТОДЫ ВЫДЕЛЕНИЯ И ОЧИСТКИ АНТИБИОТИКОВ
Выделение антибиотиков и их очистка осуществляются разными способами,
выбор которых зависит от химической природы антибиотика, характера
сопутствующих антибиотику продуктов жизнедеятельности организма
(органические кислоты,
140
аминокислоты, пигменты и другие соединения), неиспользованных компонентов
среды (углеводы, масла, азотсодержащие вещества, неорганические соли и
др.), а также от того, где накапливается это вещество - в культуральной
жидкости или в клетках продуцента.
Основная задача первых этапов выделения антибиотического вещества -
концентрирование биологически активного соединения и очистка от
сопутствующих балластных веществ.
Основными методами выделения антибиотиков из нативных растворов
(культуральная жидкость, освобожденная от биологической массы продуцента)
можно назвать следующие: осаждение антибиотика, методы экстракции
органическими растворителями, сорбционные методы с использованием
поверхностно-активных веществ (активированный уголь, активированный оксид
алюминия и др.) или ионообменных материалов (ионообменные смолы). При
использовании сорбционных методов выделения антибиотиков наиболее трудной
является десорбция (элюирование) препарата. Выделение антибиотика из
клеток продуцента осуществляют методом экстракции.
Антибиотик, выделенный одним из указанных способов, представляет собой
лишь технически чистый препарат, который не может еще использоваться в
медицинской практике. Дальнейшая очистка препарата осуществляется или
путем повторной сорбции, перекристаллизации, растворения антибиотика в
органических растворителях, или иными методами (подробнее об этом см. на
с. 484).
Антимикробный спектр и токсичность
После того как антибиотическое вещество с помощью того или иного метода
выделено и хорошо очищено, оценивают его биологическую активность по
отношению к широкому ряду микроорганизмов (проверяют широкий
антимикробный спектр). Кроме того, антибиотик исследуют на стерильность,
токсичность, пирогенность, испытывают в отношении действия на лейкоциты
крови и определяют другие показатели.
Цель выяснения стерильности готового препарата - установление отсутствия
в нем спор микроорганизмов, прежде всего патогенных. Для этого
необходимо, если возможно, инактивировать антибиотическое вещество, а
затем нанести его на разнообразные по составу питательные среды
(мясопептонный бульон, печеночный бульон, кровяной агар и т.п.).
Пенициллин инактивируют с помощью фермента пеницил-линазы (пенициллин-р-
лактамазы) или пенициллинацилазы либо
141
солянокислого гидроксиламина. Стрептомицин инактивируют при помощи
гидроксиламина или цистеина.
Многие антибиотики не удается инактивировать, поэтому их стерильность
Предыдущая << 1 .. 52 53 54 55 56 57 < 58 > 59 60 61 62 63 64 .. 212 >> Следующая