Книги
чёрным по белому
Главное меню
Главная О нас Добавить материал Поиск по сайту Карта книг Карта сайта
Книги
Археология Архитектура Бизнес Биология Ветеринария Военная промышленность География Геология Гороскоп Дизайн Журналы Инженерия Информационные ресурсы Искусство История Компьютерная литература Криптология Кулинария Культура Лингвистика Математика Медицина Менеджмент Металлургия Минералогия Музыка Научная литература Нумизматика Образование Охота Педагогика Политика Промышленные производства Психология Путеводители Религия Рыбалка Садоводство Саморазвитие Семиотика Социология Спорт Столярное дело Строительство Техника Туризм Фантастика Физика Футурология Химия Художественная литература Экология Экономика Электроника Энергетика Этика Юриспруденция
Новые книги
Цуканов Б.И. "Время в психике человека" (Медицина)

Суворов С. "Танк Т-64. Первенец танков 2-го поколения " (Военная промышленность)

Нестеров В.А. "Основы проэктирования ракет класса воздух- воздух и авиационных катапульных установок для них" (Военная промышленность)

Фогль Б. "101 вопрос, который задала бы ваша кошка своему ветеринару если бы умела говорить" (Ветеринария)

Яблоков Н.П. "Криминалистика" (Юриспруденция)
Реклама

Основы учения об антибиотиках - Егоров Н.С.

Егоров Н.С. Основы учения об антибиотиках — М.: Наука, 2004. — 528 c.
ISBN 5-211-04669-2
Скачать (прямая ссылка): osnoviucheniyaobantibiotikah2004.djvu
Предыдущая << 1 .. 57 58 59 60 61 62 < 63 > 64 65 66 67 68 69 .. 212 >> Следующая

ках
150
выживших спор высевалась на чашки, и каждая выросшая при этом колония
изучалась на способность к образованию стрептомицина. В результате этого
был выделен вариант стрептомицета, вырабатывающий до 2000 мкг/мл
стрептомицина (табл. 33).
Таблица 33
Схема селекции высокопродуктивного штамма продуцента стрептомицина
(по Dulaney, 1953)
№ п/п Мутагенный фактор Максимальный выход антибиотика, мкг/мл № п/п
Мутагенный фактор Максимальный выход антибиотика, мкг/мл
1 Ультрафиолето- 250 5 Рентгеновское 1000
вое облучение излучение 1500
2 Естественная 400 6 Ультрафиолето- 1000
селекция вое облучение 1500
3 Ультрафиолето- 600 7 Естественная 1000
вое облучение селекция 1500
4 Ультрафиолето- 1000 8 Ультрафиолето- 2000
вое облучение 1500 вое облучение
Получены штаммы продуцентов стрептомицина, пенициллина, тетрациклинов,
эритромицина и других антибиотиков, в несколько раз более продуктивные
(иногда на порядок выше), чем в первые годы их выделения.
Например, в промышленности используются штаммы Penicillium chrysogenum,
способные синтезировать до 50-55 тыс. ед./мл пенициллина, а штаммы S.
griseus вырабатывают до 10-20 тыс. мкг/мл стрептомицина.
При создании высокопродуктивных штаммов микроорганизмов используют ряд
других приемов, например конъюгацию плазмидами, слияние протопластов
(даже межвидовых), трансформацию хромосомных генов и др.
ПРИМЕНЕНИЕ ГЕННО-ИНЖЕНЕРНЫХ МАНИПУЛЯЦИЙ
Широко распространенное клонирование регуляторных и структурных генов,
контролирующих биосинтез различных антибиотиков, дало возможность
использования их в целях повышения на один-два порядка антибиотической
продуктивности многих штаммов стрептомицетов. Например, введение
регуляторных генов в дикий штамм продуцента дауномицина S. peuceticus
способно повысить биосинтез этого антибиотика в десятки раз.
Иногда при использовании указанного метода может происходить выработка
реципиентом новых антибиотиков, не свойственных данному штамму.
151
Основной проблемой, связанной с использованием названного метода,
является разработка приемов сохранения стабильности полученных штаммов.
Протопластирование. Основные принципы протопластирова-ния стрептомицетов
были разработаны М. Оканиши и др. (1984).
Методы протопластирования применяются для многих микроорганизмов, в том
числе и для продуцентов антибиотических веществ. При слиянии протопластов
микроорганизмов осуществляются четыре основные стадии: 1) образование
протопластов в результате лизиса клеточной стенки (для этих целей чаще
используют лизоцим); 2) непосредственное слияние полученных протопластов;
3) культивирование образовавшихся в результате слияния структур в
селективных условиях и 4) процесс регенерации. В результате
протопластирования клеток и последующей регенерации протопластов удается
повысить антибиотическую активность продуцентов антибиотиков, их
фагоустойчивость и другие ценные свойства. При этом иногда наблюдаются
морфологические изменения образовавшегося организма, элиминация
плазмидных ДНК, биосинтез новых антибиотиков, а иногда и потеря
антибиотической активности.
Биосинтез антибиотиков, отличающихся химическим строением от
антибиотических веществ, продуцируемых исходными штаммами стрептомицетов,
можно объяснить пробуждением в процессе слияния протопластов молчащих
генов биосинтеза новых антибиотиков, детерминированных у родительских
организмов, или же какими-то перестройками в геноме образовавшегося в
результате слияния протопластов организма.
Потеря способности к продуцированию исходных антибиотиков у
микроорганизма, полученного в процессе слияния протопластов, возможно,
связана с изменениями экспрессии регуляторных генов, ответственных за
биосинтез антибиотиков родительскими штаммами, или же с изменениями
структурных генов, контролирующих биосинтетические пути.
Метод слияния протопластов позволяет получать гибриды промышленных
штаммов стрептомицетов. Так, с помощью этого метода получены эффективные
штаммы, продуцирующие антибиотик в больших концентрациях. В качестве
примера можно указать на штамм Streptomyces lactamdurans, который
обладает повышенной способностью к биосинтезу цефамицина С, относящегося
к р-лактамным антибиотикам и имеющего следующее строение:
соон
СН-(СН2)з-С-N
с
N. ^-сн20CONH;
соон
152
При слиянии протопластов двух штаммов S.fradiae (продуцентов
аминогликозидного антибиотика неомицина) и макро-лидного антибиотика
тилозина получены варианты, образующие антибиотики, отличающиеся от
неомицина и тилозина. Эти штаммы способны синтезировать антибиотики,
относящиеся к группе хинонов.
Методом регенерации протопластов удалось выделить и более активные
продуценты макролидных антибиотиков (спирамици-на, тилозина,
цикламицина).
Недостаток метода состоит в том, что не всегда удается воспроизвести
результаты в генерациях продуцента. Облучение клеток донора и реципиента
дает в этом случае увеличение частоты рекомбинаций. Трансформация
протопластов хромосомальной ДНК возможна лишь в том случае, если
Предыдущая << 1 .. 57 58 59 60 61 62 < 63 > 64 65 66 67 68 69 .. 212 >> Следующая