Книги
чёрным по белому
Главное меню
Главная О нас Добавить материал Поиск по сайту Карта книг Карта сайта
Книги
Археология Архитектура Бизнес Биология Ветеринария Военная промышленность География Геология Гороскоп Дизайн Журналы Инженерия Информационные ресурсы Искусство История Компьютерная литература Криптология Кулинария Культура Лингвистика Математика Медицина Менеджмент Металлургия Минералогия Музыка Научная литература Нумизматика Образование Охота Педагогика Политика Промышленные производства Психология Путеводители Религия Рыбалка Садоводство Саморазвитие Семиотика Социология Спорт Столярное дело Строительство Техника Туризм Фантастика Физика Футурология Химия Художественная литература Экология Экономика Электроника Энергетика Этика Юриспруденция
Новые книги
Цуканов Б.И. "Время в психике человека" (Медицина)

Суворов С. "Танк Т-64. Первенец танков 2-го поколения " (Военная промышленность)

Нестеров В.А. "Основы проэктирования ракет класса воздух- воздух и авиационных катапульных установок для них" (Военная промышленность)

Фогль Б. "101 вопрос, который задала бы ваша кошка своему ветеринару если бы умела говорить" (Ветеринария)

Яблоков Н.П. "Криминалистика" (Юриспруденция)
Реклама

Основы учения об антибиотиках - Егоров Н.С.

Егоров Н.С. Основы учения об антибиотиках — М.: Наука, 2004. — 528 c.
ISBN 5-211-04669-2
Скачать (прямая ссылка): osnoviucheniyaobantibiotikah2004.djvu
Предыдущая << 1 .. 61 62 63 64 65 66 < 67 > 68 69 70 71 72 73 .. 212 >> Следующая

Метод тканевых культур. Существует несколько вариантов метода тканевых
культур, но наиболее удобен метод использования переживающих кусочков
хориоаллантоидной ткани куриного эмбриона в модификации И. Тама, К.
Фолкерса и Ф. Хорс-фолла (1953).
Из верхней части куриного яйца с 10-11-дневным эмбрионом стерильными
ножницами вырезают шесть кусочков скорлупы с прилегающей к ней тканью
хориоаллантоидной оболочки. Кусочки ткани осторожно отделяют от скорлупы
и промывают буферным раствором. Каждый такой кусочек помещают в пробирку
с 1 мл среды следующего состава (%):
NaCl.............0,68 NaH2P04.......0,0125
КС1..............0,04 NaHC03 .......0,22
СаС12 ...........0,02 Глюкоза ......1,0
MgS04 ...........0,01
Кроме того, в каждую пробирку добавляют пенициллин (100 ед./мл), с тем
чтобы предохранить ткань от загрязнения (развития микроорганизмов).
Пробирки устанавливают в специальный, медленно (около 12об./ч)
вращающийся барабан.
Для выяснения антивирусного действия продуктов жизнедеятельности
определенного организма кусочки ткани заражают соответствующим видом
вирусов и вносят в пробирки, содержащие культуральную жидкость (при pH
7,0) исследуемого организма. Пробирки помещают в барабан на 48 ч.
160
Если культуральная жидкость обладает антивирусным действием, то в среде,
окружающей ткань, не будет обнаружено вируса. При отсутствии
антивирусного действия вирусы будут интенсивно размножаться в клетках
ткани, что может быть легко обнаружено методом титрования на эритроцитах.
Метод оценки антивирусных свойств культуральных жидкостей различных
микроорганизмов прост, удобен и позволяет сравнительно быстро получить
необходимый результат при массовых испытаниях.
Метод с использованием листьев растений. Разработан относительно простой
метод выяснения антивирусного действия антибиотиков в отношении вируса
табачной мозаики.
Микроорганизм выращивают на агаровой пластинке в чашке Петри. После
достаточно хорошего развития микроба из агара вырезают блочки, которые
затем с помощью расплавленной желатины прикрепляют к листьям дурмана,
предварительно зараженным вирусом табачной мозаики. Для предохранения от
инфекции к желатине добавляют пенициллин. Листья дурмана с агаровыми
блочками помещают на несколько дней во влажные камеры. В течение этого
периода поверхность листа дурмана покрывается очагами некроза. Но если
находяще-
Рис. 21. Использование листьев дурмана для определения антивирусного
действия антибиотиков (по Шорту
и др., 1956):
1 - очаги некроза, вызванные вирусом табачной мозаики, 2 -
противовирусное действие, 3 - отсутствие действия на вирусы
еся в агаровом блочке антибиотическое вещество, вырабатываемое изучаемым
организмом, подавляет развитие вируса, то вокруг такого блочка
некротических образований не будет. Поверхность листа в зоне действия
антибиотиков свободна от поражения вирусом табачной мозаики (рис. 21).
Для окончательной оценки противовирусного действия антибиотических
препаратов необходимо использовать животных (чаще всего мышей) или
куриные эмбрионы, зараженные вирусами.
ОПРЕДЕЛЕНИЕ ПРОТИВОФАГОВОЙ АКТИВНОСТИ
Бактериофаги обладают рядом свойств, общих с вирусами растений и
животных. Фаги - это вирусы микроорганизмов. Определение противофаговой
активности микроорганизмов основано на тех же принципах, что и
определение противобактери-альных свойств организмов.
6* 161
Микроорганизм, изучаемый на антифаговые свойства, высевают на агаровую
или в жидкую среду, благоприятную для образования антибиотического
вещества. В качестве тест-объекта используют смесь бактерий и
специфического для этих бактерий фага.
При использовании одного из диффузионных методов (метода агаровых
блочков, лунок в толще агаровой пластинки, штрихов и т.д.) наблюдается
следующая картина. Если антибиотическое вещество подавляет рост фага, то
в зоне диффузии антибиотика будет происходить рост используемой бактерии,
на остальной же поверхности агаровой пластинки под действием
развивающегося фага бактерии будут лизированы и поверхность пластинки
останется чистой.
Если же под действием изучаемого биологически активного вещества бактерии
не развиваются и в зоне его диффузии, то это может означать, что
используемый в опытах организм не образует противофаговое вещество или же
вырабатываемое антибиотическое вещество подавляет развитие как фага, так
и бактерии. Последнее легко проверить, если в качестве тест-организма
взять только бактерию.
Противовирусным действием обладает ряд антибиотических веществ (эрлихин,
луридин, фумагиллин, гелиомицин (резисто-мицин), вирусин и др.).
ОПРЕДЕЛЕНИЕ ПРОТИВОРАКОВОГО ДЕЙСТВИЯ АНТИБИОТИКОВ
Не всегда антираковое действие препарата совпадает с антибактериальным
или антигрибным действием, поэтому для определения противораковой
активности культуральных жидкостей или очищенных препаратов в качестве
тест-объектов используют непосредственно раковые клетки. С этой целью
применяют методы, основанные на использовании экспериментальных животных,
Предыдущая << 1 .. 61 62 63 64 65 66 < 67 > 68 69 70 71 72 73 .. 212 >> Следующая