Книги
чёрным по белому
Главное меню
Главная О нас Добавить материал Поиск по сайту Карта книг Карта сайта
Книги
Археология Архитектура Бизнес Биология Ветеринария Военная промышленность География Геология Гороскоп Дизайн Журналы Инженерия Информационные ресурсы Искусство История Компьютерная литература Криптология Кулинария Культура Лингвистика Математика Медицина Менеджмент Металлургия Минералогия Музыка Научная литература Нумизматика Образование Охота Педагогика Политика Промышленные производства Психология Путеводители Религия Рыбалка Садоводство Саморазвитие Семиотика Социология Спорт Столярное дело Строительство Техника Туризм Фантастика Физика Футурология Химия Художественная литература Экология Экономика Электроника Энергетика Этика Юриспруденция
Новые книги
Цуканов Б.И. "Время в психике человека" (Медицина)

Суворов С. "Танк Т-64. Первенец танков 2-го поколения " (Военная промышленность)

Нестеров В.А. "Основы проэктирования ракет класса воздух- воздух и авиационных катапульных установок для них" (Военная промышленность)

Фогль Б. "101 вопрос, который задала бы ваша кошка своему ветеринару если бы умела говорить" (Ветеринария)

Яблоков Н.П. "Криминалистика" (Юриспруденция)
Реклама

Основы учения об антибиотиках - Егоров Н.С.

Егоров Н.С. Основы учения об антибиотиках — М.: Наука, 2004. — 528 c.
ISBN 5-211-04669-2
Скачать (прямая ссылка): osnoviucheniyaobantibiotikah2004.djvu
Предыдущая << 1 .. 63 64 65 66 67 68 < 69 > 70 71 72 73 74 75 .. 212 >> Следующая

Данные табл. 34 показывают, что, пользуясь чашечным методом, вполне
возможно вести отбор противораковых веществ на раковых клетках человека,
так как взвеси последних, как и клетки асцитного рака, восстанавливают
метиленовый синий.
Препараты, подавляющие или тормозящие рост опухоли, обычно подавляют и
дегидразную активность соответствующей опухоли.
164
Пробирочный метод. Модификацией чашечного метода служит метод испытания
противораковой активности антибиотиков в пробирках. Метод состоит в
следующем. В стандартные пробирки вносят 0,5 мл испытуемой культуральной
жидкости и
0,5 мл взвеси клеток асцитного рака Эрлиха (конечная концентрация клеток
500 тыс./мл), затем добавляют 2 мл расплавленной агаровой среды,
содержащей метиленовый синий. В контрольные пробирки вместо испытуемой
культуральной жидкости добавляют 0,5 мл среды, на которой выращивают
изучаемый организм. После перемешивания пробирки помещают на 3-4 ч в
термостат при 36-37 °С.
Если содержимое пробирок окрашивается метиленовым синим, то это указывает
на то, что испытуемый препарат подавляет дегидразную активность клеток
асцитного рака.
Преимущество пробирочного метода по сравнению с чашечным состоит в том,
что при этом происходит непосредственный контакт антибиотика с асцитными
клетками Эрлиха независимо от степени диффузии изучаемого препарата в
агар.
Использование микроорганизмов при изыскании противораковых антибиотиков.
Обмен веществ в опухолевых клетках отличается от обмена нормальных
клеток, в частности, различие определяется интенсивностью дыхания: в
опухолевых клетках оно значительно снижено. Исходя из этого высказано
предположение о возможности использования в качестве тест-объектов для
поисков противораковых антибиотиков мутантов микроорганизмов с пониженным
коэффициентом дыхания.
В результате ультрафиолетового облучения и действия урета-на удалось
получить мутанты стафилококков, бактерий кишечной группы и других
организмов с пониженным коэффициентом окисления. Поглощение кислорода у
таких микроорганизмов может составлять 20-80% по сравнению с дыханием
исходных родительских культур. В качестве тест-организмов для определения
антиопухолевого действия культуральных жидкостей микроорганизмов можно
также применять мутанты дрожжевых организмов с пониженным коэффициентом
дыхания.
Сравнивая чувствительность метода с использованием асцитных клеток Эрлиха
и метода с биохимическими мутантами микроорганизмов, следует заключить,
что биохимические мутанты - более чувствительные тесты для определения
противоопухолевого действия микроорганизмов.
Использование опухолевых клеток, выращенных in vitro, для отбора
организмов, образующих противоопухолевые антибиотики. Оказалось возможным
культивировать некоторые опухолевые клетки в искусственных условиях (in
vitro) подобно тому, как это
165
осуществляется в отношении микроорганизмов. Лейкемические клетки мышей
могут расти и размножаться в среде, содержащей пептон, диализированную
лошадиную сыворотку и фолиевую кислоту (10 мкг/мл).
Это позволяет использовать перевиваемые штаммы клеток рака человека для
изучения противоопухолевого действия некоторых антибиотиков. С этой целью
клетки перевиваемых штаммов выращивают в матрацах Ру на специальной среде
с добавлением 10%-й телячьей сыворотки. Культивирование проводят при 36
°С. Через 6-7 сут среду удаляют и слой клеток снимают с поверхности
стекла 0,02%-м раствором этилендиаминтетрауксус-ной кислоты. Через 15-20
мин инкубации в термостате клетки переходят в суспензию.
Способность некоторых опухолевых клеток размножаться в пробирках
позволяет применять их в качестве тест-объекта при поиске, выделении и
очистке новых антибиотических веществ, обладающих противоопухолевой
активностью. С этой целью можно использовать опухолевые клетки лимфолимы.
Для получения асцита клеток лимфолимы белым мышам внутрибрюшинно вводят
по 0,3 мл взвеси асцитных клеток. Через 10-12 дней асцит стерильно
отбирают и сразу же вносят в пробирки с вышеназванной средой. Количество
среды в каждой пробирке 2 мл. Оптимальная концентрация опухолевых клеток
составляет 3 • 106-5 • 106в 1 мл среды. При этих условиях через 48 ч
инкубации при 36,5 °С в пробирках без перемешивания число клеток
увеличивается в 1,5-2 раза. Размножение клеток в культуре оценивают в
камере Горяева.
Если исследуемый препарат тормозит развитие и размножение клеток асцита,
то это указывает на его антиопухолевое действие.
Применение метода позволяет проводить первичный отбор противоопухолевых
антибиотиков на стадии культуральной жидкости, а также выделять и
химически очищать отобранные антибиотики. Причем удается обнаружить и
выделить противоопухолевые антибиотики, не обладающие подавляющим
действием в отношении обычных тест-организмов, биохимического мутанта
стафилококка и не влияющие на дегидразную активность опухолевых клеток
лимфолимы.
Методы количественного определения антибиотиков
Количественное определение антибиотиков в культуральных жидкостях,
Предыдущая << 1 .. 63 64 65 66 67 68 < 69 > 70 71 72 73 74 75 .. 212 >> Следующая