Книги
чёрным по белому
Главное меню
Главная О нас Добавить материал Поиск по сайту Карта книг Карта сайта
Книги
Археология Архитектура Бизнес Биология Ветеринария Военная промышленность География Геология Гороскоп Дизайн Журналы Инженерия Информационные ресурсы Искусство История Компьютерная литература Криптология Кулинария Культура Лингвистика Математика Медицина Менеджмент Металлургия Минералогия Музыка Научная литература Нумизматика Образование Охота Педагогика Политика Промышленные производства Психология Путеводители Религия Рыбалка Садоводство Саморазвитие Семиотика Социология Спорт Столярное дело Строительство Техника Туризм Фантастика Физика Футурология Химия Художественная литература Экология Экономика Электроника Энергетика Этика Юриспруденция
Новые книги
Янин В.Л. "Новгородские акты XII-XV Хронологический комментарий" (История)

Майринк Г. "Белый доминиканец " (Художественная литература)

Хусаинов А. "Голоса вещей. Альманах том 2" (Художественная литература)

Петров Г.И. "Отлучение Льва Толстого " (Художественная литература)

Хусаинов А. "Голоса вещей. Альманах том 1 " (Художественная литература)
Реклама

Микроскопическая техника - Роскин Г.И.

Роскин Г.И., Левинсон Л.Б. Микроскопическая техника — М.: Советская наука, 1957. — 469 c.
Скачать (прямая ссылка): microskopicheskayatehnika1957.djvu
Предыдущая << 1 .. 107 108 109 110 111 112 < 113 > 114 115 116 117 118 119 .. 214 >> Следующая

Определение холестерина по Вин да у. Виндау показал, что свободный холестерин со спиртовым раствором диги-тонина образует характерные двоякопреломляющие игольчатые кристаллы дигитонин-холестернда.
Капля 0,5-процентного раствора дишгоиина в 85-градусном спирте вводится на депарафинированный срез между предметным и покровным стеклом. Сейчас же появляются игольчатые кристаллы. Они нерастворимы в воде, ацетоне, эфире, очень мало в холодном 96-градусном спирте, несколько лучше в кипящем. Хорошо растворимы в уксусной кислоте и особенно в пиридине.
Определение холестерина и холестери н-э ф и-ров по Шульцу. Материал фиксировать формалином, резать на замораживающем микротоме, срезы выставить в разведенном формоле иа яркий свет (по возможности на солнце) на 4 дня; сполоснуть дистиллированной водой; тщательно просушить срез на предметном стекле фильтровальной бумагой. Нанести на срез несколько капель смесн равных объемов ледяной уксусной и крепкой серной кислот (прибавлять серную кислоту к уксусной по каплям, при охлаждении); покрыть срез покровным стеклом и сейчас же рассматривать.
Холестерин и холестерин-эфиры окрашиваются в синий или пурпурный цвет, сейчас же переходящий в зеленый и потом в грязно-бурый. Препарат сохраняется только несколько часов.
Выставление на свет необходимо для того, чтобы холестерин перешел в оксихолестернн. Действие света можно заменить протравой 2,5-процентными железными квасцами прн температуре 37° в течение 24—48 часов.
258
Метод Ромье. Материал фиксировать формалином или жидкостью Буэна без уксусной кислоты; срезы, приготовленные на замораживающем микротоме, высушить на предметном стекле; налить на препарат крепкой серной кислоты (3—15 секунд); остановить действие серной кислоты, прибавив 2—3 капли уксусного ангидрида; промыть несколькими каплями этого же реактива; накрыть покровным стеклом.
Рассматривать немедленно, так как окраска быстро исчезает. Холестерин и его эфиры окрашиваются в лилово-фиолетовый или пурпурно-красный цвет, сейчас же переходящий в зеленый. Следует иметь в виду, что синий, фиолетовый или красный цвет не характерен; на присутствие холестерина и его эфиров указывает постепенное, в течение 20—30 мииут, появление зеленых отгеиков. Препарат годен 30—60 минут.
ПЛАЗМАЛЬ
В протоплазме ряда животных клеток имеются вещества липо-идиого характера, которые были названы плазмалогеиами. Эти вещества не растворяются в воде, но растворимы в органических растворителях (например в спирте). Под воздействием кислот или раствора сулемы плазмалогеи быстро разлагается, образуя плаз-маль.
Плазмаль представляет собой смесь высших альдегидов, соответствующих известным жирным кислотам, и с фуксик-сер-нистой кислотой дает интенсивно красно-фиолетовое окрашивание. Оказалось, что плазмалеген — это смесь веществ, относящихся к группе фосфатидов, состоящих из глицерино-фосфорной кислоты, соединенной по типу адеталя с высшими альдегидами и по типу сложного эфира с аминоспиртом.
В разных органах имеется разное количество плазмалегена. Наиболее интенсивную реакцию дают мышцы, нервная ткаиь, эпителий толстых кишок. Печень и эпителий тонких кишок дают слабую реакцию. В жировой ткани взрослых людей, кошек, крыс, мышей — реакция отрицательная. Время, необходимое для превращения плазмалегена в плазмаль, различно в зависимости от от того, происходит ли оно под действием кислоты или сулемы; при действии одной фуксин-сернистой кислоты замороженные срезы только через 2—3 часа окрашиваются в фиолетовый цвет. Если же поместить срезы в 1-процентный раствор сулемы, то достаточно нескольких минут для того, чтобы фуксин-сернистая кислота дала с плазмалем фиолетовое окрашивание.
Плазмалевая реакция резко отличается от нуклеальиой тем, что: 1) альдегидные группы плазмалогена обнаруживаются при воздействии сулемы и 2) плазмалеген или плазмаль при действии спирта извлекается из ткани, в то время как нуклеальные вещества сохраняются. Необходимый для нуклёальной реакции гидролиз соляной кислотой при плазмалевой реакции не требуется.
259
Физиологическое значение плазмалегена пока не ясно. Несомненно лишь, что при его широком распространении, особенно в растущих клетках, а также в тканях нервной и мышечной, он должен играть большую роль в процессах обмена. Об этом говорит также наличие в его составе альдегидов — исключительно реакционно способных соединений. Плазмалеген (или подобные ему Вещества) по-видимому имеет особенное значение в обмене тканей злокачественных опухолей.
Для гистохимического выявления плазмаля мы с успехом применяли метод Кена (1949): 1) маленькие кусочки ткани помещают на 12 минут в смесь равных частей реактива Шиффа (к которому добавлен равный объем сернистой воды) и насыщенного водного раствора сулемы; одновременно, для контроля, кусочек ткани обрабатывают 15 минут тем же реактивом, но без сулемы, которая заменена равным объемом воды; 2) тщательно промывают в трех сменах сернистой воды (в каждой по 5 минут);
3) затем помещают объект на 2 часа в 10-процентпый раствор формалина; соединение формальдегид-реактив Шиффа образуется очень быстро; при этом контрольные кусочки ткани принимают более интенсивный фиолетовый цвет, чем ткани, обработанные смесью, указанной в пункте 1; 4) промывают в проточной воде 24 часа; комплекс формальдегид-реактив Шиффа легко растворим в воде и поэтому контрольные кусочкн раскрашиваются до очень бледного тона, в то время как интенсивность окраски ткани, обработанной смесью с сулемой, не меняется, потому что комплекс ацетальфосфатид-реактив Шиффа растворим в спирте, но не в воде; 5) заключают в желатину и для уплотнения блока помещают его в эксикатор с СаС12 (при 37е) на 20—25 часов, после чего изготовляют срезы и заключают их в глицерин-желатину.
Предыдущая << 1 .. 107 108 109 110 111 112 < 113 > 114 115 116 117 118 119 .. 214 >> Следующая