Книги
чёрным по белому
Главное меню
Главная О нас Добавить материал Поиск по сайту Карта книг Карта сайта
Книги
Археология Архитектура Бизнес Биология Ветеринария Военная промышленность География Геология Гороскоп Дизайн Журналы Инженерия Информационные ресурсы Искусство История Компьютерная литература Криптология Кулинария Культура Лингвистика Математика Медицина Менеджмент Металлургия Минералогия Музыка Научная литература Нумизматика Образование Охота Педагогика Политика Промышленные производства Психология Путеводители Религия Рыбалка Садоводство Саморазвитие Семиотика Социология Спорт Столярное дело Строительство Техника Туризм Фантастика Физика Футурология Химия Художественная литература Экология Экономика Электроника Энергетика Этика Юриспруденция
Новые книги
Янин В.Л. "Новгородские акты XII-XV Хронологический комментарий" (История)

Майринк Г. "Белый доминиканец " (Художественная литература)

Хусаинов А. "Голоса вещей. Альманах том 2" (Художественная литература)

Петров Г.И. "Отлучение Льва Толстого " (Художественная литература)

Хусаинов А. "Голоса вещей. Альманах том 1 " (Художественная литература)
Реклама

Микроскопическая техника - Роскин Г.И.

Роскин Г.И., Левинсон Л.Б. Микроскопическая техника — М.: Советская наука, 1957. — 469 c.
Скачать (прямая ссылка): microskopicheskayatehnika1957.djvu
Предыдущая << 1 .. 115 116 117 118 119 120 < 121 > 122 123 124 125 126 127 .. 214 >> Следующая

18'
275
Описанный метод применения лейкобазы метиленового синего относится не только к срезам, ио и к мазкам йли отпечаткам различных нормальных и патологических тканей.
ВИТАМИНЫ Витамин С
Реакция Жиру и Леблона. Орган, взятый для гистохимического исследования на витамин С, прежде всего следует
промыть изотоническим раствором левулезы (вводя его в сосуды) для того, чтобы удалить мешающий реакции хлористый иатрий, после чего также в кровяное русло ввести 10-процент-пый раствор азотнокислого серебра, подкисленный уксусной кислотой (pH 3—4). Можно пользоваться следующим реактивом: 8 частей 10-процентного раствора азотнокислого серебра и 1 часть 1-процентной уксусной кислоты. Таким образом, достигается не только выявление витамина С, но и одновременно происходит фиксация ткани. Обычно 15—30 минут бывает достаточно для реакции, после чего объект споласкивают дистиллированной водой. Чтобы избежать последующего выпадения серебра и потемнения препарата, объект обрабатывают 3-процентным раствором гипосульфита в течение 15—30 минут и снова тщательно промывают в воде. Если кусочки органов невелики, раствор азотнокислого серебра можно не вводить в кровяное русло. В этом случае маленькие объекты помещают непосредственно в подкисленный раствор серебра и затем поступают, как сказано выше.
Все указанные операции необходимо проводить в темноте или при слабом темпо-краоном свете фотографического фонаря.
Кусочки ткани, хорошо отмытые в воде, можно уже на свету заливать в парафин по обычной схеме, а полученные срезы (тол-
Рис. 88. Витамин С в клетке; реакция Жиру и Леблона. А — тр*-гтаносома; Б — эндотелий капилляра лягушки; В —поперечный разрез гладкой мускульной клетки желудка крысы; Г — клетка злокачественной опухоли крысы (опухоль Джоблинга); Д — эпителиальная клетка кишечника двухмесячного эмбриона человека (по Г. И. Роскину),
276
щипой в 5—8 ц) следует докрашивать эозином, кислым фуксином или квасцовым кармином. При этом черные зерна серебра, выпавшие на месте нахождения аскорбиновой кислоты, бывают очень четко видны на препарате (рис. 88). Специфичность метода Жиру и Леблона надо признать практически достаточной при условии точного выполнения всех указанных условий. Лучший объект для изучения витамина С в клетках — кора надпочечника млекопитающих. (Подробности о применении методов обнаружения витамина С в клетках и тканях даны в работе Г. И. Роскина, 1945 г.).
Недавно Бакхус (1950) предложил следующую модификацию метода: небольшие кусочки ткани помещают на 45—60 минут з 5-процентный раствор азотнокислого серебра (pH 2—2,5) при температуре 56° С, затем промывают 1 —15 минут дистиллированной водой и переносят иа 30—45 минут в 5-процентный раствор гипосульфита. Проводка через диоксан, заливка в парафин, срезы докрасить квасцовым гематоксилином, как обычно, заключить я бальзам. Черные зерна в тетках — места нахождения аскорбиновой кислоты.
Витамин А
Для выявления витамина Л служит мстот Жуайе — Лаверня. Фиксация: формалин — 15 частсн, физиологический раствор--
85 частей. Кусочек ткани заливают обычным образом в парафин. Срезы помешают в насыщенный раствор треххлористой сурьмы в хлороформе на 15—60—120 минут. Витамин А дает синее окрашивание. Срезы рассматривают в капле хлороформа или ксилола под покровным стеклом.
ПИГМЕНТЫ
Каротиноиды
Желтые пли красные пигменты, обычно растворенные в жирах, образуют вещества, обычно называемые липохромами. Оии нерастворимы в воде, глицерине, формоле, слабых кислотах и щелочах, растворимы в спирте, хлороформе, ацетоне и т. д.
Особенно хорошо растворяются в сероуглероде. Можно заключать в парафин, если делать это достаточно быстро.
Обесцвечиваются в 1-процентной хромовой кислоте и двухромовокислом калии. С концентрированной серной кислотой дают кратковременное синее окрашивание; затем пигмент разрушается. С иодом (обработать материал раствором Люголя) дают фиолетовое окрашивание.
У животных широко распространены пигменты, называемые хром о протеида ми и представляющие собой комбинацию каротиноидов и белков. Оии образуют в воде коллоидный раствор и нерастворимы в органических растворителях. Хорошо известен пигмент панцыря рака (астацин), состоящий из белка и красного
277
каротиноида. Если кипячением или фиксатором осадить белки, — каротиноид освобождается и, как известно, панцырь окрашивается в красный цвет.
Зрительный пурпур. Простетической группой зрительного пурпура является каротиноид. Берже и Сегаль (1949 г.) предложили метод, основанный на том, что зрительный пурпур с хлористой платиной дает осадок, образующий с некоторыми красителями соединение, нерастворимое в воде и почти нерастворимое в спирте.
Реакция Берже и Сегаля. 1) Фиксировать сетчатку в темноте в смеси: 2,5-процентной хлористой платины 75 см3 и нейтрального формалина 25 см3\ 2) промыть в 90-градус-ном спирте и заключить обычным методом в парафин; 3) депара-финмрованные срезы промыть в чистом 60-градусном спирте, а затем в 60-градусном спирте, насыщенном газообразным хлором. Это делается для того, чтобы обесцветить меланин, который может затемнить картину; 4) промыть в проточной воде 10 минут; 5) окрасить метиловым зеленым и пиронияом 20 минут; 6) быстро промыть водой и провести через 2 стаканчика с безводным диоксаиом;
Предыдущая << 1 .. 115 116 117 118 119 120 < 121 > 122 123 124 125 126 127 .. 214 >> Следующая