Книги
чёрным по белому
Главное меню
Главная О нас Добавить материал Поиск по сайту Карта книг Карта сайта
Книги
Археология Архитектура Бизнес Биология Ветеринария Военная промышленность География Геология Гороскоп Дизайн Журналы Инженерия Информационные ресурсы Искусство История Компьютерная литература Криптология Кулинария Культура Лингвистика Математика Медицина Менеджмент Металлургия Минералогия Музыка Научная литература Нумизматика Образование Охота Педагогика Политика Промышленные производства Психология Путеводители Религия Рыбалка Садоводство Саморазвитие Семиотика Социология Спорт Столярное дело Строительство Техника Туризм Фантастика Физика Футурология Химия Художественная литература Экология Экономика Электроника Энергетика Этика Юриспруденция
Новые книги
Янин В.Л. "Новгородские акты XII-XV Хронологический комментарий" (История)

Майринк Г. "Белый доминиканец " (Художественная литература)

Хусаинов А. "Голоса вещей. Альманах том 2" (Художественная литература)

Петров Г.И. "Отлучение Льва Толстого " (Художественная литература)

Хусаинов А. "Голоса вещей. Альманах том 1 " (Художественная литература)
Реклама

Микроскопическая техника - Роскин Г.И.

Роскин Г.И., Левинсон Л.Б. Микроскопическая техника — М.: Советская наука, 1957. — 469 c.
Скачать (прямая ссылка): microskopicheskayatehnika1957.djvu
Предыдущая << 1 .. 116 117 118 119 120 121 < 122 > 123 124 125 126 127 128 .. 214 >> Следующая

7) заключить в кедровое масло. Вместо диоксана можио обезводить и в спирте, но при этом часть красителя растворится.
В результате структуры, содержащие зрительный пурпур, окрасятся в небесно-голубой цвет.
Хромолипоиды
Хромолипоиды (липофусцины, коричневый пигмент изнашивания). Коричневые или желтые пиг-меиты, представляющие собой продукты окисления жиров, широко распространены в различных клетках позвоночных животных (нервные клетки, интерстициальные клетки семенника, клетки коркового слоя надпочечников и т. д.). С возрастом количество их обычно увеличивается. Они (нерастворимы в воде, кислотах и щелочах; плохо растворимы или совсем не растворимы в органических растворителях, не дают реакции с иодом. Концентрированная серная кислота часто красит их в красно-коричневый цвет; обычно их красят Суданом III и шарлахом красным. Они не редуцируют аммиачного серебра и часто дают реакцию на железо. При помощи реакции Ш.чорля можно определить в тканях «пигмент изнашивания»: поместить срезы на 5 минут в смесь (готовить перед употреблением) равных частей 1-процеитного хлорного железа и свежеприготовленного {-процентного железосинеродистого калия. Липофусины окрасятся в синий цвет.
Хромолипоиды можно отличить от каротияоидов благодаря тому, что они не дают реакции с иодом и серной кислотой и гораздо меньше растворяются в органических растворителях. От меланина они отличаются нерастворимостью в щелочах, окрашивае-
278
мастью Суданом III и красным шарлахом и тем, что не восстанавливают аммиачного серебра.
Метод Хека: окрасить срез сульфатом нильского синего, затем обработать 3-процентной перекисью водорода в течение 24 часов.
Зерна меланина будут бесцветны, зерна хромолипоида окрасятся в синий цвет.
Меланины
Желтые, коричневые, черные, иногда слегка фиолетовые пигменты. Совершенно нерастворимы в неорганических и органических растворителях. Обесцвечиваются рядом окислителей (3-процентной перекисью водорода — 24—36 часов, сменить ее несколько раз; диафанолом — 24 часа в темноте, в плотно закрытой склянке; 0,1-процентным марганцевокислым калием 2—24 часа хорошо промыть водой; 0,3-процентной щавелевой кислотой — несколько минут, промыть водой). Меланины и их пропигменты обладают очень характерной способностью без применения восстановителя непосредственно восстанавливать аммиачное серебро. Кроме того, они легко импрегнируются серебром при обычных методах серебрения. Меланины можно отличить от всех других пигментов благодаря их нерастворимости в органических растворителях, обесцвечиванию рядом окислителей и способности восстанавливать аммиачное серебро.
Гемоглобин
Гистохимические методы выявления гемоглобина чаще всего основываются на его пероксидазных свойствах (псевдоперокси-даза). Это свойство зависит не от присутствия пероксидазы в соответствующих структурах, а от каталитических свойств железа, содержащегося в гемоглобине и его производных.
В качестве реактива обычно применяют бензидин. На препарате, обработанном бензидином, пероксидазы дают одинаковую картину с гемоглобином. Их можно различать только благодаря термостабильности пероксидазных свойств гемоглобина и его производных: двадцатиминутное нагревание при температуре 180° их не изменяет, тогда как все другие пероксидазы тканей от этого воздействия разрушаются.
Гемоглобины не дают реакции на железо. В срезах гемоглобин может быть выявлен методом Слонимского — Лапинского или более простым методом Лепена.
Метод Слонимского — Лапинского. Материал фиксировать 15—24 часа в смеси: красной кровяной соли —2,5—
4 з, формалина— 10—20 см3, дистиллированной воды— 100 см3 (гемоглобин при этом превращается в метгемоглобин); промыть 24 часа в проточной воде; заключить в целлоидин-парафин или парафин; положить депарафинированные срезы в реактив, приго-
279
товленный следующим образом; 0,1—0,2 г бензидина растворить в 2—3 см3 96-градусиого спирта, добавить 10 см3 96-градусного спирта, затем 2 см3 4-процентиого пергидроля и 1 см3 раствора бензидина в ледяной уксусной кислоте; промыть срезы 70-градусным спиртом; окрасить их метиловым зеленым, сафранином (или любым контрастным красителем); быстро провести через спирты, ксилол и заключить в бальзам.
В результате гемоглобин окрасится в коричневый цвет.
Метод Лепена. Положить срезы на 1—5 минут в следующую смесь: 2 см3 0,6-процентпого раствора бензидина в 96-градус -ном спирте и 0,5 см3 раствора пергидроля в 4,5 см3 70-градусного спирта; сполоснуть их водой и докрасить контрастным красителем, заключить в бальзам. В результате гемоглобин окрасится в темно-коричневый цвет.
Более четкие картины, чем после обработки бензидином, дает предложенная Лизоном реакция «ц и н к-л е й к о». Ее следует проводить следующим образом: фиксировать по Слонимскому--Ла-пянскому (см. выше) 15—24 часа или по Лизону (нейтрального формола 10 см3, уксуснокислого свинца 2—5 г, дистиллированной воды 100 см3) — 24 часа; приготовить срезы на замораживающем микротоме; поместить срезы в раствор лейкофуксина, к котором} перед употреблением на каждые 10 см3 прибавить 1 см3 продажной перекиси водорода; промыть, докрасить любым контрастным красителем; заключить обычным способом в канадский бальзам. Приготовление лейкофуксина: смешивают кислого фуксина 1,5 г, цинковой пыли 10 г, ледяной уксусной кислоты 2 см3, воды 100 см3. полученную смесь подогревают, пока она не станет светло-желтого или коричневато-желтого цвета. После охлаждения прибавляют еще 2 см3 уксусной кислоты. Лейкофуксин годен несколько дней; если жидкость вновь окрасится в красный цвет, ее следует прокипятить.
Предыдущая << 1 .. 116 117 118 119 120 121 < 122 > 123 124 125 126 127 128 .. 214 >> Следующая