Книги
чёрным по белому
Главное меню
Главная О нас Добавить материал Поиск по сайту Карта книг Карта сайта
Книги
Археология Архитектура Бизнес Биология Ветеринария Военная промышленность География Геология Гороскоп Дизайн Журналы Инженерия Информационные ресурсы Искусство История Компьютерная литература Криптология Кулинария Культура Лингвистика Математика Медицина Менеджмент Металлургия Минералогия Музыка Научная литература Нумизматика Образование Охота Педагогика Политика Промышленные производства Психология Путеводители Религия Рыбалка Садоводство Саморазвитие Семиотика Социология Спорт Столярное дело Строительство Техника Туризм Фантастика Физика Футурология Химия Художественная литература Экология Экономика Электроника Энергетика Этика Юриспруденция
Новые книги
Янин В.Л. "Новгородские акты XII-XV Хронологический комментарий" (История)

Майринк Г. "Белый доминиканец " (Художественная литература)

Хусаинов А. "Голоса вещей. Альманах том 2" (Художественная литература)

Петров Г.И. "Отлучение Льва Толстого " (Художественная литература)

Хусаинов А. "Голоса вещей. Альманах том 1 " (Художественная литература)
Реклама

Микроскопическая техника - Роскин Г.И.

Роскин Г.И., Левинсон Л.Б. Микроскопическая техника — М.: Советская наука, 1957. — 469 c.
Скачать (прямая ссылка): microskopicheskayatehnika1957.djvu
Предыдущая << 1 .. 120 121 122 123 124 125 < 126 > 127 128 129 130 131 132 .. 214 >> Следующая

Повышение базофилии наблюдается также в элементах тканей с повышенным содержанием серы, если они подвергаются действию периодной кислоты, перманганата калия или хромовой кислоты, что вероятно, связано с окислением сульфидных и сульф-гидрильных групп.
Подробности применения метода определения изоэлектриче-
286
ских точек, а также цитофизиологическое значение этого метода подробно изложены в работе Г. И. Роскина (1946).
МИКРОСЖИГАНИЕ
Цель метода заключается в изучении распределения различных неорганических соединений в клетках и тканях, причем препарат обрабатывается таким образом, что эти вещества в общем сохраняют то расположение, которое имело место в живых клетках и тканях. Этот метод состоит в том, что срезы
б В
А
Рис. 89. Сподограммы тканей. А — гладкая мышечная гкапь кишечника кошки; Б — сердечная мускулатура кошки; В — поперечно-по-лосатая мускулатура кошки; Г — хрящ; Д — почечный клубочек кошки; Е — эпителий кишечника.
ткани подвергаются действию температуры 600—700°, и распределение золы на препарате сравнивается с контрольными препаратами, окрашенными обычными гистологическими способами (рис. 89).
Для микросжигания можно употреблять как замороженные, так и парафиновые срезы. Парафин при нагревании, если ои достаточно очищен, испаряется, не оставляя следов на препарате. Ткани, взятые для опыта, могут 'быть свежими или предварительно фиксированными. Весьма важно чтобы все употреб-
287
ляемые реактивы и промежуточные среды были химически чистыми и не содержали неорганических соединений, способных загрязнить изучаемую ткань. Фиксаторы, содержащие хромовые соли или сулему, непригодны, так же как фиксаторы, содержащие кислоты (например, смесь Буэна), так как они извлекают из ткани соли. Лучшими фиксаторами являются спирт, формалин или формалин, разведенный спиртом (1 : 10). Заливка в парафин н наклейка срезов производятся обычным способом.
Замороженным срезам дают подсохнуть на предметных стеклах. Толщина предметных стекол должна быть около 1 — 1,2 мм. Нагревание лучше переносят предметные стекла из зеленоватого стекла. Опытным путем надо подобрать сорт предметных стекол, в которых при нагревании не образуется трещин.
Для микросжигания нет необходимости в особом аппарате, и нагревание можно производить на любой металлической пластинке, подогреваемой горелкой Бунзена. Но значительно удобнее производить сжигание в маленькой электрической печке, снабженной реостатом (рис. 90). Пластинка, на которую кладется предметное стекло с препаратом, не должна быть железной или медной — лучше всего сделать пластинку из платины, фарфора или плавленного кварца.
Как и всякое химическое сжигание, микросжигание должно производиться медленно. Препарат надо нагревать до определенного температурного минимума, прн котором происходит полное сжигание его.
В основном нагревание до темно-красного накала, т. е. до 500—600°, вполне достаточно, и температуру не следует поднимать выше. К электрической печи для точного измерения температуры можно приспособить пирометр типа Лешателье, но для большинства исследований это не является необходимым.
Нагревание должно достигнуть такой степени, чтобы предметное стекло немного размягчилось (не перегреть!) и тогда зер-
нышки золы сожженного препарата прилипают к стеклу, что предохраняет их от смещения. В процессе постепенного нагревания изучаемого препарата наступает фаза «обугливания». Чем постепеннее и осторожнее производится нагревание, тем меньше нарушений происходит в объекте особенно на стадии «обугливания».
После сжигания с препаратом надо обращаться с большой осторожностью. Его покрывают очень тонким покровным стеклом, прикрепляемым с краев узким слоем парафина.
Приводим следующие указания Поликара по проведению микросжигания:
1. Постепенно довести температуру до 200° в продолжение 10 минут.
2. Постепенно повышать температуру до 280° в течение следующих 5 минут.
3. Постепенно повышать температуру до 385°—5 минут.
4. Постепенно повышать температуру до 480°—5 минут.
5. Постепенно повышать температуру до 580°—5 минут.
6. Постепенно повышать температуру до 650°—3—5 минут.
7. Выключить горелку и охлаждать в течение 5—10 минут.
8. Удалить пластинки из печи и, как только наступит достаточное охлаждение среза, наложить на него покровное стекло, края которого залить смесью из 1 части парафина, 1 части воска и 1 части смолы. Наличие покровного стекла допускает применение масляно-иммерсиоиного объектива и предотвращает поглощение влаги препаратом. Больше всего нужно заботиться о том, чтобы во время удаления препарата из печи и заклейки его покровным стеклом ток воздуха не нарушил расположения пепла на гтекле.
Препарат обязательно изучается в падающем свете. Если его рассматривают при малом увеличении, то можно предметное стекло положить на пластинку черного стекла и осветить его сильной лампой сверху. Можно пользоваться также специальными объективами «ультраопак», сконструированными для рассматривания в падающем свете. Наконец, для тонких цитологических исследований следует пользоваться для темного поля кардиоид-к о н д е н с о р о м. При изучении топографии золы на препарате видимые картины необходимо постоянно сравнивать с контрольными препаратами, полученными с обычной гистологической техникой. При этом учитывается количество золы, форма, цвет, характер образовавшихся кристалликов и т. д. в различных органоидах клетки или различных элементах ткани.
Предыдущая << 1 .. 120 121 122 123 124 125 < 126 > 127 128 129 130 131 132 .. 214 >> Следующая