Книги
чёрным по белому
Главное меню
Главная О нас Добавить материал Поиск по сайту Карта книг Карта сайта
Книги
Археология Архитектура Бизнес Биология Ветеринария Военная промышленность География Геология Гороскоп Дизайн Журналы Инженерия Информационные ресурсы Искусство История Компьютерная литература Криптология Кулинария Культура Лингвистика Математика Медицина Менеджмент Металлургия Минералогия Музыка Научная литература Нумизматика Образование Охота Педагогика Политика Промышленные производства Психология Путеводители Религия Рыбалка Садоводство Саморазвитие Семиотика Социология Спорт Столярное дело Строительство Техника Туризм Фантастика Физика Футурология Химия Художественная литература Экология Экономика Электроника Энергетика Этика Юриспруденция
Новые книги
Янин В.Л. "Новгородские акты XII-XV Хронологический комментарий" (История)

Майринк Г. "Белый доминиканец " (Художественная литература)

Хусаинов А. "Голоса вещей. Альманах том 2" (Художественная литература)

Петров Г.И. "Отлучение Льва Толстого " (Художественная литература)

Хусаинов А. "Голоса вещей. Альманах том 1 " (Художественная литература)
Реклама

Микроскопическая техника - Роскин Г.И.

Роскин Г.И., Левинсон Л.Б. Микроскопическая техника — М.: Советская наука, 1957. — 469 c.
Скачать (прямая ссылка): microskopicheskayatehnika1957.djvu
Предыдущая << 1 .. 121 122 123 124 125 126 < 127 > 128 129 130 131 132 133 .. 214 >> Следующая

Зола, полученная после микросжигания препарата, может быть подвергнута дальнейшему микрохимическому и микроспект-рографическому анализу (см. специальные руководства по микрохимии и спектральному анализу).
Подробности применения метода микросжигания даны в работе Н. С. Скадовской (1944).
Микроскопическая техника
289
АУТОГИСТОРАДНОГРАФНЯ
Для обнаружения радиоактивных изотопов применяют один из трех приводимых ниже методов.
I. Гистологические срезы в контакте с фотопленкой или пластинкой. Г) Ткань фиксируют, обезвоживают и заделывают обычными гистологическими методами, с предосторожностями, предотвращающими вышелачива-ние исследуемого радиоактивного материала. 2) Срезы (5 ц) приклеивают на предметные стекла. Целлоидин или парафин удаляют и срез просушивают. Затем предметные стекла погружают в очень жидкий целлоидин (около 1-процентного, который служит для защиты ткани при дальнейших операциях; целлоидиновая пленка не должна быть толще 1—2 и). 3) Когда целлоидин подсохнет, то срезы иа предметных стеклах накрывают фотопленкой и помещают в рамку для отнечатывапня или скрепляют с пленкой зажимами. 4) Ряд пленок проявляют с различными интервалами, с тем, чтобы получить фотоснимки с оптимальным почернением. 5) После того как пленка проявлена, срез ткани окрашивают и исследуют соответствующие участки на срезе и на пленке. Операции 3 и 4 проводят в темной комнате.
II. Гистологические срезы, покрытые фотоэмульсией. (Метод Беланже и Леблона), пункты 1 и 2, как указано выше. Следующие операции проводятся в темной комнате. Диапозитивные, средней контрастности пластинки погружают в дистиллированную воду (при комнатной температуре). Когда желатина набухнет, ее соскабливают стеклянным ножом в небольшой стаканчик и расплавляют при 35—40° в водяной бане. Пять капель расплавленной желатины наносят пипеткой на срезы и распределяют равномерно мягкой кисточкой. Предметные стекла должны быть нагреты до 35—39“ С. Покрытые эмульсией предметные стекла сохраняют в светонепроницаемом ящике. Важно хранить их раздельно, чтобы избежать действия радиации одного препарата на эмульсию другого. Время экспозиции зависит от активности ткани. После соответствующей экспозиции стекла проявляют, быстро промывают водой, фиксируют, снова промывают водой в течение 30 мин. и сушат. Рекомендуется просушивать эмульсию после каждой операции, чтобы снизить число артефактов и потери срезов, однако сушка некоторых эмульсий вызывает на них трещины и — отсюда — искаженные изображения. В таких случаях лучшие результаты получаются при окрашивании срезов немедленно после проявления и промывки, без сушки между этими операциями. Окрашивание срезов проводят в стаканчиках, охлаждаемых текущей водой. Весьма важно, чтобы температура всех применяемых растворов и воды для промывки была прохладной, иначе эмульсия размягчится и испортится. При пользовании метиленовым синнм срезы по-
290
мыцают в 1-процентный щелочный раствор на 30 мин. и прополаскивают до тех пор, пока краситель не будет удален из желатины. При применении гематоксилина срезы окрашивают слегка, чтобы избежать дифференцировки. Срезы обезвоживают в спиртах; ксилол, бальзам.
III. Гистологические срезы монтируются прямо на фотопластинке. Метод Эванса. 1) Фиксация, обезвоживание и заделка производятся как обычно для гистологических объектов, однако так, чтобы избежать выщелачивания элементов, подлежащих исследованию. 2) Парафиновые срезы помещаются на поверхность теплой (42° С) дистиллированной воды в чашке Петри. Воде даю г осты ть и чашку со срезами опускают в больший стеклянный сосуд с холодной водой. 3} Следующие этапы проводятся в темной комнате. Фотопластинку или пленку подводят под срез. Угол среза придерживают иглой и пластинку вынимают. Препарат просушивают перед электрическим вентилятором и помещают в светонепроницаемый ящик. Пластинки следует держать раздельно, чтобы радиация среза на одной пластинке не действовала на эмульсию другой. 4) После надлежащей экспозиции парафин удаляют из срезов ксилолом и дают ксилолу испариться. Перед проявлением пластинки тщательно промывают, так как следи ксилола вызывают потемнение фотоэмульсии. 5) Пластинки проявляют, быстро ополаскивают, фиксируют и кислом фиксаже, промывают не менее 20-30 минут и просушивают. Весьма важно уточнить время проявления, так как в результате передержки в проявителе наблюдается вуалирование и зернистость, затрудняющие анализ фотографий. До окрашивания можно ослабить пластинки (и вуаль) в 0,2-процентном растворе перекиси марганца. 6) Препарат окрашивают гематоксилином и эозином, обезвоживают, осветляют ксилолом и заключают в бальзам или синтетическую смолу.
* *
?:
Первые работы по ауторадиографии принадлежат русскому физиологу Е. С. Лондону (1904).
КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ ВЕЩЕСТВ В СТРУКТУРАХ КЛЕТКИ (ЦИТОФОТОМЕТРИЯ)
Поглощение световых лучен, падающих на препарат, зависит от концентрации вещества в препарате и.от толщины слоя вещества.
Предыдущая << 1 .. 121 122 123 124 125 126 < 127 > 128 129 130 131 132 133 .. 214 >> Следующая