Книги
чёрным по белому
Главное меню
Главная О нас Добавить материал Поиск по сайту Карта книг Карта сайта
Книги
Археология Архитектура Бизнес Биология Ветеринария Военная промышленность География Геология Гороскоп Дизайн Журналы Инженерия Информационные ресурсы Искусство История Компьютерная литература Криптология Кулинария Культура Лингвистика Математика Медицина Менеджмент Металлургия Минералогия Музыка Научная литература Нумизматика Образование Охота Педагогика Политика Промышленные производства Психология Путеводители Религия Рыбалка Садоводство Саморазвитие Семиотика Социология Спорт Столярное дело Строительство Техника Туризм Фантастика Физика Футурология Химия Художественная литература Экология Экономика Электроника Энергетика Этика Юриспруденция
Новые книги
Янин В.Л. "Новгородские акты XII-XV Хронологический комментарий" (История)

Майринк Г. "Белый доминиканец " (Художественная литература)

Хусаинов А. "Голоса вещей. Альманах том 2" (Художественная литература)

Петров Г.И. "Отлучение Льва Толстого " (Художественная литература)

Хусаинов А. "Голоса вещей. Альманах том 1 " (Художественная литература)
Реклама

Микроскопическая техника - Роскин Г.И.

Роскин Г.И., Левинсон Л.Б. Микроскопическая техника — М.: Советская наука, 1957. — 469 c.
Скачать (прямая ссылка): microskopicheskayatehnika1957.djvu
Предыдущая << 1 .. 127 128 129 130 131 132 < 133 > 134 135 136 137 138 139 .. 214 >> Следующая

Необходимо еще раз подчеркнуть важность прижизненных наблюдений ядерных структур, безусловно необходимых, где только это позволяет объект исследования.
В отношении прижизненных наблюдении ядра применимы все указания, которые были выше приведены для наблюдений над цитоплазмой. Особо надо избегать надавливаний на препарат; помнить о важности осмотических условий среды, так как даже слабая гипотония или гипертония могут изменить ядерные структуры. Необходимо учитывать и pH среды, в которой находятся наблюдаемые клетки.
Хорошими объектами для прижизненного изучения ядер, .процессов их деления и т. д. являются эпителиальные покровные клетки маленьких личинок амфибий. Личинки можно наркотизировать хлерэтапом зщ — gg,-^, прибавляя его к среде, где находит-
ЗРЗ
ся личинка, или же пользоваться кураре (5—10 капель следующего раствора: 1 часть кураре растворяют в 100 частях воды и добавляют 100 частей глицерина); через 30—60 минут личинка теряет способность к движению. Из других наркотиков рекомендуют 3-градусный спирт или 3-процентный эфир, которые не нарушают резко процессов клеточного деления. Но лучше избегать наркоза.
Прижизненная окраска ядер описана в главе о витальной окраске.
Объектами для прижизненных наблюдений ядра могут служить клетки, указанные выше в качестве объектов для изучения цитоплазмы, кроме Foraminiefra и миксомицетов. Кроме того:
1. Незрелые яйца Unio, Anodonta, Helix, Planorbis, Limnea; среда: тканевый сок или физиологический раствор.
2. Euglena sp.
3. Крупные диатомеи.
4. Клетки эпидермиса Allium сера или Campanula trachelium: наблюдаются в воде или в изотопическом растворе сахара.
5. Фолликулярные клетки яичников саранчи, а также яичников различных насекомых; среда: физиологический раствор.
6. Ядра вытянутой формы можно наблюдать у Stentor roeseli и Vorticella.
7. Четковидные ядра — у Stentor coeruleus, Stentor polymor-phus, а также s клетках Chara или Nitella.
8. Ядра лопастной формы можно наблюдать в клетках эпидермиса аксолотля и саламандры; прижизненно и на окрашенных срезах.
9. Ядра разветвленной формы можно изучать в клетках паутинных желез Bombyx moTi, Lymantria dispar, а также в клетках желез крупных личинок Phryganida (Limnophilus, Anabolia).
10. Питательные клетки яичника Bombus sp.; прижизненные наблюдения в висячей капле.
11. Пузыревидные ядра можно наблюдать в незрелых яйцах моллюсков, морских заезд и морских ежей. Для прижизненных наблюдений могут служить зрелые ооциты насекомых и Chilopoda (Lithobius, Geophilus).
Для изучения ядерной оболочки пригодны ядра Amoeba proteus и Entamoeba blattae; прижизненные наблюдения; ядра легко изолируются при расщипывапии амеб тонкими игла ми; тотальные препараты после фиксации в смеси Буэна-Дюбоска или Шаудина. Для той же цели могут служить ядра ооцитов моллюсков; прижизненные наблюдения и опыты с изоляцией ядер при помощи тонких иголок.
Для изо ля ци и ядер из ткани следует, вырезав возможно маленькие кусочки ткани, обрабатывать их в 3—4-процентной лимонной кислоте; срок обработки различен в зависимости от объекта и каждый раз должен быть определен эмпирически.
304
Для получения большого количества изолированных ядер можно пользоваться нижеследующими указаниями.
Ядра из мышечной ткани. Ткань, очищенную от видимого жира, измельчают в мясорубке как можно тоньше. Помещают 100 г ее в литровую мензурку и заливают 500 мл 5-процентной лимонной кислоты. Изредка помешивают и оставляют на ночь. Удаляют с поверхности жир, разводят раствор равным объемом воды, тщательно фильтруют через 8 слоев марли. Пропускают фильтрат через центрифугу Шарплеса при 26 000 оборотов в минуту. Цилиндр центрифуги покрывают целлофаном для предотвращения растворяющего действия кислоты на металл. Материал, смываемый с листа целлофана, будет содержать около 50% ядер. Его промывают 4 раза последовательным центрифугированием и взвешиванием в воде. Этим содержание ядер повышается до 70%. Остаток обрабатывают (в бутыли центрифуги) смесью: 250 мл
1-процентной соляной кислоты и 250 мл 0,8-процентного раствора хлористого натрия, содержащего 2—4 мл пепсина (концентрация 1 : 10 000) —в течение 4 часов при температуре 37°. Иногда помешивают, а по окончании этого срока сливают через сифон поверхностную жидкость с осевших ядер. Промывают дистиллированной водой и центрифугируют. Контролируя ядра под микроскопом, можно убедиться, что при этом методе ядра не- претерпевают заметных повреждений.
Ядра из ткани крысиной опухоли. После удаления некротических участков, ткань измельчают в мясорубке, обра-батывают раствором лимонной кислоты и фильтруют как мышечную ткань. Добавляют к фильтру 1 объем воды и оставляют стоять 3 часа. Не центрифугируя, поступают далее как с мышечной тканью.
Ядра из л е й ко ц ит о в. К гною добавляют пять объемов 5-процентной лимонной кислоты.
Ядра быстро осаждаются; затем с осадком поступают так же, как и с опухолевой тканью.
Предыдущая << 1 .. 127 128 129 130 131 132 < 133 > 134 135 136 137 138 139 .. 214 >> Следующая