Книги
чёрным по белому
Главное меню
Главная О нас Добавить материал Поиск по сайту Карта книг Карта сайта
Книги
Археология Архитектура Бизнес Биология Ветеринария Военная промышленность География Геология Гороскоп Дизайн Журналы Инженерия Информационные ресурсы Искусство История Компьютерная литература Криптология Кулинария Культура Лингвистика Математика Медицина Менеджмент Металлургия Минералогия Музыка Научная литература Нумизматика Образование Охота Педагогика Политика Промышленные производства Психология Путеводители Религия Рыбалка Садоводство Саморазвитие Семиотика Социология Спорт Столярное дело Строительство Техника Туризм Фантастика Физика Футурология Химия Художественная литература Экология Экономика Электроника Энергетика Этика Юриспруденция
Новые книги
Янин В.Л. "Новгородские акты XII-XV Хронологический комментарий" (История)

Майринк Г. "Белый доминиканец " (Художественная литература)

Хусаинов А. "Голоса вещей. Альманах том 2" (Художественная литература)

Петров Г.И. "Отлучение Льва Толстого " (Художественная литература)

Хусаинов А. "Голоса вещей. Альманах том 1 " (Художественная литература)
Реклама

Микроскопическая техника - Роскин Г.И.

Роскин Г.И., Левинсон Л.Б. Микроскопическая техника — М.: Советская наука, 1957. — 469 c.
Скачать (прямая ссылка): microskopicheskayatehnika1957.djvu
Предыдущая << 1 .. 136 137 138 139 140 141 < 142 > 143 144 145 146 147 148 .. 214 >> Следующая

2. Различные виды Carchesium; при сильно затененной диафрагме микроскопа видны крупные митохондрии.
3. Пазуха молодых листочков Elodea canadensis. ¦
4. Сперматоциты различных насекомых—бабочек, клопов (Pirrhocoris), жуков (Blaps); средой служит гемолимфа, тканевый сок или физиологический раствор.
5. Клетки культур тканей in vitro.
Материал для наблюдения митохондрий на фиксированных препаратах. 1, Меристемные клетки Allium сера, Elodea canadensis, Pelargonium zonale, Tradescantia; фиксация смесью Мевеса, окраска железным гематоксилином или по Альтману.
2. Тотальные препараты мелких инфузорий, особенно Glaucoma scintillans; фиксация смесью Мевеса, окраска железным гематоксилином.
3. Эмбриональные клетки зародыша цыпленка (2—4-дневный); фиксация смесью Мевеса, окраска железным гематоксилином или по Альтману.
4. Пленки эпидермиса личинок амфибий; тотальные препараты, фиксация смесью Мевеса или Рего, окраска железным гематоксилином.
5. Поджелудочная железа и печень саламандры или тритона; фиксация по Шампи, окраска по Бенда, железным гематоксилином, или по Альтману.
6. Амнион эмбрионов млекопитающих; тотальные препараты; фиксация смесью Мевеса или Шампи, окраска железным гематоксилином.
7. Сперматоциты бабочек, виноградной улитки — мазки или срезы; фиксация по Шампи или смесью Мевеса; окраска железным гематоксилином по Альтману, по Кулю, по Бенда.
Аппарат Гольджи
Прижизненное наблюдение аппарата Гольджи возможно с помощью фазово-контрастного микроскопа. При фиксации аппарата Гольджи следует учитывать, что к уксусной кислоте и спиртам он еще более чувствителен, чем митохондрии. Также надо помнить, что внешние воздействия могут сильно изменять аппарат Гольджи.
Импрегнация объекта осмиевой кислотой по Кол ачеву — Насонову является наиболее надежным методом. Он заключается в следующем:
1. Фиксируют маленькие кусочки, величиной не более 3 мм1 в смеси Шампи, измененной по Насонову (2 части 3-процентного
21 Микроскопическая техника
321
раствора двухромовокислого калия, 2 части 1-процентного рас-твора хромовой кислоты, 1 часть 2-процентной осмиевой кислоты), в темноте 1—4 дня. 2. Промывают в проточной воде 24 часа.
3. Переносят для импрегнации в 1-процентную осмиевую кислоту при 35° в баночках черного или коричневого цвета на 3—6 суток. При потемнении жидкости последняя заменяется новой. Чтобы определить степень осмирования, объект после полного почерне-ния переносят в дистиллированную воду, отделяют от него иглой маленький кусочек, который кладут в глицерин и надавливанием на покровное стекло изолируют клетки. Остальной материал немедленно опять помешают в осмиевую кислоту. Если импрегнация осмием достаточна, переходят к п.-4 (Насонов). 4. Промывают в проточной воде 1 час. 5. Быстро обезвоживают и заливают в парафин. Срезы 2—5 ц толщиной.
Аппарат Гольджи — черный на светлом фоне. Ядра можно докрасить-сафранином (Г. Роскин).
Насонов рекомендует для одновременного окрашивания на одном препарате аппарата Гольджи и секреторных гранул фиксировать материал по Шампи, слабо импрегнировать его осмием, красить кислым фуксином по Альтману и дифференцировать ауран-цией; в результате получается черный аппарат Гольджи и красные гранулы на бледно-желтом фоне. Для одновременного же окрашивания аппарата Гольджи, хондриосом и секреторных гранул применяют фиксацию по Шампи, слабую импрегнацию осмием и окраску по Кулю для хондриосом; в результате — черный аппарат Гольджи, красные гранулы и фиолетово-красные хондриосомы видны на желтом фоне.
Для одновременной окраски хондриосом и гранул секрета Насонов фиксировал материал своей модификацией смеси Шампи 24 часа, споласкивал дистиллированной водой, помещал кусочек на 24 часа в смесь из части 1-процентной хромовой кислоты и двух частей продажного древесного уксуса, быстро проводил по спиртам и заливал в парафин. Срезы окрашивал по Кулю. В результате красные секреторные гранулы и фиолетовые хондриосомы выделяются на желтом фоне.
Для одновременного выявления аппарата Гольджи и капель жидкого секрета применяется длительное осмирование без последующей окраски. В результате черный аппарат Гольджи и светлые капли секрета видны на сером фоне.
Можно комбинировать метод Колачева с окраской железным гематоксилином или с докраской по Альтману. При последнем методе на препаратах одновременно можно видеть красные митохондрии и черный аппарат Гольджи. Аналогичных результатов можно достигнуть, комбинируя осмирование по Колачеву — Насонову с последующей докраской по Бенда (Г. Роскин).
Импрегнация по Кахалу. Метод с азотнокислым ураном. 1. Совершенно свежие кусочки фиксируют в смеси, в состав которой входит: азотнокислого урана — 1 г, ди-
322
стиллированной воды — 85 см« и нейтрального формалина — 15 см3. Продолжительность фиксации 10—24 часа. Время от времени встряхивают. Нервные клетки лучше фиксировать в смеси из 15—20 см3 формалина, 80 см3 дистиллированной воды, 30 см3 абсолютного этилового спирта и 1 г азотнокислого урана. 2. После быстрого споласкивания в дистиллированной воде (несколько секунд) кусочки помещают в 1—1,5-процентный раствор азотнокислого серебра, в котором при комнатной температуре оставляют в зависимости от их величины на 36—48 часов. 3. После быстрого споласкивания в дистиллированной воде кусочки для восстановления помещают на 8—24 часа в раствор, содержащий 1—2 г гидрохинона, 15 см3 нейтрального формалина, 100 см3 воды и 0,1 —
Предыдущая << 1 .. 136 137 138 139 140 141 < 142 > 143 144 145 146 147 148 .. 214 >> Следующая