Книги
чёрным по белому
Главное меню
Главная О нас Добавить материал Поиск по сайту Карта книг Карта сайта
Книги
Археология Архитектура Бизнес Биология Ветеринария Военная промышленность География Геология Гороскоп Дизайн Журналы Инженерия Информационные ресурсы Искусство История Компьютерная литература Криптология Кулинария Культура Лингвистика Математика Медицина Менеджмент Металлургия Минералогия Музыка Научная литература Нумизматика Образование Охота Педагогика Политика Промышленные производства Психология Путеводители Религия Рыбалка Садоводство Саморазвитие Семиотика Социология Спорт Столярное дело Строительство Техника Туризм Фантастика Физика Футурология Химия Художественная литература Экология Экономика Электроника Энергетика Этика Юриспруденция
Новые книги
Янин В.Л. "Новгородские акты XII-XV Хронологический комментарий" (История)

Майринк Г. "Белый доминиканец " (Художественная литература)

Хусаинов А. "Голоса вещей. Альманах том 2" (Художественная литература)

Петров Г.И. "Отлучение Льва Толстого " (Художественная литература)

Хусаинов А. "Голоса вещей. Альманах том 1 " (Художественная литература)
Реклама

Микроскопическая техника - Роскин Г.И.

Роскин Г.И., Левинсон Л.Б. Микроскопическая техника — М.: Советская наука, 1957. — 469 c.
Скачать (прямая ссылка): microskopicheskayatehnika1957.djvu
Предыдущая << 1 .. 138 139 140 141 142 143 < 144 > 145 146 147 148 149 150 .. 214 >> Следующая

3. Тотальные препараты эпидермиса личинок амфибий, обработка по Колчаеву — Насонову. 4. Сперматоциты легочных моллюсков, клопов и жуков; обработка по Колачеву—Насонову или по Аойама.
При цитологическом аиализе клеточных органоидов и включений можно пользоваться следующей примерной схемой как первой ступенью в исследовании.
1. Материал, фиксированный по Шампи или Альтману, можно обрабатывать:
а) по Альтману или железным гематоксилином для выявления митохондрий;
6} по Колачеву — Насонову импрегнировать для выявления аппарата Гольджи;
в) по Чиаччио на липоиды, предварительно подвергнув хромированию (3 дня в 3—5-процентном двухромовокислом калии);
г) хорошо промыв, можно делать срезы на замораживающем мнкротоме для дальнейшей окраски на жир.
2. Материал, фиксированный по Буэиу:
а) можно окрашивать различными гистологическими методами для получения общей картины;
б) обрабатывать специальными методами для выявления ядерных структур, хроматина, хромосом, ядрышек;
в) обрабатывать по Бауэру или Шабадашу для выявления гликогена.
Вакуом
Образования, в своей совокупности обозначаемые термином «вакуом», можно выявить прижизненно нли супр-авитально, прибавляя нейтральный красный к жидкости, в которой производят исследование.
В одних животных клетках нейтральный красный накапливаем в пред-существующих гранулах или вакуолях, в других клетках эти гранулы являются новообразованиями и, наконец, взаимодействие между красителями и протоплазмой может вызвать образование (огмешивание) в клетках телец, которые Н. Г. Хлопин называл «криномом». Следовательно все эти образования, появляющиеся при окраске нейтральным красным или предсуществовав-шие в различных растительных и животных клетках, нельзя считать гомологичными структурами. Волютиновые гранулы, различные метахроматические гранулы, презимогеновые зерна и т. д. могут также окрашиваться нейтральным красным.
Трофоспонгии
Для выявления трофоспоигий можно фиксировать материал 24 часа в 2,5—5-процентной трихлормолочной кислоте и затем залить в парафин. Срезы толщиной 4—5 ц красят 24—48 часов резорцин-фуксином по Вейгерту и обычным способом заключают в бальзам. .
325
ГИСТОЛОГИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ Эпителий
Для прижизненного наблюдения можно лезвием безопасной бритвы срезать тонкие пластинки с органов, выстланных эпителием. Легко удается прижизненное наблюдение биения ресничного эпителия, например, эпителия жаберных пластинок пресноводных моллюсков, слизистой оболочки нёба лягушки. Многое может дать прижизненное наблюдение над культурами эпителия in vitro.
Прижизненное окрашивание см. стр. 66.
Изучать формы отдельных эпителиальных клеток удобно на мацерироваииом материале. Для этой цели нефиксированные кусочки органов, покрытых эпителием (кишечник, трахея и т. п.), помещают в мацерирующие жидкости. Наилучшие результаты дает спирт в треть (30 см3 90-градусного спирта, 60 см3 воды), где кусочки ткани должны пробыть 12—24 часа, иногда несколько суток, после чего встряхиванием или осторожным раздиранием кусочка иглами можно изолировать клетки; при этом методе реснички мерцательного эпителия обычно сохраняются. Хорошая мацерация достигается обработкой разведенной хромовой кислотой (1 г на 1000 см3 воды), но процесс идет медленно; 1—5 дней. Ткань можно мацерировать и 0,01-про-центиой осмиевой кислоте, куда кладут маленькие кусочки ткани на 24 часа, затем споласкивают водой и осторожно расщипывают в глицерине. Во всех этих случаях количество мацериру-ющей жидкости должно быть минимальным и превышать объем мацерируемого кусочка не больше, чем в 2—3 раза. Если полученные при мацерации клетки нужно окрасить и затем обезводить, то взвссь обработанных тем или иным способом клеток можно после каждой операции отцентрифугировать и отсосать излишнюю жидкость.
Для мацерации можно пользоваться также насыщенным раствором борной кислоты (см. мацерация мускульной ткани) или сильно разведенной (1 часть на 100 частей воды) жидкостью Мюллера: двухромовокислый калий — 2,5 г, сернокислый натрий— 1 г, дистиллированная вода— 100 см3.
После мацерации кусочек можно осторожно перенести на несколько часов в пикрокармин для окрашивания. Затем шпателем осторожно проводят по эпителию и стряхивают соскоб в банку с глицерином, к которому прибавлен кусочек тимола или камфоры (для предохранения от заплесневення). Для приготовления препарата каплю глицерина с клетками наносят на предметное стекло, накрывают покровным и обводят края его асфальтовым лаком или менделеевской замазкой.
Мацерированные клетки в глицерине могут сохраняться очень долго.
Для изучения клеточных границ эпителия и эндотелия используют метод серебрения по Ранвье. С этой целью
326
мембраны, мезентерий, кусочки перикарда, вскрытые тонкие сосуды и т. п. споласкивают дистиллированной водой для удаления крови и кладут в 0,5-процентное азотнокислое серебро примерно иа 5 минут (кусочек ткани должен стать непрозрачным), затем переносят в сосуд с достаточным количеством дистиллированной воды и выставляют на солнце до потемнения ткани, принимающей коричневый тон (примерно 1—2 дня). После этого кусочки хорошо споласкивают дистиллированной водой и исследуют в глицерине, или, проводя, как обычно, через спирты и ксилол (мембраны, во избежание сморщивания, надо растянуть иглами иа корковой пластинке), заключают в бальзам. При этом методе клеточные границы получаются черными на бесцветном фоне. Посеребренный материал можно докрашивать квасцовым гематоксилином. При серебрении надо избегать соприкосновения азотнокислого серебра с металлическими инструментами.
Предыдущая << 1 .. 138 139 140 141 142 143 < 144 > 145 146 147 148 149 150 .. 214 >> Следующая