Книги
чёрным по белому
Главное меню
Главная О нас Добавить материал Поиск по сайту Карта книг Карта сайта
Книги
Археология Архитектура Бизнес Биология Ветеринария Военная промышленность География Геология Гороскоп Дизайн Журналы Инженерия Информационные ресурсы Искусство История Компьютерная литература Криптология Кулинария Культура Лингвистика Математика Медицина Менеджмент Металлургия Минералогия Музыка Научная литература Нумизматика Образование Охота Педагогика Политика Промышленные производства Психология Путеводители Религия Рыбалка Садоводство Саморазвитие Семиотика Социология Спорт Столярное дело Строительство Техника Туризм Фантастика Физика Футурология Химия Художественная литература Экология Экономика Электроника Энергетика Этика Юриспруденция
Новые книги
Янин В.Л. "Новгородские акты XII-XV Хронологический комментарий" (История)

Майринк Г. "Белый доминиканец " (Художественная литература)

Хусаинов А. "Голоса вещей. Альманах том 2" (Художественная литература)

Петров Г.И. "Отлучение Льва Толстого " (Художественная литература)

Хусаинов А. "Голоса вещей. Альманах том 1 " (Художественная литература)
Реклама

Микроскопическая техника - Роскин Г.И.

Роскин Г.И., Левинсон Л.Б. Микроскопическая техника — М.: Советская наука, 1957. — 469 c.
Скачать (прямая ссылка): microskopicheskayatehnika1957.djvu
Предыдущая << 1 .. 142 143 144 145 146 147 < 148 > 149 150 151 152 153 154 .. 214 >> Следующая

332
Результаты окраски: ядра — черные; цитоплазма — красная-
коллагеновые волокна — интенсивно синие. ’
Методы окраски эластических волокон соединительной ткани. Окрашивание о р с е и н о м. Характер фиксатора не имеет особого значения.
1. Приготовляют парафиновые срезы, освобождают их от парафина и доводят до воды. 2. Окрашивают в растворе орсеина
0,5—1 час. Приготовление орсеина: растворяют 1 г орсеина в 100 см3 70-градусного спирта и добавляют 1 см3 соляной кислоты; раствор долго не сохраняется. 3. Срезы споласкивают в дистиллированной воде, помещают в абсолютный спирт и, контролируя под микроскопом, дифференцируют до тех пор, пока ие будут окрашены исключительно эластические волокна. 4. Проводят через ксилол, заключают в бальзам.
Эластические волокна окрашиваются в красновато-коричневый цвет.
Перед окраской срезов орсеипом ядра можно окрасить квасцовым гематоксилином.
Другим методом может служить комбинированная окраска
о р с е и и ом-кв а сц о в ы м гематоксилином и пикро-фуксином. Приготовляют парафиновые срезы, освобождают их от парафина, переводят в воду и обрабатывают следующим образом:
1. Окрашивают в растворе орсеина — 1 час. 2. Промывают в дистиллированной воде, два раза сменяя последнюю, — 3 мину ты. 3. Окрашивают квасцовым гематоксилином. 4. Промывают в дистиллированной воде — 3 минуты. 5. Промывают в проточной воде — 3 минуты. 6. Споласкивают в дистиллированной воде— 3 минуты. 7. Окрашивают в подкисленном растворе пикро-фуксина (к 60 см3 пикрофуксина прибавляют перед употреблением 7 капель уксусной кислоты)— 5 минут, 8. Погружают на
2—3 минуты в дистиллированную воду, к 60 смъ которой предварительно прибавляют 2.5 см3 подкисленного раствора пикрофуксина. 9. Обсушивают фильтровальной бумагой. 10. Проводят через 96-градусный спирт — 1 минута. 11. Абсолютный спирт — 3 минуты. 12. Ксилол, заключают в бальзам.
Ядра окрашиваются в темно-коричневый цвет, эластические волокна — от красновато-коричневого до черного, коллагеновая соединительная ткань — в красный, мышечная ткань — в желтый цвет.
Хорошо выявляются эластические волокна после окраски р е-3 о р ц и н-ф у к с и н о м.
Краситель готовят следующим образом: растворяют 4 г резорцина в 100 см3 дистиллированной воды и доводят раствор до кипения в фарфоровой чашке; к кипящему раствору приливают 100 см3 2-процентиого основного фуксина и снова доводят смесь до кипения; добавляют 25 см3 продажного (оффицинального) раствора полуторахлористого железа (liquor ferri sesquichlorati),
333
кипятят еще несколько минут, все время помешивая; смесь охлаждают, фильтруют, фильтрат выливают.
Фильтр с осадком помещают в ту же самую фарфоровую чашку, в которой кипятилась смесь, и приливают 200 см3 96-градусного спирта.
Осторожно нагревают спирт на водяной или песочной банс-п помещают до растворения осадка. Фильтр удаляют, раствор охлаждают и доливают столько 96-градусного спирта, чтобы снова оказалось 200 см3 раствора. Прибавляют 4 см3 2-процентной соляной кислоты. Для окрашивания срезы помещают в резорцин-фуксин на 2—24 часа и дифференцируют 96-градусным спиртом до тех пор, пока не будут отчетливо видны темно-синие эластические волокна на светлом фоне. Ядра можно предварительно окрасить фуксином. При заключении в бальзам не следует применять карбол-ксилол.
Для окраски различных клеточных элементов соединительной ткани (особенно рыхлой соединительной ткани) можно рекомендовать окраску гематоксилином по Ясвоину и окраску азур-эозином по Максимову. В нашей лаборатории при изучении рыхлой соединительной ткани с большим успехом применяется метод ленинградского гистолога Г. Ясвоииа.
Способ изготовления пленочных препаратов рыхлой соединительной ткани по Г. Ясвоину
Кожу вместе с подкожной (или межмышечной) соединительной тканью быстро отделяют, не допуская ее подсыхания, и фиксируют в большом количестве 10-процентного формалина, нейтрализованного непосредственно перед разведением (в банку со 100 см3 продажного формалина всыпают 5—6 г углекислой магнезии, несколько минут взбалтывают, затем фильтруют).
Препараты можно изготовлять через несколько часов после фиксации и затем примерно в течение 10—15 дней (материал хранить в том формалине, в котором он был зафиксирован). Рыхлая соединительная ткань после фиксации должна быть бархатистой наощупь. Если ткань жестковата (или становится такой через 10—15 дней), материал непригоден для изготовления пленочных, препаратов. Из этой бархатистой, стекловидной, прозрачной ткани острыми ножницами вырезают узкую полоску (1 мм шириной), которую иглой кладут на предметное стекло, покрытое тонким слоем белка с глицерином. Кожу кладут обратно в формалин соединительной тканью вниз. Из одного куска кожи можно приготовить много препаратов.
Вырезанную полоску передвигают иглой по стеклу 5—8 раз, описывая при этом во избежание закручивания фигуру восьмерки. К расправлению надо приступать тогда, когда полоска станет менее влажной, но he подсохнет. Установив полоску ткани посредине стекла, можно приступить к ее растягиванию. Растягивание (ие расщипывание) следует производить двумя иглами. Существенно
Предыдущая << 1 .. 142 143 144 145 146 147 < 148 > 149 150 151 152 153 154 .. 214 >> Следующая