Книги
чёрным по белому
Главное меню
Главная О нас Добавить материал Поиск по сайту Карта книг Карта сайта
Книги
Археология Архитектура Бизнес Биология Ветеринария Военная промышленность География Геология Гороскоп Дизайн Журналы Инженерия Информационные ресурсы Искусство История Компьютерная литература Криптология Кулинария Культура Лингвистика Математика Медицина Менеджмент Металлургия Минералогия Музыка Научная литература Нумизматика Образование Охота Педагогика Политика Промышленные производства Психология Путеводители Религия Рыбалка Садоводство Саморазвитие Семиотика Социология Спорт Столярное дело Строительство Техника Туризм Фантастика Физика Футурология Химия Художественная литература Экология Экономика Электроника Энергетика Этика Юриспруденция
Новые книги
Янин В.Л. "Новгородские акты XII-XV Хронологический комментарий" (История)

Майринк Г. "Белый доминиканец " (Художественная литература)

Хусаинов А. "Голоса вещей. Альманах том 2" (Художественная литература)

Петров Г.И. "Отлучение Льва Толстого " (Художественная литература)

Хусаинов А. "Голоса вещей. Альманах том 1 " (Художественная литература)
Реклама

Микроскопическая техника - Роскин Г.И.

Роскин Г.И., Левинсон Л.Б. Микроскопическая техника — М.: Советская наука, 1957. — 469 c.
Скачать (прямая ссылка): microskopicheskayatehnika1957.djvu
Предыдущая << 1 .. 143 144 145 146 147 148 < 149 > 150 151 152 153 154 155 .. 214 >> Следующая

334
уловить наиболее благоприятный для этого момент: излишне влажная полоска ткани будет не растягиваться, а перемещаться с места на место, и клеточные элементы, в ней заключенные, окажутся при этом деформированными; подсохшая полоска вообще не будет растягиваться. В результате растягивания, начатого в подходящий момент, полоска ткани превратится в тончайшую пленку. Чем тоньше пленка, тем лучше получится препарат. Не давая пленке окончательно высохнуть, ее помещают на 5 минут в 96-градусный спирт. Приклеившуюся к стеклу пленку доводят через ннсходящне спирты до дистиллированной воды, в которой оставляют ее 5—10 минут. Пленка не должна отставать от стекла. Окрашивать железным гематоксилином по Ясвоину.
Метод прост по выполнению и дает очень хорошие результаты.
Импрегнация соединительной ткани
Импрегнация по Бильшовскому — Марешу. Необходимым условием работы является абсолютная чистота сосудов, пипеток и стеклянных палочек (для каждой жидкости надо иметь особую пипетку).
1. Фиксируют кусочки в формалине или в смесях Ценкера, Штиве и Карнуа. 2. Приготовляют парафиновые срезы толщиной в 5—10 11, наклеивают их на совершенно чистые предметные стекла, освобождают от парафнпа, переводят в дистиллированную воду. 3. Помещают срезы в 0,25-процентный раствор марганцевокислого калия на 3 минуты. 4. Промывают в дистиллированной воде. 5. Переносят в 1-процентный раствор щавелевой кислоты иа 5 минут. 6. Промывают в дистиллированной воде, несколько раз ее сменяя, 1—2 часа. 7. Помещают в 2-процентный раствор азотнокислого серебра на 1—2 дня. 8. Быстро, не более 2—5 секунд, промывают срезы в дистиллированной воде, один раз сменяя ее.
9. Переносят в аммиачное серебро на 5—10 минут (лучше всего наливать на препарат при помощи пипетки по каплям). Приготовление аммиачного серебра: к 10 см3 10-процентного азотнокислого серебра прибавляют 5 капель 40-процентного едкого натра: получившийся при этом осадок растворяют, осторожно прибавляя по каплям аммиак (уд. вес 0,875—0,910; химически чистый); после прибавления каждой капли аммиака слегка взбалтывают раствор; остерегаться избытка аммиака, лучше оставить несколько крупинок осадка нерастворенными. После растворения осадка долить дистиллированной водой до 20 см?. 10. Раствор аммиачного серебра сливают и срезы промывают 5—10 секунд в дистиллированной воде, сменяя ее один раз. 11. Помещают в нейтральный формалин (1 часть формалина +9 частей водопроводной воды) на 10 минут. 12. Промывают в проточной воде 15 минут.
13. Споласкивают в дистиллированной воде (сменяя ее). 14. Переносят в подкисленный раствор хлорного золота (на 10 см? дистиллированной воды прибавляют 3 капли 1-процентного рас-
335
твора хлорного золота и 2 капли ледяной уксусной кислоты).
15. Промывают в проточной воде 1 минуту. 16. Фиксируют в 5-процентном растворе гипосульфита полминуты. 17. Промывают основательно в проточной воде 1—2 Часа. 18. Обезвоживают и, проведя через ксилол, заключают в канадский бальзам.
Решетчатые волокна окрашиваются в черный цвет; коллагеновые волокна — в темно-коричневый или чериый. Иногда окрашиваются в черный или коричневый цвет ядра.
Этот метод удается также и на замороженных срезах (начинают обработку с п. 6).
Хорошие результаты дает импрегнация аргентофиль ных волокон по способу Фута.
Фиксация формалином; срезы на замораживающем микротоме (можно использовать и заливку в парафин). Срезы обрабатывают 5 минут 0,25-процентным раствором марганцевокислого калия. Затем срезы помещают на 30 минут в 5-процентный раствор щавелевой кислоты, промывают дистиллированной водой и переносят в 20-процентный раствор азотнокислого серебра (48 часов в темноте). Быстро споласкивают в дистиллированной воде и помещают на 30 минут в аммиачное серебро, промывают дистиллированной водой, обрабатывают 30 минут 5-процентным раствором формалина, промывают проточной водой, золотят в 1-процентном растворе гипосульфита, промывают водой, заключают в бальзам. Рецепт аммиачного серебра: к 10 сж3 10-процеитного раствора азотнокислого серебра прибавляют 20 капель 40-процентного раствора едкого натрия, добавляют по каплям аммиак до растворения осадка и доводят дистиллированной водой общий объем до 80 см3; фильтруют.
Импрегнация поВальгрену позволяет серебрить тончайшие соединительнотканные фибриллы.
1. Фиксация материала 5—9 часов в смеси: 1-процентный водный нитрат-уран — 100 см3, формалин — 20 см3. 2. Сполоснуть в дистиллированной воде 1—2 минуты и перенести в 1-процентное азотнокислое серебро па 24—48 часов. 3. Быстро сполоснуть дистиллированной водой и восстанавливать серебро 12—24 часа в смеси: пирогалловой кислоты — 1 г, формалина 5-процентного— 100 см5. 4. Промыть в дистиллированной воде и через спирты и хлороформ залить в парафин. Наклеенные и освобожденные от парафина срезы обработать до исчезновения их коричневой окраски в следующей смеси: перманганата — 0,5 г, концентрированной серной кислоты—1 сж3, дистиллированной воды— 1000 см3.
5. Затем продержать несколько минут в 1-процентной щавелевой кислоте. Сполоснуть срезы дистиллированной водой, позолотить их и т. д., как в оригинальном методе Бильшовского. Можно докрасить ядра квасцовым кармином.
Предыдущая << 1 .. 143 144 145 146 147 148 < 149 > 150 151 152 153 154 155 .. 214 >> Следующая