Книги
чёрным по белому
Главное меню
Главная О нас Добавить материал Поиск по сайту Карта книг Карта сайта
Книги
Археология Архитектура Бизнес Биология Ветеринария Военная промышленность География Геология Гороскоп Дизайн Журналы Инженерия Информационные ресурсы Искусство История Компьютерная литература Криптология Кулинария Культура Лингвистика Математика Медицина Менеджмент Металлургия Минералогия Музыка Научная литература Нумизматика Образование Охота Педагогика Политика Промышленные производства Психология Путеводители Религия Рыбалка Садоводство Саморазвитие Семиотика Социология Спорт Столярное дело Строительство Техника Туризм Фантастика Физика Футурология Химия Художественная литература Экология Экономика Электроника Энергетика Этика Юриспруденция
Новые книги
Янин В.Л. "Новгородские акты XII-XV Хронологический комментарий" (История)

Майринк Г. "Белый доминиканец " (Художественная литература)

Хусаинов А. "Голоса вещей. Альманах том 2" (Художественная литература)

Петров Г.И. "Отлучение Льва Толстого " (Художественная литература)

Хусаинов А. "Голоса вещей. Альманах том 1 " (Художественная литература)
Реклама

Микроскопическая техника - Роскин Г.И.

Роскин Г.И., Левинсон Л.Б. Микроскопическая техника — М.: Советская наука, 1957. — 469 c.
Скачать (прямая ссылка): microskopicheskayatehnika1957.djvu
Предыдущая << 1 .. 144 145 146 147 148 149 < 150 > 151 152 153 154 155 156 .. 214 >> Следующая

Метод Снесарева 1 на аргентоф ильные (решет-
1 Методы выявления аргентофильных волокон, так же как и другие методы проф. Снесарева, даны согласно оригинальной прописн автора,
336
.атые и др.) волокна. 1. Фиксировать в формалине; при [спользоваиии старого материала, дофиксировать его в
4—20-процентном формалине (лучше в нейтральном). 2. Длительно отмывать формалин в проточной воде (от получаса до ;уток). 3. Заключить в 12,5-процентную карболовую желатину, а крез ночь или в тот же день—в 25-процентную желатину1.
4. Вырезать кусочки и дополнительно фиксировать в 5—10-про-центном формалине (на этой стадии можно длительно сохранять кусочки). 5. Быстро промыть в воде и резать на замораживающем микротоме: срезы помещать в дистиллированную воду. 6. Поместить срезы на 2 суток в 4-процентный раствор железных квасцов (брать невыветрившиеся кристаллы, жидкость фильтровать). 7. Сполоснуть дважды дистиллированной водой. 8. На сутки поместить в 10-процентный (или 5-процентный) раствор азотнокислого серебра; работать с химически чистой посудой, обязательно мыть ее кислотой (технической серной); срезы перенести изогнутой стеклянной палочкой: если нужен шпатель, употреблять только роговой. 9. Далее срез проводить через аммиачное серебро: быстро промыть дистиллированной водой, поместить в аммиачное серебро (3—5 минут), быстро промыть в дистиллированной воде и поместить в 20-процентный формалин. (Способ приготовления аммиачного серебра приведен при описании метода Билыновского). Затем производят золочение среза по Билынов-скому. 10. Золочение срезов: помещают срезы в хлорное золото, затем в 5-процентный гипосульфит 20—30 секунд (счетом), переносят в воду. 11. Наклеивают срез на предметное стекло, смазанное белком-глицерином, если нужно — предварительно расправляют срез в аммиачной воде. 12. Проводят через ацетон, ксилол, заключают в бальзам. Перед ксилолом хорошо провести через карбол-ксилол: Метод допускает различные дополнительные окраски, например, шарлах, пикрофуксин и т. д.
Метод Снесарева для аргентофильных волокон иа парафиновых срезах. Если уже имеются готовые парафиновые серии материала, фиксированного формалином, то только что описанный метод можно применить так:
1. Депарафинируют среды, проводят через спирты, помещают в воду. 2. Можно подержать срезы в 5—10-процентном формалине и затем отмыть его в проточной воде (не обязательно). 3. Тщательно промывают в дистиллированной воде. 4. Стекла со срезами покрывают слоем карболовой желатины, сначала 12,5-процентной, потом 25-процентиой, для чего их целиком проводят через жидкую желатину в термостате. 5. Дают желатине затвердеть ровным слоем. 6. Помещают в формалин (5—10-процентный). 7. Спола-
1 Карболовую желатину -приготовляют, растворяя 25 г желатины на водяной бане (37°) в 100 см3 1-процентного раствора карболовой кислоты (карболовая вода). Для получения 12,5-лроцентмой желатины разводят одну часть основного раствора одной частью карболовой воды.
22 Микроскопическая техника 337
скивают в дистиллированной воде; переносят в железные квасцы и т. д.; через все реактивы срезы проводят на стеклах.
Метод Ачукарро. 1. Материал фиксируют в формалине (1 часть формалина и 9 частей воды). Делают замороженные срезы толщиной 10—20 [I. Непродолжительно промывают их в дистиллированной воде. Можно также употреблять парафиновые или целлоидиновые срезы с материала, зафиксированного и в других жидкостях. Не годны фиксирующие жидкости, содержащие хромовые соли. 2. Обрабатывают срезы при 50° насыщенным на холоду таниновым раствором в течение 15 минут или дольше.
3. После охлаждения обмывают срезы в дистйллированииой воде до тех пор, пока они снова не станут непрозрачными, затем перекладывают их в 20 см3 дистиллированной воды, к которой прибавляют 8—12 капель раствора аммиачного серебра по Бильшовско-му. В этом растворе срезы становятся коричневыми. В растворе серебра необходимо срезы осторожно передвигать стеклянной палочкой. Степень необходимого окрашивания различна для различных органов. 4. Затем срезы непосредственно переносят в раствор формалина 1:9. 5. Промывают их в воде, докрашивают протоплазму и ядра (фуксином, эозином, метилен-азуром), проводят через восходящий ряд спиртов, ксилол, заключают в бальзам.
При правильном применении этого метода даже тончайшие волокна окрашиваются в темно-коричневый цвет.
Модификация метода Ачукарро по Дель-Рио-Г ортега. Рио-Гортега предложил целый ряд модификаций метода Ачукарро, благодаря которым метод применим не только для выявления соединительной ткани, но и различных других клеточных и тканевых структур. Методы Гортега дают хорошие результаты при формалиновой и при других фиксациях, Окрашивают так замороженные срезы, так и иеприклеенные целлоидиновые. Иногда удается окрасить также приклеенные парафиновые срезы. Очень существенно, чтобы раствор танина .подогревался до температуры 50°.
1-я модификация. Импрегнируются: ядра, центросомы,
пластосомы, клеточные зерна, фибриллы эпителия, миофибриллы, клеточные включения, волокна глии, фибрин, эластические волокна. Неокрашенными остаются — коллагеновые и решетчатые волокна соединительной ткани.
Предыдущая << 1 .. 144 145 146 147 148 149 < 150 > 151 152 153 154 155 156 .. 214 >> Следующая