Книги
чёрным по белому
Главное меню
Главная О нас Добавить материал Поиск по сайту Карта книг Карта сайта
Книги
Археология Архитектура Бизнес Биология Ветеринария Военная промышленность География Геология Гороскоп Дизайн Журналы Инженерия Информационные ресурсы Искусство История Компьютерная литература Криптология Кулинария Культура Лингвистика Математика Медицина Менеджмент Металлургия Минералогия Музыка Научная литература Нумизматика Образование Охота Педагогика Политика Промышленные производства Психология Путеводители Религия Рыбалка Садоводство Саморазвитие Семиотика Социология Спорт Столярное дело Строительство Техника Туризм Фантастика Физика Футурология Химия Художественная литература Экология Экономика Электроника Энергетика Этика Юриспруденция
Новые книги
Янин В.Л. "Новгородские акты XII-XV Хронологический комментарий" (История)

Майринк Г. "Белый доминиканец " (Художественная литература)

Хусаинов А. "Голоса вещей. Альманах том 2" (Художественная литература)

Петров Г.И. "Отлучение Льва Толстого " (Художественная литература)

Хусаинов А. "Голоса вещей. Альманах том 1 " (Художественная литература)
Реклама

Микроскопическая техника - Роскин Г.И.

Роскин Г.И., Левинсон Л.Б. Микроскопическая техника — М.: Советская наука, 1957. — 469 c.
Скачать (прямая ссылка): microskopicheskayatehnika1957.djvu
Предыдущая << 1 .. 145 146 147 148 149 150 < 151 > 152 153 154 155 156 157 .. 214 >> Следующая

1. Материал фиксируют 10-процентным формалином не менее 10 дней. 2. Срезы, приготовленные на замораживающем микротоме, из дистиллированной воды кладут на 5 минут в 30-процентный водный раствор танина (50—55°). 3. Затем срезы переносят в наполненную дистиллированной водой стеклянную чашечку с темным дном. К 20 см3 дистиллированной воды прибавляют 4 смг аммиака. Срезы, находящиеся в этой жидкости, передвигают стеклянной палочкой, пока они снова не приобретут гибкость и прозрачность, легко заметную на темном фоне чашечки. 4. После этого срезы переносят последовательно в три стеклянные чашеч-
338
ки; каждая наполнена 10 см3 дистиллированной воды и 1 см3 аммиачного раствора серебра. Как только срезы в первой чашечке начинают окрашиваться, их переносят во вторую чашечку; когда они становятся желтыми, их переносят в третью, в которой желтый тон срезов еще больше усиливается. 5. Затем промывают в дистиллированной воде. 6. Золотят в 0,2-процентном растворе хлорного золота 20—30 минут при температуре 40—45°. 7. Промывают в дистиллированной воде. 8. Помещают в 5-процентный раствор гипосульфита на 1 минуту. 9. Промывают в проточной воде, проводят через спирты, ксилол, заключают в бальзам.
2-я модификация. Этим методом выявляются в первую очередь решетчатые волокна, окрашивающиеся в черный цвет; коллагеновая соединительная ткань окрашивается в слабо-коричневый тон.
1. Фиксировать объект в 10-процентном формалине или продолжительное время в спирте. Приготовить замороженные срезы; можно также импрегнировать целлоидиновые срезы (лучше растворить целлойдин перед импрегнацией в эфире — спирте.
2. Срезы поместить на 5 минут в 1-процентный раствор танина в 96-градусном спирте (при температуре 50—55°). 3. Быстро сполоснуть дистиллированной водой. 4. Срезы последовательно провести через 3 чашечки, наполненные каждая 10 см3 дистиллированной воды с 1 см3 раствора аммиачного серебра, как при 1-й модификации. Когда срез окрасится в бледно-желтый цвет, переложить его в дистиллированную воду, где и оставить лежать, пока он не примет более'равномерный темный той. 5. Быстро промыть в дистиллированной воде (при плохо импрегнируюшихся препаратах всего несколько секунд). 6. Поместить в нейтральный 20-про-центный формалин примерно на 30 секунд. Интенсивность импрегнации можнэ регулировать как быстротой предшествовавшей промывки, так и временем пребывания в формалине. 7. Основательно промыть в воде и далее, как в первой модификации.
3-я модификация. Коллагеновые волокна соединительной ткани окрашиваются в темно-фиолетовый цвет.
1. Фиксируют в формалине или, лучше, продолжительное время в спирте. 2. Замороженные срезы переносят из воды на 5 минут в 1-процентный спиртовый раствор танина при 50—55°. 3. Быстро промывают в дистиллированной воде (2—3 секунды). Импрегни-руют в трех последовательных чашечках как при 1-й модификации, пока срез не становится коричнево-желтым. 5. Тщательно промывают. 6. Золотят в 0,2-процентном водном растворе хлорного золота 15 минут (при 40—45°), пока срезы, ие приобретут темно-фиолетовый цвет. 7. Фиксируют в 5-процентном гипосульфите.
8. Тщательно промывают в воде и далее, как обычно. Приготовление раствора аммиачного серебра по Дель-Рио-Гортега; к 30 см5 10-процентного раствора азотнокислого серебра прибавляют 40 капель 40-процентного едкого натра. Выпавший осадок промывают 10—12 раз дистиллированной водой (в общем исполь-
22*
339
зуют 1—1,5 л воды). Промытый осадок размешивают в 50 см3 дистиллированной воды и к раствору осторожно прибавляют по каплям аммиак до растворения осадка. Затем добавляют дистиллированную воду до 150 лм3. Раствор можно длительно хранить в банке из темного стекла.
Гиалиновый хрящ
Для получения свежих препаратов можно использовать хрящевую часть epi- или hyposternum или лопатки лягушки, а также мечевидный отросток мыши, крысы или морской свинки. Мягкие ткани, окружающие хрящ, соскабливают скальпелем. Исследуют гиалиновый хрящ в тканевой жидкости или в физиологическом растворе поваренной соли. Во избежание испарения препарат следует покрыть стеклом. Из более крупных кусочков хряща (например, от головки бедра лягушки) можно сделать бритвой относительно тонкие срезы. Иногда рекомендуют «аблюдать такие срезы в 0,5-процентном растворе квасцов.
Фиксация и окраска см. ниже (эластический хрящ).
Эластический хрящ
Для изучения свежих препаратов используют тонкие срезы (лучше на замораживающем микротоме) надгортанника или хряща ушной раковины. Для изучения хряща на фиксированных препаратах в качестве фиксатора применяют смесь Флемминга, дающую отличные результаты, а также смеси Шаффера, Ценкера или сулему с уксусной кислотой.
Некоторые трудности представляют приклеивание срезов к предметному стеклу. Для этой цели служит смесь из 2 см3 ацетона с 1 каплей метилбензоата и 8 см5 воды; добавляют 2—3 капли белка с глицерином. Срезы хряща легко образуют складки.
Окрашивание квасцовым гематоксилином, целестииовым синим или галаминовым синим или смесью Доминичи.
Предыдущая << 1 .. 145 146 147 148 149 150 < 151 > 152 153 154 155 156 157 .. 214 >> Следующая