Книги
чёрным по белому
Главное меню
Главная О нас Добавить материал Поиск по сайту Карта книг Карта сайта
Книги
Археология Архитектура Бизнес Биология Ветеринария Военная промышленность География Геология Гороскоп Дизайн Журналы Инженерия Информационные ресурсы Искусство История Компьютерная литература Криптология Кулинария Культура Лингвистика Математика Медицина Менеджмент Металлургия Минералогия Музыка Научная литература Нумизматика Образование Охота Педагогика Политика Промышленные производства Психология Путеводители Религия Рыбалка Садоводство Саморазвитие Семиотика Социология Спорт Столярное дело Строительство Техника Туризм Фантастика Физика Футурология Химия Художественная литература Экология Экономика Электроника Энергетика Этика Юриспруденция
Новые книги
Янин В.Л. "Новгородские акты XII-XV Хронологический комментарий" (История)

Майринк Г. "Белый доминиканец " (Художественная литература)

Хусаинов А. "Голоса вещей. Альманах том 2" (Художественная литература)

Петров Г.И. "Отлучение Льва Толстого " (Художественная литература)

Хусаинов А. "Голоса вещей. Альманах том 1 " (Художественная литература)
Реклама

Микроскопическая техника - Роскин Г.И.

Роскин Г.И., Левинсон Л.Б. Микроскопическая техника — М.: Советская наука, 1957. — 469 c.
Скачать (прямая ссылка): microskopicheskayatehnika1957.djvu
Предыдущая << 1 .. 149 150 151 152 153 154 < 155 > 156 157 158 159 160 161 .. 214 >> Следующая

Для изучения скелетных нитей эритроцитов амфибий (саламандра) к езежей капле крови прибавляют немного раствора генцианового фиолетового (0,25 г красителя в 100 см3 физиологического раствора поваренной соли.
Фиксация крови
Для изучения клеток крови на срезах органов в качестве фиксаторов употребляют: смесь Гелли, смесь Ценкера, смесь Максимова, пикриновую кислоту с сулемой (концентрированный раствор пикриновой кислоты + концентрированный водный раствор сулемы 1 : 1).
Изготовление мазков (стр. 132).
Мазки крови фиксируют метиловым спиртом или смесью абсолютного спирта и эфира 1:1. Можно пользоваться парами осмиевой кислоты, для чего покровное стеклышко мазком вниз кладут на 30—60 секуид на горлышко банки с 2-процентиой
.346
осмиевой кислотой. Можно также фиксировать мазки 1—2 минуты парами смеси равных частей осмиевой кислоты, иода и формалина. Хорошая фиксация клеток крови получается, если чистое покровное стекло подвергнуть в течение 2 минут предварительному воздействию паров осмиевой кислоты, затем тотчас же нанести на него каплю крови и еще влажный мазок снова дофиксировать парами осмиевой кислоты 30—60 секунд.
Для фиксации очень легко изменяющихся кровяных бляшек поступают так: на кожу предварительно наносят каплю 1-процентной осмиевой кислоты и затем производят укол; таким образом, кровь сразу поступает в осмиевую кислоту, не соприкасаясь с воздухом. Затем смесь осмиевой кислоты и крови снимают покровным стеклышком и на нем же делают мазок,
Окраска клеток крови
При окраске методами Романовского, Паппенгейма, Май-Грюнвальда особое внимание надо обратить на химическую чистоту употребляемых реактивов и красителей, на качество дистиллированной воды, на чистоту стеклянной посуды, обязательно предварительно выщелоченной. Только при соблюдении всех этих условий можно достигнуть должных красочных эффектов в окраске различных кровяных клеток и их зернистостей.
Метод Романовского является основным методом пр.и изучении клеток крови. 1. Фиксируют свежие влажные или подсушенные мазки в метиловом спирте 2—3 минуты или в смеси эфира и абсолютного спирта 20 минут. 2. Красят 20—30 минут в свежеприготовленном растворе красителя (1 капля основного раствора на 1 cms дистиллированной воды).
Эффективность окраски в высокой мере зависит от pH дистиллированной воды. Оптимальная реакция лежит при pH — 6,8—7,0. Для получения необходимой реакции можно пользоваться буферными фосфатными растворами, разводя их в 10—20 раз дистиллированной водой.
Растворы Романовского, как правило, снабжаются указаниями оптимальной реакции воды для каждой серии красителя.
Если нет буферных растворов, то пригодность воды можно проверить при помощи 1-процентного раствора нейтрального красного, каплю ко'торого прибавляют к 200 см3 испытуемой воды.
Если вода нейтральная или кислая, она розовеет. Для получения нужной слабо щелочной реакции прибавляют по каплям 1-процснтиый раствор углекислой соды. После каждой капли колбочку с водой встряхивают и следят за исчезновением в ней розового окрашивания. Розовый тон должен совершенно исчезнуть или же вернуться не ранее 3 мннут после прибавления последней капли соды. Обычно к 150—200 см3 дистиллированной воды приходится прибавить 3—4 капли раствора соды. 3. Мазки споласкивают дистиллированной водой и осушают фильтроваль-
347
ной бумагой. 4. Заключают в нейтральный бальзам или кедровое масло.
Ядра —¦ фиолетово-красные, нейтрофильные гранулы — красно-фиолетовые; базофильные зерна — синие или сине-фиолетовые; эозинофильные зерна — ярко-розовые; протоплазма лимфоцитов — синяя с пурпурно-красными зернышками; эритроциты— бледно-розовые; кровяные пластинки—синие.
Д. Л. Романовский указал, что для успешной окраски по его методу надо применять только старые водные растворы метиленового синего. Позднее Унна, Нохт, Гимза показали, что характерный эффект окрашивания при методе Д. Л. Романовского обусловливается продуктами окисления метиленового синего, образующимися не только при длительном стоянии раствора этого красителя на воздухе, но и при добавлении к нему небольшого количества щелочи. Гимза разработал способ промышленного получения продуктов окисления метиленового синего, названных им «азур I». В настоящее время краситель по Романовскому в модификации по Гимза готовится из эозина и «азура II» (представляющего смесь равных частей «азур I» и метиленового синего). В результате готовый раствор красителя по Романовскому-Гимза представляет собой смесь равных частей эозината «азура I» и метиленового синего, растворенных в смеси химически чистого глицерина и метилового спирта.
Окраска по Ма й-Г рюнвальду. На подсушенные свежие мазки крови наливают неразведенный раствор красителя Май-Грюнвальда (раствор эозината метиленового синего в метиловом спирте — пользуются готовой продажной смесью). Красят
3—5 минут, затем добавляют равное количество дистиллированной воды и оставляют еще на 5—10 минут (препарат принимает розовый оттенок), затем сливают краситель, препарат быстро споласкивают дистиллированной водой и осторожно осушают фильтровальной бумагой.
Предыдущая << 1 .. 149 150 151 152 153 154 < 155 > 156 157 158 159 160 161 .. 214 >> Следующая