Книги
чёрным по белому
Главное меню
Главная О нас Добавить материал Поиск по сайту Карта книг Карта сайта
Книги
Археология Архитектура Бизнес Биология Ветеринария Военная промышленность География Геология Гороскоп Дизайн Журналы Инженерия Информационные ресурсы Искусство История Компьютерная литература Криптология Кулинария Культура Лингвистика Математика Медицина Менеджмент Металлургия Минералогия Музыка Научная литература Нумизматика Образование Охота Педагогика Политика Промышленные производства Психология Путеводители Религия Рыбалка Садоводство Саморазвитие Семиотика Социология Спорт Столярное дело Строительство Техника Туризм Фантастика Физика Футурология Химия Художественная литература Экология Экономика Электроника Энергетика Этика Юриспруденция
Новые книги
Янин В.Л. "Новгородские акты XII-XV Хронологический комментарий" (История)

Майринк Г. "Белый доминиканец " (Художественная литература)

Хусаинов А. "Голоса вещей. Альманах том 2" (Художественная литература)

Петров Г.И. "Отлучение Льва Толстого " (Художественная литература)

Хусаинов А. "Голоса вещей. Альманах том 1 " (Художественная литература)
Реклама

Микроскопическая техника - Роскин Г.И.

Роскин Г.И., Левинсон Л.Б. Микроскопическая техника — М.: Советская наука, 1957. — 469 c.
Скачать (прямая ссылка): microskopicheskayatehnika1957.djvu
Предыдущая << 1 .. 158 159 160 161 162 163 < 164 > 165 166 167 168 169 170 .. 214 >> Следующая

364
вынимают кусочки головного или спинного мозга и закрепляют их окраску молибдеповокислым аммонием в продолжение 12—24 часов (см. стр. 376); затем поступают, как было указано выше.
Окраску нервной ткани по методам А. Л. Шабадаша см. ниже (стр. 380).
Нервные волокна, нейрофибриллы, периферические нервные
окончания
Для изучения свежсго препарата периферического нерва осторожно отпрепаровывают маленький кусочек нерва, например, п. ischiadicus мыши, помещают его на сухое предметное стекло, быстро расправляют иглами, прибавляют 1—2 капли 0,5-процент-ной осмиевой кислоты и накрывают покровным стеклом. При этом бывает хорошо видна миэлиновая оболочка. Аналогично поступают и при изучении безмякотного нерва, например, селезеночного нерва и блуждающего нерва кролика.
При изучении периферических нервных волокон надо всегда помнить об исключительно большой трудности или даже о невозможности одновременного выявления их структур: аксонов и их оболочек. Это достижимо только при параллельном использовании цитологических и нейрофибриллярных методов. Применение только одних иейрофибриллярных или цитологических методик не дает полного представления о строении нервного волокна и может привести к неправильным выводам. В качестве основного метода изучения смешанного и безмякотного нерва В. В. Португалов (1946) избрал метод разволокнепия с последующей фиксацией и окраской, описанными ниже. В качестве фиксаторов можно пользоваться формалином, смесью АФА по Лаврентьеву с последующей фискацией 12-процентным нейтральным формалином, жидкостью Германа или смесью Шампи. Препараты окрашивают железным гематоксилином, по Кулю, метиленовым синим, пикрокармином, пикроиндигокармином или импрег-нируют по методу Лаврентьева. В. В. Португалов рекомендует кусочек свежеизвлеченного нерва (до 0,5 см длиной) расправлять на предметном стекле. При помощи хорошо отполированных (и каждый раз новых) игл удаляют периневральную оболочку, а оголенный нервный стволик осторожными движениями игл распластывают на стекле. Эти манипуляции следует проводить под контролем лупы. Приготовленный таким образом препарат после небольшой подсушки на воздухе плотно пристает к стеклу и может быть фиксирован по вышеуказанным прописям и затем окрашен сообразно задачам исследования.
Для изучения перехватов Ранвье и миэлиновой оболочки следует брать тонкий нерв, например, п. ischiadicus лягушки. Нерв привязывают тонкой ниточкой к обоим концам спички, загем отрезают и в таком растянутом состоянии кладут на 12—24 часа в 0,5-процентный раствор осмиевой кислоты, промывают полчаса в ди-
365
стиллированной воде, проводят через 70- и 96-градусиый спирт и просветляют в терпинеоле.
Можно также слегка расщипать свежевырезанный нерв и поместить его на 15—30 минут в 1-процентный раствор осмиевой кислоты, тщательно промыть (30 минут) и подкрасить кармином (1—24 ч.). Промыть, тщательно расщипать на предметном стекле в капле глицерина, накрыть покровным стеклом, края которого обвести асфальтовым лаком или менделеевской замазкой.
Для наблюдения концевых разветвлений нервов на нефиксированном свежем материале можно использовать глазные мышцы. Небольшой кусочек мышцы осторожно расщипывают иглами в продольном направлении, прибавляют каплю 1-процентной уксусной кислоты и накрывают покровным стеклом, края которого обмазывают воском. Через пару часов ясно выступают нервные тяжи. Препарат может сохраняться некоторое время.
Методы импрегнации. Метод Бильшовского один из основных методов выявления нейрофибрилл в нервных волокнах, а также в центральной нервной системе.
1. Длительная фиксация материала в нейтральном формалине (1 часть формалина + 9 частей воды). Снесарев советует объект, находящийся в нейтральном формалине, перед резкой поместить в гермостат (при 37°) на 24 часа, после чего хорошо промывать сутки. 2. Срезы, приготовленные на замораживающем микротоме (5—8 |i), помещают на сутки в 2-процентное азотнокислое серебро (в темноте!). 3. Споласкивают водой и помещают на 5—10 минут в аммиачное серебро, в котором срезы должны приобрести коричневый цвет.
Аммиачное серебро приготовляют следующим образом: к 10 см3 10-процентного азотнокислого серебра прибавляют 5 капель 40-процентного едкого натра, получившийся темно-коричневый осадок растворяют, прибавляя осторожно и не спеша по каплям 25-процентный аммиак; после каждой капли аммиака раствор надо встряхивать. Необходимо избегать избытка аммиака и рекомендуется лучше оставлять небольшую часть осадка нераствореи-ной — раствор должен только слегка пахнуть аммиаком. Полученный таким образом раствор комплексных солей серебра и аммония необходимо долить дистиллированной водой до 20 см3. 4. Срезы быстро проводят через воду и кладут в 20-процентный обыкновенный формалин, где они должны почернеть. 5. Хорошо промытые срезы золотят в растворе хлорного золота: 1-процентного хлорного золота—'0,5 см3, дистиллированной воды— 10 см3, уксусной кислоты — 2—3 капли. Срезы принимают серовато-фиолетовый цвет.
Предыдущая << 1 .. 158 159 160 161 162 163 < 164 > 165 166 167 168 169 170 .. 214 >> Следующая