Книги
чёрным по белому
Главное меню
Главная О нас Добавить материал Поиск по сайту Карта книг Карта сайта
Книги
Археология Архитектура Бизнес Биология Ветеринария Военная промышленность География Геология Гороскоп Дизайн Журналы Инженерия Информационные ресурсы Искусство История Компьютерная литература Криптология Кулинария Культура Лингвистика Математика Медицина Менеджмент Металлургия Минералогия Музыка Научная литература Нумизматика Образование Охота Педагогика Политика Промышленные производства Психология Путеводители Религия Рыбалка Садоводство Саморазвитие Семиотика Социология Спорт Столярное дело Строительство Техника Туризм Фантастика Физика Футурология Химия Художественная литература Экология Экономика Электроника Энергетика Этика Юриспруденция
Новые книги
Янин В.Л. "Новгородские акты XII-XV Хронологический комментарий" (История)

Майринк Г. "Белый доминиканец " (Художественная литература)

Хусаинов А. "Голоса вещей. Альманах том 2" (Художественная литература)

Петров Г.И. "Отлучение Льва Толстого " (Художественная литература)

Хусаинов А. "Голоса вещей. Альманах том 1 " (Художественная литература)
Реклама

Микроскопическая техника - Роскин Г.И.

Роскин Г.И., Левинсон Л.Б. Микроскопическая техника — М.: Советская наука, 1957. — 469 c.
Скачать (прямая ссылка): microskopicheskayatehnika1957.djvu
Предыдущая << 1 .. 159 160 161 162 163 164 < 165 > 166 167 168 169 170 171 .. 214 >> Следующая

6. Промывают их в воде и кладут на 20—60 секунд в 5-процент-ный гипосульфит. 7. Срезы промывают в воде, наклеивают на стекло, осушают фильтровальной бумагой, обезвоживают ацетоном и через ксилол заключаю.т в бальзам.
' Нейрофибриллы — черные на сером фоне. Метод особенно пригоден для нервных волокон.
366
Импрегнация по пиридиново-серебряному методу Бильшовского.
Особо пригоден для изучения мозга эмбрионов и окончаний периферических методов. 1. Кусочки фиксируют в нейтральном формалине (1 часть формола -f- 9 частей дистиллированной воды или 1 часть формалина + 4 части воды) в течение по крайней мере одной недели, а затем промывают их в дистиллированной воде несколько дней. 2. Помещают кусочек объекта, не более 0,5 см толщины, в чистый пиридин на 3—4 дня (при комнатной температуре). 3. Промывают в проточной воде 12—24 часа, затем в дистиллированной воде (сменяя ее, пока не исчезнет запах пиридина) 12—24 часа. 4. Переносят его в 3-процентный- раствор азотнокислого серебра на 3—6 дней (в темноте при 37а). 5. Быстро споласкивают в дистиллированной воде. 6. Помещают в раствор аммиачного серебра (стр. 370) на 24 часа. 7. Промывают в дистиллированной воде (часто сменяя), в зависимости от толщины кусочка, не более 1—2 часов. 8. Переносят в нейтральный формалин (I часть формола -f- 9 частей воды) для восстановления серебра на 10—12 часов. 9. Промывают в дистиллированной воде. 10. Быстро проводят через спирты возрастающей крепости и заливают в парафии. После освобождения от парафина срезы переводят в проточную воду. 11. Помещают в раствор хлорного золота (см. выше) и оставляют в нем, пока коричневый тон окраски срезов не перейдет в серый или в серо-фиолетовый. 12. Фиксируют в 5-процент-ном растворе гипосульфита 1—2 минуты. 13. Промывают в проточной воде 1—2 часа. 14. Проводят через спирты возрастающей крепости (до 96°); терпинеол, ксилол (возможно быстро) и заключают в бальзам или цедакс.
В некоторых случаях полезно воспользоваться пиридиновосеребряным методом в модификации Буке, так как он значительно лучше удается (Лаврентьев).
1. Фиксировать в 12-процентном нейтральном формалине.
2. Три часа в пиридине. 3. Промыть в дистиллированной воде 8 часов. 4. Импрегнировать в 3-процентном азотнокислом серебре при 30—35° 5—6 дней. 5. Обработать разведенным аммиачным серебром по Бильшовскому — 24 часа. 6. Промывать 2 часа дистиллированной водой. 7. Поместить в нейтральный раствор формалина (20 см3 формалина и 80 см3 дистиллированной воды) на 10—12 часов. 8. Промыть и быстро залить парафин, золочение проводить на срезах. ,
Модификация метода Бильшовского по Гросс-Шульце для импрегнации нейрофибриллей и нервных волокон, а также мультиполярных нервных клеток, межпозвоночных и симпатических ганглиев, интрамуральных ганглиев и сплетения пограничного ствола. Метод дает очень красивые препараты и довольно легко удается. 1. Фиксация 12-процентным нейтральным формалином; замороженные срезы кладут на 1—2 часа в 20-процентное азотнокислое серебро. 2. Срезы переносят в 20-про-
367
центный формалин (на водопроводной воде), в котором срезы не должны лежать неподвижно. Когда прекращается выделение белого облачка из срезов (примерно 10 минут), их переносят в раствор аммиачного серебра. 3. Аммиачное серебро приготовляют, прибавляя к 5—10 см3 20-процентного азотнокислого серебра по каплям 25-процентный аммиак до тех пор, пока не растворится образовавшийся осадок (непрерывно взбалтывать). Этот раствор наливают в часовое стекло и на каждый 1 см3 раствора прибавляют по одной капле аммиака. Затем в него кладут срезы и контролируют импрегнацию под микроскопом: нейрофибриллы — черные на бесцветном фоне. 4. Срезы кладут на 1 минуту в 8 см3 дистиллированной воды + 2 см3 аммиака. 5. Золотят и т. д., как в основном методе Бильшовского.
Для импрегнации нервных клеток н нервных тяжей человека, грызунов, пгиц и различных беспозвоночных, особенно насекомых, может быть полезен следующий метод. Свежий материал фиксируют в смеси: 80-градусного спирта — 100 см3, пикриновой кислоты— 2 г, уксусной кислоты— 10 си3, формалина—40 см3.
Существенно длительно фиксировать материал (от 2—3 месяцев до года).
Перед изготовлением срезов на замораживающем микротоме кусочки материала помещают на 2—6 часов в аммиачную воду (30 капель концентрированного аммиака на 100 см3 дистиллированной воды).
1. Затем делают срезы (25 i*) на замораживающем микротоме.
2. Помещают срезы на 15 минут в аммиачную воду (52 капли концентрированного NH4OH на 100 смг дистиллированной воды).
3. Переносят срезы в 20-процентный раствор азотнокислого серебра (pro analisi), нагретый до 45°; срезы принимают коричневый тон. 4. К 20 см3 раствора серебра, в котором находятся срезы, осторожно по каплям прибавляют аммиак до растворения осадка; раствор надо все время осторожно взбалтывать; избегать избытка аммиака. 5. Как только осадок растворился и раствор стал опа-десцирующим, срезы тотчас же проводят через дистиллированную воду и помещают в 3-процентный раствор формалина (pro analisi), в котором срезы должны равномерно потемнеть. 6. Срезы споласкивают дистиллированной водой и переносят в 1-процентный раствор хлорного золота, где срезы принимают фиолетовый тон.
Предыдущая << 1 .. 159 160 161 162 163 164 < 165 > 166 167 168 169 170 171 .. 214 >> Следующая