Книги
чёрным по белому
Главное меню
Главная О нас Добавить материал Поиск по сайту Карта книг Карта сайта
Книги
Археология Архитектура Бизнес Биология Ветеринария Военная промышленность География Геология Гороскоп Дизайн Журналы Инженерия Информационные ресурсы Искусство История Компьютерная литература Криптология Кулинария Культура Лингвистика Математика Медицина Менеджмент Металлургия Минералогия Музыка Научная литература Нумизматика Образование Охота Педагогика Политика Промышленные производства Психология Путеводители Религия Рыбалка Садоводство Саморазвитие Семиотика Социология Спорт Столярное дело Строительство Техника Туризм Фантастика Физика Футурология Химия Художественная литература Экология Экономика Электроника Энергетика Этика Юриспруденция
Новые книги
Янин В.Л. "Новгородские акты XII-XV Хронологический комментарий" (История)

Майринк Г. "Белый доминиканец " (Художественная литература)

Хусаинов А. "Голоса вещей. Альманах том 2" (Художественная литература)

Петров Г.И. "Отлучение Льва Толстого " (Художественная литература)

Хусаинов А. "Голоса вещей. Альманах том 1 " (Художественная литература)
Реклама

Микроскопическая техника - Роскин Г.И.

Роскин Г.И., Левинсон Л.Б. Микроскопическая техника — М.: Советская наука, 1957. — 469 c.
Скачать (прямая ссылка): microskopicheskayatehnika1957.djvu
Предыдущая << 1 .. 162 163 164 165 166 167 < 168 > 169 170 171 172 173 174 .. 214 >> Следующая

Метод К а х а л я для импрегнации л а и т е р м а н н о в-ских насечек и аппарата Гольджи — Резонико.
1. Кусочки фиксируют 24 часа в смеси: формалина 6 см?, пиридина 10 см?, азотнокислого марганца 0,5 г, дистиллированной воды 40 см3. 2. Промывают 24 часа в проточной воде и затем кладут на 48 часов в 1,5-процентпое азотнокислое серебро. 3. Переносят на 24 часа в восстанавливающую смесь: гидрохинона 1 г, формалина 5 см3, дистиллированной воды 80 см?, безводного сернокислого натрия 0,25 г. 4. Затем кусочек осторожно расщипывают и заключают в глицерин.
372
Осмирование и окраска миэл.'\новых оболочек
Руднев первый подметил, что жир и миэлиновое вещество нервных волокон окрашивается осмиевой кислотой в черный цвет. Это явление объясняется тем, что жироподобные вещества, а следовательно и миэлин, быстро восстанавливают металлический осмий, который и придает этим веществам черную окраску.
Для этой же цели можно пользоваться смесью Колосова: приготовляется 0,5-процентный раствор осмиевой кислоты в 2- или
3-процентном растворе азотнокислого урана.
Приготовленная таким образом смесь очень легко проникает даже в довольно большие кусочки органов (например, язык лягушки, разрезанный на 2—3 части). Кроме того смесь, рекомендуемая Колосовым, имеет еще два преимущества, а именно: 1) кусочки органов могут находиться в ней более или менее про должителыюе время (16, 24, 48 часов — смотря по тому, насколько интенсивное окрашивание желательно получить) и все-таки не перекрашиваются и не делаются ломкими; и 2) азотнокислый уран сам по себе очень легко диффундирует и при том хорошо фиксирует тканевые элементы.
При употреблении смеси Колосова достигается очень чистое окрашивание мякотных нервных волокон почти в черный цвет. Смесь удаляют из кусочков, промывая их в смеси глицерина и воды (равные объемы), после чего объекты уплотняют по общим правилам гистологической техники.
Метод Кульчицкого. 1. Фиксируют в 10-процентном формалине, затем кусочки кладут на 45 дней в мюллеровскую жидкость или в особую протравляющую смесь (растворяют при кипячении 2,5 г флуорохрома или хромовых квасцов в 100 см3 воды, затем, потушив горелку, прибавляют 5 см3 уксусной кислоты и хорошо размешивая стеклянной палочкой, добавляют 5 г уксуснокислой меди. Материал заливают в целлоидин. 2. Срезы окрашивают 12—24 часа в гематоксилине Кульчицкого: 10-процентный спиртовой (созревший) раствор гематоксилина— 10 см3, дистиллированная вода — 90 см3, уксусная кислота — 2 см?. 3. Непосредственно переносят в смесь из 10 частей концентрированного раствора углекислого лития и 1 части 1-процентного раствора красной кровяной соли. В этом растворе происходит дифференци-ровка срезов, протекающая весьма медленно (3—12 часов). Смесь надо менять каждый час. 4. Тщательно промывают в проточной воде и производят обычное заключение в бальзам.
Мякотные оболочки окрашиваются в черный цвет.
Можно использовать следующую модификацию способа Кульчицкого. Пункты 1 и 2, как в методе Кульчицкого, затем срезы проводят через мюллеровскую жидкость и помещают в 0,25-процентный раствор перманганата на 20—30 секунд. Споласкивают водой и дифференцируют 1—3 минуты в смеси: щавелевой кисло-
373
ты 1 г, сернокислого калия 1 г, дистиллированной воды 200 см?.
После дифференцировки срезы хорошо промывают проточной водой, по желанию докрашивают квасцовым кармином и обычным образом заключают в бальзам.
Кроме вышеописанных окрасок мякотных оболочек можно использовать также и следующий метод.
1. Фиксация формалином (не менее 3 дней). Замороженные срезы (25—35 ц) помещают на 6 часов в 2,5-процентный раствор железных квасцов. 2. Споласкивают дистиллированной водой и переносят на 10 минут в 70-градусный спирт, срезы нужно все время двигать стеклянной палочкой. 3. Красят их 1—2 часа в разведенном растворе гематоксилина (5 частей 10-процентного спиртового созревшего раствора гематоксилина на 100 см3 дистиллированной воды). 4. Споласкивают дистиллированной водой и дифференцируют 2,5-процентиым раствором железных квасцов, все время контролируя под микроскопом. 5. Промывают в дистиллированной воде (несколько раз сменить), 1—2 часа в проточной воде и затем проводят через спирты, ксилол и заключают в бал-зам. Мякотные оболочки — черные.
Для изучения эмбриональных стадий развития, а также периферических мякотных нервов, особенно пригоден следующий способ. 1. Маленькие кусочки, фиксированные в 1-процентной осмиевой кислоте, переносят на 24 часа в 1-процентный раствор двухромовокислого калия (трижды сменить). 2. Помещают в 50- градусный спирт на 24 часа (в темноте). 3. Кусочек кладут на 24— 28 часов в 0,5-процентный созревший раствор гематоксилина в 70-градусном спирте, после чего промывают 1—2 дня в 70-градусном спирте и заливают в парафин или целлоидин.
Мякотные оболочки, даже наиболее тонкие, — четко окрашиваются в черный цвет.
Суправиталъная окраска нервов метиленовым синим
Мелких водных животных окрашивают тотально. У крупных окрашивают изолированные кусочки или краситель инъицируют в сосуды.
Предыдущая << 1 .. 162 163 164 165 166 167 < 168 > 169 170 171 172 173 174 .. 214 >> Следующая