Книги
чёрным по белому
Главное меню
Главная О нас Добавить материал Поиск по сайту Карта книг Карта сайта
Книги
Археология Архитектура Бизнес Биология Ветеринария Военная промышленность География Геология Гороскоп Дизайн Журналы Инженерия Информационные ресурсы Искусство История Компьютерная литература Криптология Кулинария Культура Лингвистика Математика Медицина Менеджмент Металлургия Минералогия Музыка Научная литература Нумизматика Образование Охота Педагогика Политика Промышленные производства Психология Путеводители Религия Рыбалка Садоводство Саморазвитие Семиотика Социология Спорт Столярное дело Строительство Техника Туризм Фантастика Физика Футурология Химия Художественная литература Экология Экономика Электроника Энергетика Этика Юриспруденция
Новые книги
Янин В.Л. "Новгородские акты XII-XV Хронологический комментарий" (История)

Майринк Г. "Белый доминиканец " (Художественная литература)

Хусаинов А. "Голоса вещей. Альманах том 2" (Художественная литература)

Петров Г.И. "Отлучение Льва Толстого " (Художественная литература)

Хусаинов А. "Голоса вещей. Альманах том 1 " (Художественная литература)
Реклама

Микроскопическая техника - Роскин Г.И.

Роскин Г.И., Левинсон Л.Б. Микроскопическая техника — М.: Советская наука, 1957. — 469 c.
Скачать (прямая ссылка): microskopicheskayatehnika1957.djvu
Предыдущая << 1 .. 163 164 165 166 167 168 < 169 > 170 171 172 173 174 175 .. 214 >> Следующая

При применении этих методов окраска через некоторое время достигает своего максимума и потом опять исчезает. Поэтому препарат приходится рассматривать тотчас же после окраски и тут же зарисовывать или фотографировать его или, наконец, немедленно зафиксировать (стр. 376). Следует сначала испробовать все способы. Окрашивают метиленовым синим или его лейкобазой. Окрашивание метиленовым синим было подробно разработано в исследованиях А. С. Догеля.
К числу основных недостатков метода окраски метиленовым синим А. Догель относит: 1) быстрое исчезновение окраски в нервных элементах; 2) неодинаковую окрашиваемость нервных элементов в различных тканях; 3) непрокрашиваемость глубоко лежащих нервных элементов в ряде органов (почки, печень селезенка,
374
лимфатические узлы я т. д.); 4) доступность окрашиванию только свежих тканей.
Все указанные недостатки побудили исследователей выяснить их причины. В связи с этим было обращено внимание па физикохимические свойства тканей, окрашивающих жидкостей, их температуру, приток воздуха и т. д.
Совершенствование методов окраски происходило сообразно требованиям, которые предъявлялись к ним исследователями. Первоначальные требования сводились к изготовлению микроскопических препаратов с устойчивой окраской, выявляющей тонкую организацию структурных элементов нервной ткани и взаимоотношение последних с другими тканями. Работая в этом направлении, Догель и его ученики достигли прекрасных результатов, которые и по настоящий день не теряют своей ценности. Основываясь на своих наблюдениях, Догель предложил четыре способа применения метиленового синего: 1) инъекция в кровеносные сосуды животного !Д—Vs-процеитных растворов метиленового синего; 2) введение XU—Ve-процентных растворов метиленового синего в полости тела и органов; 3) впрыскивание 1/е—Vs-процентных растворов красящего вещества под кожу животного или в соединительную ткань, окружающую органы; 4) непосредственное окрашивание вырезанного органа или частей его lU—7б—Vs-процентными растворами метиленового синего.
Эффективность этих способов, как указывал Догель, зависит от ряда условий: 1) свежесть материала; 2) слабая концентрация метиленового синего; 3) предварительная промывка сосудов и возможно лучшее наполнение их тепловыми растворами (36— 37°); 4) свободный доступ атмосферного воздуха к окрашиваемым органам; 5) умение уловить оптимальный момент окраски и зафиксировать ее.
Метиленовый синий. Приготовляют основной 1 ¦ процентный раствор метиленового синего в соответствующей среде, употребляемой для исследования (физиологический раствор поваренной соли, морская вода и т. д.).
Тотальное окрашивание. Мелких прозрачных водных животных окрашивают в растворе метиленового синего, сильно разведенном средой, в которой они находились. Окрашивание удается только при условии доступа кислорода, поэтому сосуды, в которых производят окрашивание, не следует закрывать. Концентрация красителя, в зависимости от вида животного, может быть различна. Лучше всего приготовить сначала серию растворов от светло- до темно-синего цвета и потом опытным путем найти оптимальное разведение красителя для каждого вида. Сначала проверяют степень окраски каждые 2 минуты, потом каждые !ji или V2 часа.
Нервы окрашиваются в синий цвет и выделяются на почтой бесцветном фоне (о фиксировании окраски метиленовым синим
375
и также лейкобазой метиленового синего и о методе окраски ализарином см. на стр. 380).
Окрашивание кусочков. От свежеубитых животных берут органы или части органов и кладут на стеклянную вату, предварительно смоченную сильно разведенным раствором метиленового синего (в физиологическом растворе поваренной соли). Кусочки, а также сделанные бритвой срезы, должны быть по возможности тонкими, так как окрашиваются только их поверхностные слои.
На объект наносят по каплям 1-процентный раствор метиленового синего (разведенный в отношении 1:4 физиологическим раствором поваренной соли), покрывают его так, чтобы не мешать доступу воздуха и через некоторое время, во избежание высыхания объекта, прибавляют по каплям еще более слабый раствор красителя. Если материал взят от теплокровного животного, препарат помещают в термостат при температуре 37°; если от холоднокровного, то обрабатывают его при комнатной температуре. Степень окраски время от времени контролируют. О закреплении красителей см. ниже.
Инъекция. Убивают животное, вскрывают вены, промывают кровеносные сосуды физиологическим раствором поваренной соли, вводя его через аорту, и инъицируют 'Д — или '/б-процент-ный раствор метиленового синего (о технике инъицироваиия см. стр. 378), При инъицировании теплокровным животным растворы подогреваются до температуры тела (37°). Через полчаса животное вскрывают, вырезают нужный орган и обрабатывают указанным выше для органа или части его способом (приготовляют тонкие срезы, наносят по каплям метиленовый синий).
Впрыскивание в серозные полости может применяться и для окрашивания нервов всего тела, но особенно уместно при изучении покровов и органов, лежашнх в серозных полостях. Самый метод весьма прост. В серозную полость животного при помощи шприца вводят любое количество (разумеется, соразмерное величине животного) раствора метиленового синего ('Д—7г%), — для кролика, небольшой собаки пли кошки бывает вполне достаточно 40—50 сж3. Через 20—30 минут можно уже вырезать подлежащие исследованию органы. С ними поступают, как указано выше и как это делают после инъекции в кровеносные сосуды, т. е. вырезанный орган оставляют на воздухе (лучше в термостате при 36— 37° С) некоторое время, а затем фиксируют.
Предыдущая << 1 .. 163 164 165 166 167 168 < 169 > 170 171 172 173 174 175 .. 214 >> Следующая