Книги
чёрным по белому
Главное меню
Главная О нас Добавить материал Поиск по сайту Карта книг Карта сайта
Книги
Археология Архитектура Бизнес Биология Ветеринария Военная промышленность География Геология Гороскоп Дизайн Журналы Инженерия Информационные ресурсы Искусство История Компьютерная литература Криптология Кулинария Культура Лингвистика Математика Медицина Менеджмент Металлургия Минералогия Музыка Научная литература Нумизматика Образование Охота Педагогика Политика Промышленные производства Психология Путеводители Религия Рыбалка Садоводство Саморазвитие Семиотика Социология Спорт Столярное дело Строительство Техника Туризм Фантастика Физика Футурология Химия Художественная литература Экология Экономика Электроника Энергетика Этика Юриспруденция
Новые книги
Цуканов Б.И. "Время в психике человека" (Медицина)

Суворов С. "Танк Т-64. Первенец танков 2-го поколения " (Военная промышленность)

Нестеров В.А. "Основы проэктирования ракет класса воздух- воздух и авиационных катапульных установок для них" (Военная промышленность)

Фогль Б. "101 вопрос, который задала бы ваша кошка своему ветеринару если бы умела говорить" (Ветеринария)

Яблоков Н.П. "Криминалистика" (Юриспруденция)
Реклама

Микроскопическая техника - Роскин Г.И.

Роскин Г.И., Левинсон Л.Б. Микроскопическая техника — М.: Советская наука, 1957. — 469 c.
Скачать (прямая ссылка): microskopicheskayatehnika1957.djvu
Предыдущая << 1 .. 164 165 166 167 168 169 < 170 > 171 172 173 174 175 176 .. 214 >> Следующая

Хотя метод окрашивания метиленовым синим н требует некоторого навыка, он все-таки бесспорно принадлежит к числу легко выполнимых. Окрашивание получается всегда, но спустя некоторое время исчезает. Ввиду этого стали прибегать к употреблению реагентов, которые закрепляли бы окрашивание надолго (А. С м и р н о в, А. Догель).
Кусочки объекта, предназначенного для закрепления окраски, переносят в следующую смесь: молибденовокнелого аммония 1 г,
376
дистиллированной воды 10 см3, перекиси водорода 1 см3, соляной кислоты 1 капля.
Только что приведенная закрепляющая смесь должна быть охлажденной до температуры от +2 до — 2°. Если объекты невелики, то для закрепления окраски достаточно 2—3 часов; для сравнительно больших объектов необходимо и более продолжительное время (4—5 часов). После закрепления окраски объекты около получаса промывают в воде, а затем обезвоживают в спирте (холодном) и переносят в ксилол для дальнейшей заделки в парафин (Кульчицкий).
Методы Догеля легли в основу современных макро-микроскопических исследований при помощи метиленового синего, методика которых детально разработана В. П. Воробьевым и его учениками (Н. Кондратьев, А. Шабадаш, А. Журавлев и др.). Эти исследования явились новым этапом в изучении элемента нервной системы и в применении метиленового синего (Ф. А. Волынский, 1948).
Ученики В. П. Воробьева разработали ряд методов, которые характеризуются тем, что нервная ткань окрашивается не чистым раствором метиленового синего, но в него вводится «посредник» (катализатор), способствующий более быстрому восприятию метиленового синего нервной тканью, а также и дополнительные красители, усиливающие полноту окраски. Таким образом, совершенствование первоначальных методов окраски метиленовым синим связакЬ с усложнением состава окрашивающей жидкости.
Н. Кондратьев применяет следующий состав красителя: метиленовый синий 1,0 г, тионин 0,2 г, железистокислый титан 0,5 г, кипяченая вода 500 см3. Смесь выпаривается до потери 1/5—1/6 общего количества жидкости. Окраска применяется на свежем и трупном материале. В последних случаях к ней прибавляют 20— 30 капель насыщенного раствора хлорофилла в спирте и кипятят до полного исчезновения спирта. Применение этого красителя дало возможность Н. Кондратьеву и его ученикам выявить тонкие структуры, вплоть до концевых нервных аппаратов в различных органах млекопитающих и птиц.
А. Журавлев в раствор метиленового синего вводит Fe2S04, а в других случаях — сернокислую магнезию (метиленовый синий 1 г, сернокислая магнезия 10 г, дистиллированная вода 100 сж3). Последний краситель он нередко комбинировал (в равных количествах) с раствором нейтрального красного (нейтральный красный 1 г, сернокислая магнезия 10 г, дистиллированная вода 100 см3). Окрашивались свежие ткани человека и животных. Особенно хорошо окрашивались нервные элементы сердца (человека, собаки, кошки, кролика, теленка), мочеполовых органов (кроме почек), трахеи и некоторых отделов кишечника.
Ф. Волынский в своих исследованиях применял слабые растворы метиленового синего (1/16—1/8—1/4%), с добавлением перекиси магния. Раствор составляется различно, в зависимости
377
от свежести материала. Свежий и живой материал окрашивался в следующей смеси: раствор Рингер-Локка 4000 см3, метиленовый синий 1 г, перекись магния 5 г. Несвежий материал окрашивается в другой смеси: физиологический раствор поваренной соли — 4000 смъ, метиленовый синий—1 г, перекись магния — 5 г. Все составные части растворов готовятся отдельно, накануне опыта, а соединяют их непосредственно перед опытом. Растворы предварительно фильтруют. Метиленовый синий (1 г] растворяют в 100 смг дистиллированной воды при слабом подогревании и фильтруют; после этого к нему прибавляют 0,5 а перекиси -магния и взбалтывают. Перед окраской растворы подогревают до температуры 37—38°, которая поддерживается в течение всего процесса окрашивания.
Процесс окраски состоит в следующем. Животное хлороформируют до глубокого наркоза. Вскрывают грудную полость (если необходимо окрасить один из органов брюшной полости; при окраске органов грудной полости вскрывают брюшную полость) и вводят в грудную аорту стеклянную канюлю (при окраске органов грудной полости канюлю вводят в брюшиую аорту), соединенную с кружкой Эсмарха (или аппаратом Боброва), в которую уже налит один из указанных растворов.
Вслед за этим надрезают нижнюю полую вену у места впадения ее в правое предсердие (при окраске органов грудной полости надрезают верхнюю полую вену), что обеспечивает отток крови, а затем и окрашивающей жидкости. В данном случае необходимо обеспечить хороший приток и отток окрашивающей жидкости к органу., не обнажая его до окончания процесса инъекции. После промывки сосудов, в кружку вливают незначительное количество раствора метиленового синего, концентрацию которого постепенно повышают. Первые порции смеси содержат приблизительно 0,01 %, а остальные 0,025% красителя.
Вводимая жидкость должна протекать медленно и при слабом давлении с таким расчетом., чтобы в кровеносных сосудах и в окружающих тканях по возможности сохранилось прижизненное давление. Эти условия обеспечивают более интенсивную окраску нервной ткани метиленовым синим; быстрая инъекция и сильное давление мешают окрашиванию. Для заполнения кровеносных сосудов крупного животного требуется 1500—2000 см? окрашивающей жидкости.
Предыдущая << 1 .. 164 165 166 167 168 169 < 170 > 171 172 173 174 175 176 .. 214 >> Следующая