Книги
чёрным по белому
Главное меню
Главная О нас Добавить материал Поиск по сайту Карта книг Карта сайта
Книги
Археология Архитектура Бизнес Биология Ветеринария Военная промышленность География Геология Гороскоп Дизайн Журналы Инженерия Информационные ресурсы Искусство История Компьютерная литература Криптология Кулинария Культура Лингвистика Математика Медицина Менеджмент Металлургия Минералогия Музыка Научная литература Нумизматика Образование Охота Педагогика Политика Промышленные производства Психология Путеводители Религия Рыбалка Садоводство Саморазвитие Семиотика Социология Спорт Столярное дело Строительство Техника Туризм Фантастика Физика Футурология Химия Художественная литература Экология Экономика Электроника Энергетика Этика Юриспруденция
Новые книги
Цуканов Б.И. "Время в психике человека" (Медицина)

Суворов С. "Танк Т-64. Первенец танков 2-го поколения " (Военная промышленность)

Нестеров В.А. "Основы проэктирования ракет класса воздух- воздух и авиационных катапульных установок для них" (Военная промышленность)

Фогль Б. "101 вопрос, который задала бы ваша кошка своему ветеринару если бы умела говорить" (Ветеринария)

Яблоков Н.П. "Криминалистика" (Юриспруденция)
Реклама

Микроскопическая техника - Роскин Г.И.

Роскин Г.И., Левинсон Л.Б. Микроскопическая техника — М.: Советская наука, 1957. — 469 c.
Скачать (прямая ссылка): microskopicheskayatehnika1957.djvu
Предыдущая << 1 .. 166 167 168 169 170 171 < 172 > 173 174 175 176 177 178 .. 214 >> Следующая

В противовес представлениям о том, что метиленовый синий способен выявлять нервные элементы в снлу своего «нейротро-пнзма», Шабадаш показал, что морфологически видимый результат окраски зависит от тканевого метаболизма.
Техника окраски по А. Шабадаш у. Принцип составления красящего раствора — изотония, изо-термия и оптимальная концентрация водородных ионов.
А. Шабадаш полагает, что метиленовый синнй, окрашивая нервные элементы, участвует в ферментных реакциях, течение которых регулируется определенным pH.
Массовая окраска микроструктур осуществляется при pH ниже 7,0, согласно следующей таблице:
380
Таблица 13
ОПТИМАЛЬНАЯ РЕАКЦИЯ РАСТВОРА ДЛЯ ОКРАСКИ РАЗЛИЧНЫХ ЭЛЕМЕНТОВ НЕРВНОЙ СИСТЕМЫ
Нервные элементы Оптимальный
pH
Интрамуральные сплешния дна желудка (кошка)...... 6,98
Интрамуральные сплетения кишечной трубки (кошка, собака) 5,9
Интрамуральные сплетения тонкой кишки (обезьяна)..... 6,24
Интрамуральные сплетения подвздошной и толстой кишки
5,7---5,9
Нервные сплетеиия в паренхиме почки (лягушка)...... 4,6---5,1
Цереброспинальные нервы и концевые чувствительные аппа
раты ........................... 6,0
Рецептура окрашивающих смесей и добавочные активаторы окраски. Вводя вместе с красителем дополнительные водородные акцепторы, Шабадаш получил значительное ускорение окраски, у л у ч ш е н и е ее качества и большее ее территориальное распространение. Доза добавочных активаторов (резорцин, пирокатехин, параамидофенол и др.) составляет от 1 : 1000 до 1 : 4000 моля.
Пример окрашивающего раствора: дистиллированной воды 1000 см3, хлористого натрия 7,2 г; резорцина 0.15 г; метиленового синего 0,2 г.
При инъекции указанного раствора (при pH = 6,2—6,0) кошке в течение 5—20 минут происходит детальная массовая окраска всех вегетативных сплетений кишечника, пилорической части желудка, желчных путей и пузырц, семявыносящего протока и т. д.
Шабадаш показал, что усиление углеводного обме-н а является методом получения удачных окрасок как вегетативной, так и соматической нервной системы. Пример окрашивающего раствора: дистиллированной воды 1000 см3; хлористого натрия 7,2 г; глюкозы 1,5 г; пиросинограднокислого натрия 0,32 г; метиленового синего 0,3 г.
При pH = 5,4—5,6 смесь даст прекрасную окраску подэпите-лиальиых сплетений мочевых путей, нервов роговицы, слизистых оболочек и пр. При pH = 6,0 и добавлении бромистого магния (1,25 г иа литр) осуществляется четкая окраска мякотных волокон, чувствительных и моторных окончаний цереброспинального происхождения.
Для закрепления окраски употребляют изотоническую смесь, которую готовят насыщением 0.9—1,12-процснтного водного раствора роданистого аммония оранжевыми кристаллами пикрата аммония; растворы готовят при 60е и оставляют при этой температуре в термостате на 12—24 часа. Хранить их нужно в банках темного стекла. Окрашенные объекты помещают в эту смесь иа 2—8 часов (в зависимости от толщины объекта); для органов теплокровных животных смесь следует нагреть до 27—30°.
381
Препарат после промывки и обычной обработки заключают в канадский бальзам.
Нейроглия
Глиофибриллярный метод Гольцера. 1. Формалиновая фиксация. Срезы на замораживающем микротоме. 2. Стеклянной палочкой срезы переносят в раствор: '^-процентной фосфорномолибденовой кислоты — 1 часть, 96-градусного или абсолютного спирта 2 части. Держат счетом 30—60—90 секунд.
3. Срезы вылавливают на чистое, обезжиренное стекло, дают стечь жидкости, обтираю г кругом среза тряпочкой и прижимают срез 2—3 раза фильтровальной бумагой, смоченной алкоголь-хлороформом (на 2 см3 спирта 8 см\ хлороформа); срезы должны пристать к стеклу. 4. Не давая просохнуть, на влажный срез наливают краситель состава: абсолютного спирта — 2 см3, хлороформа — 8 смъ, кристаллического фиолетового 0,5 г. 5. На покрывающий срез краситель быстро, не давая сгущаться, льют при косом положении стекла 10-процентный раствор бромистого калия. Краситель отходит слоями. Стараться удалить бромом зеленоватый осадок, чтобы срез, освободившись от него, выглядел равномерно окрашенным, черно-фиолетовым. 6. Хорошенько обтирают краситель кругом среза и один раз промокают фильтровальной бумагой, смоченной жидкостью следующего состава: анилинового мас-
ла — 4 см3, хлороформа — 6 см3, 1-процентной соляной кислоты —
1 капля. 7. Дифференцируют только что названной жидкостью до светло-сирсневон окраски среза. 8. Проводят через ксилол, заключают в бальзам.
МетодСнесарева. Выявление общей картины нейроглии.
1. Фиксация в формалине. 2. После промывания в воде делают срезы на замораживающем микротоме (для глиофибриллей — как можно более тонкие). 3. Из дистиллированной воды срез стеклянной палочкой переносят на 30 секунд (счетом) в раствор: 1-про-центной фосфорномолибденовой кислоты—10 см3, дистиллированной воды— 10 см3. По мере надобности прибавляют, как это определяется пробными срезами, или углекислого калия (1 : 1000) 5—10 капель, или 1-процентной уксусной кислоты 5—10 капель, или то и другое вместе; обычно употребляют только углекислый калий. При растворении фосфорномолибденовой кислоты для удаления опалесценции, раствор слегка подогревают над пламенем горелки и оставляют на сутки в термостате. 4. Объект быстро споласкивают в дистиллированной воде. 5. В широкой бактериологической чашке с дистиллированной водой срез распластывают на поверхности воды и вылавливают его предметным стеклом, смазанным белком с глицерином и слегка подсушенным. 6. Дают стечь воде, обтирают кругом среза сухой тряпочкой и повторно раза два промокают сложенной вчетверо фильтровальной бумагой, но не сухой, а смоченной в растворе метилового спирта с хло-
Предыдущая << 1 .. 166 167 168 169 170 171 < 172 > 173 174 175 176 177 178 .. 214 >> Следующая