Книги
чёрным по белому
Главное меню
Главная О нас Добавить материал Поиск по сайту Карта книг Карта сайта
Книги
Археология Архитектура Бизнес Биология Ветеринария Военная промышленность География Геология Гороскоп Дизайн Журналы Инженерия Информационные ресурсы Искусство История Компьютерная литература Криптология Кулинария Культура Лингвистика Математика Медицина Менеджмент Металлургия Минералогия Музыка Научная литература Нумизматика Образование Охота Педагогика Политика Промышленные производства Психология Путеводители Религия Рыбалка Садоводство Саморазвитие Семиотика Социология Спорт Столярное дело Строительство Техника Туризм Фантастика Физика Футурология Химия Художественная литература Экология Экономика Электроника Энергетика Этика Юриспруденция
Новые книги
Янин В.Л. "Новгородские акты XII-XV Хронологический комментарий" (История)

Майринк Г. "Белый доминиканец " (Художественная литература)

Хусаинов А. "Голоса вещей. Альманах том 2" (Художественная литература)

Петров Г.И. "Отлучение Льва Толстого " (Художественная литература)

Хусаинов А. "Голоса вещей. Альманах том 1 " (Художественная литература)
Реклама

Микроскопическая техника - Роскин Г.И.

Роскин Г.И., Левинсон Л.Б. Микроскопическая техника — М.: Советская наука, 1957. — 469 c.
Скачать (прямая ссылка): microskopicheskayatehnika1957.djvu
Предыдущая << 1 .. 167 168 169 170 171 172 < 173 > 174 175 176 177 178 179 .. 214 >> Следующая

382
роформом (в отношении 1 к 2 или 1 к 3 или 4) и далее непродолжительное время поливают этим раствором. Требуется, таким образом, укрепить срез на стекле и слегка обезводить его (просветлить), но не давать при этом высыхать. 7. На еще влажный препарат наливают краситель Май-Грюнвальда и красят недолго (доли минуты),, чтобы избежать перекрашивания ядер. 8. Добавляют 1—2 капли дистиллированной воды и продолжают окраску.
9. Смывают краситель в дистиллированной воде и дифференцируют срез уксусной кислотой (1 часть ледяной уксусной кислоты,
2 части воды). Ведут дифференцировку до четкого выявления белого и серого вещества мозга. 10. Промывают в воде и докрашивают эритрозином 3—5 минут (можно с подогреванием): 1 г эри-трозина на 150 г дистиллированной воды и 2—3 капли ледяной уксусной кислоты. 11. Хорошо промывают препарат в дистиллированной воде. 12. Дают стечь воде, вытирают кругом среза тряпочкой и повторно просушивают фильтровальной бумагой. 13. Быстро проводят через ацетон, ксилол и заключают в бальзам.
В нервных клетках ядрышко окрашивается в розовый цвет; тельца Негра—в темно-голубой; аксоны миэлиновых волокон — в синий; миэлин — в красный цвет; ядра глиальных клеток — красные; глиофибриллы — сииие; хорошо красятся патологические зернистости глии.
Неудача окраски чаще всего зависит от передерживания среза в фосфорномолибденовой кислоте (получается зеленое закрашивание). Нужно стремиться к совершенной отчетливости всех структур, особенно ядер глии.
Можно окраску вести с конца, т. е. сначала диффузно окрасить срез эритрозином, потом, после споласкивания в воде, опустить его в фосфорномолибденовуго кислоту и далее красить так, как указано выше.
Этот метод менее элективен, чем метод Гольцера. Но у него есть свои положительные стороны: он позволяет выявить различные структурные элементы контрастно и многокрасочно, причем и такие элементы, которые другими методами или не окрашиваются или окрашиваются только после сложных подготовительных процедур.
Метод Кахаля выявляет прогоплазматичсскую глию. Наилучшие результаты метод дает при изучении мозга человека и лабораторных животных (собака, кошка и т. д.) как взрослых, так и эмбрионов.
1. Фиксация кусочков мозга или мозжечка в 14-процентном формалине 1—2 дня. Более тонкая импрегнация получается, если к 100 см3 14-процентного формалина прибавить 2 г бромистого аммония. 2. Срезы на замораживающем микротоме. Срезы помещают непосредственно в 4—6-процентный формалин. 3. Быстро споласкивают последовательно в двух чашечках с дистиллированной водой. 4. Кладут срезы на 6—10 часов в следующую смесь:
1-процентного хлорного золота (химически чистого) — 10 см3.
383
дистиллированной воды — 50 см3, 5-процентной сулемы— 10 см?. Иногда полезно разбавить смесь пополам водой. На 8—10 срезов нужно взять не менее 30 см?‘ смеси. 5. Тщательно промывают срезы в дистиллированной воде. 6. Закрепляют в 6-процентном гипосульфите (к 100 см? прибавить 1 е квасцов). Иногда полезно прибавить несколько капель насыщенного раствора кислого сернистокислого натрия. 7. Обезвоживают в спиртах, просветляют в ори-гановом масле и заключают в бальзам.
Олигодендроглия, микроглия
М е т о д Р и о-Г ортега для микроглии. Метод требует химически абсолютно чисцых реактивов.
1. Маленькие кусочкй фиксируют 1—8 дней (в темноте; в холодное время года фиксатор с материалом помещают в термостат —37°) в смеси: фор]Малина—14 см3, бромистого аммония — 2 г, дистиллированной воды — 86 см3. 2. Перед резкой кусочки в свежем фиксаторе помещают на 10 минут в термостат при 50—55°.
3. Резка на замораживающем микротоме; срезы (10—30 ц) обрабатывают аммиачной водой (1 капля на 25 см3 дистиллированной воды), быстро споласкивают водой и переносят па 10 минут в раствор серебра. Приготовление раствора серебра: к смеся 5 см? 10-процентного азотнокислого серебра и 20 см3 5-про-центного углекислого натрия (дающего значительный осадок) прибавляют по каплям 25-процептиый аммиак до полного растворения осадка; затем добавляют 15 см3 дистиллированной воды. Смесь хранят в темной склянке. 4. После серебра срезы, не промывая, переносят в 10-процентный нейтральный формалин, где огш принимают темно-коричневый цвет. Процесс восстановления серебра идет лучше, если срезы приводить в движение стеклянной палочкой. 5. Промывают в воде и золотят 10—15 минут в растворе хлорного золота (7 капель 1-процентного хлорного золота на 3 см3 дистиллированной воды). Срезы принимают серый тон, после чего их переносят в 5-процентный раствор гипосульфита на 7г минуты, затем хорошо промывают водой в течение часа. G. Срезы наклеивают белком, обезвоживают 96-градусиым спиртом, осторожно просушивают фильтровальной бумагой. Затем обливают смесью креозота (1 часть) и 10-процентного карболового ксилола (9 частей), промывают фильтровальной бумагой и заключают в канадский бальзам.
Метод Пеифильда для олигодендроглии и м п к р о г л и и является модификацией метода Рио-Гортега.
1. Фиксация формалином или смесью Кахаля. 2. Срезы (20 ^) на замораживающем микротоме. Срезы промывают 12 часов в воде, к которой прибавлено 10—15 капель аммиака. 3. Переносят на 1 час (при 38°) в смесь 5 см? 40-гтрацентнои бромоводородной кислоты и 95 см? дистиллированной воды, затем промывают дистиллированной водой, трижды ее сменяя. 4. Срезы обрабатывают 5-процентным раствором углекислой соды в течение часа.
Предыдущая << 1 .. 167 168 169 170 171 172 < 173 > 174 175 176 177 178 179 .. 214 >> Следующая