Книги
чёрным по белому
Главное меню
Главная О нас Добавить материал Поиск по сайту Карта книг Карта сайта
Книги
Археология Архитектура Бизнес Биология Ветеринария Военная промышленность География Геология Гороскоп Дизайн Журналы Инженерия Информационные ресурсы Искусство История Компьютерная литература Криптология Кулинария Культура Лингвистика Математика Медицина Менеджмент Металлургия Минералогия Музыка Научная литература Нумизматика Образование Охота Педагогика Политика Промышленные производства Психология Путеводители Религия Рыбалка Садоводство Саморазвитие Семиотика Социология Спорт Столярное дело Строительство Техника Туризм Фантастика Физика Футурология Химия Художественная литература Экология Экономика Электроника Энергетика Этика Юриспруденция
Новые книги
Цуканов Б.И. "Время в психике человека" (Медицина)

Суворов С. "Танк Т-64. Первенец танков 2-го поколения " (Военная промышленность)

Нестеров В.А. "Основы проэктирования ракет класса воздух- воздух и авиационных катапульных установок для них" (Военная промышленность)

Фогль Б. "101 вопрос, который задала бы ваша кошка своему ветеринару если бы умела говорить" (Ветеринария)

Яблоков Н.П. "Криминалистика" (Юриспруденция)
Реклама

Микроскопическая техника - Роскин Г.И.

Роскин Г.И., Левинсон Л.Б. Микроскопическая техника — М.: Советская наука, 1957. — 469 c.
Скачать (прямая ссылка): microskopicheskayatehnika1957.djvu
Предыдущая << 1 .. 169 170 171 172 173 174 < 175 > 176 177 178 179 180 181 .. 214 >> Следующая

ной стеклянной прямоугольной банке так, чтобы важнейшие части этих инструментов были закрыты от попадания на них сверху инфекции.
Операция складывается из трех моментов: взятия у донора посевного органа, обработки посевного материала и собственно посева этого материала реципиенту.
С соблюдением полной асептики у донора вырезают кусочек намеченного для опыта органа и переносят в подготовленную, как только что указывалось, бактериологическую чашку, в физиологический раствор поваренной соли. Чашку вновь закрывают, а донора уносят.
Приготовление посевного материала заключается в следующем. Кусочек органа выдвигают из жидкости на середину чашки
и, поддерживая пинцетом, многократно разрезают и размельчают изогнутыми ножницами. Из кусочка органа получается бесформенная кашица, прилипаюшая к остриям ножниц и пинцету. Предел измельчения наступает тогда, когда в этой кашице не остается кусочков больших чем '/а мм. Полученную липкую кашицу сдвигают в физиологический раствор поваренной соли и слегка промывают в нем при помощи пинцета. При этом слипающиеся кусочки органа должны разойтись друг от друга и должны быть смочены жидкостью со всех сторон. Промытый таким образом материал вновь сдвигают на сухую часть чашки и тщательно перемешивают с заранее подготовленным измельченным целлоидином. Лучшие результаты получаются, когда в конгломерат соединяют два объема измельченного целлоидина и один объем, или еще меньше, частиц подлежащего посеву органа. Наконец конгломерат опять сдвигают к краю жидкости и помещают так, чтобы его частицы не расплывались, но в то же время обильно смачивались и пропитывались жидкостью. После этого чашку закрывают.
У реципиента на брюшной стороне, тела параллельно белой линии производят разрез кожи в 2—2,5 см. На середину обоих краев разреза кожи накладывают пинцеты Кохера. Затем края кожи слегка растягивают в стороны этими зажимами, опуская их после этого по боковым сторонам животного. Таким образом, открывается достаточно большое окно к фасции. Если при этом появляется кровь, то ее тщательно удаляют марлевыми шариками. Далее двумя хирургическими пинцетами фасцию разрывают, при этом появляется доступ в область между ней и мышцами брюшной стенки. Фасцию разрывают пинцетами, а не разрезают скальпелем, так как при этом легче избежать кровоизлияния. Отсутствие крови под фасцией является непременным условием успешности опыта.
Далее каудальный край фасций несколько приподнимают, под него вводят зонд (также каудально) и образуют пазуху глубиной в 3 см. На конец желобоватого зонда накладывают посевной конгломерат, величиной с небольшую горошину, и раз-
25*
387
равннвают его по желобку. Край фасции вновь приподнимают, и в открытую пазуху до слепого ее конца вводят зонд с посевным конгломератом. Пуговчатым зондом посевной материал сдвигают с желобка, и оба зонда вынимают из пазухи. Кожный разрез зашивают. Легким надавливанием пальца на кожу конгломерату придают плоскую форму.
Только что сказанное относится к операциям, производимым на кроликах.
При использовании крупных животных, например, овец или очень мелких, например, мышей или, наконец, птиц, отдельные приемы приходится несколько изменять.
Применение смачивающих и эмульгирующих агентов и поверхностноактивных веществ в микроскопической технике.
В микроскопической технике применение поверхностно активных веществ (детергентов) может идти, по крайней мере, двумя путями. Первый — это использование таких веществ для гистохимического анализа. В качестве примера укажем на применение сапонина или солей желчной кислоты для анализа прочности связей рибонуклеиновой кислоты с протеинами цитоплазмы (Г. Роскин и М. Струве),
Другой путь — это введение поверхностно активных веществ в рецептуру красителей, что чрезвычайно повышает скорость проникновения красителей в субстрат, а также увеличивает интенсивность эффекта окрашивания. Диамонд (1945) предложил следующий быстрый метод окраски гематоксилином после сулемовых фиксаторов: 1. 4-процентный раствор железных квасцов — 5 минут; 2. Сполоснуть дистиллированной водой. 3. Красить 5 минут в свежеприготовленном растворе гематоксилина, к 30—40 см3 которого прибавлена 1 капля тергитоля 7 (готовят сперва 5-процентный раствор гематоксилина в 96-градусном Спирте, перед употреблением разводят дистиллированной водой 1 : 10). 4. Сполоснуть дистиллированной водой и дифференцировать 3—5 минут насыщенным водным раствором пикриновой кислоты, сполоснуть дистиллированной водой, затем обработать (до посинения срезов) проточной водой. 5. Спирты, ксилол, бальзам.
Другим примером может служить метод окраски клеточных стенок у микроорганизмов по Диару (1947). 1. Мазки фиксируют сухим жаром. 2. На предметное стекло наливают 3 капли 34-процентного раствора хлористого цетилпиридиниума, добавляют 1 каплю насыщенного водного раствора красного конго. 3. Промывают водой, докрашивают метиленовым синим, споласкивают водой; 4. Сухие мазки рассматривают в кедровом масле. Можно высказать предположение, что использование поверхностно-активных веществ при окраске таких трудных объектов, как например, центросомы, жгуты, нейрофибриллы и т. п. позволит с успехом разрешить задачу селективного окрашивания ряда клеточных компонентов.
Предыдущая << 1 .. 169 170 171 172 173 174 < 175 > 176 177 178 179 180 181 .. 214 >> Следующая