Книги
чёрным по белому
Главное меню
Главная О нас Добавить материал Поиск по сайту Карта книг Карта сайта
Книги
Археология Архитектура Бизнес Биология Ветеринария Военная промышленность География Геология Гороскоп Дизайн Журналы Инженерия Информационные ресурсы Искусство История Компьютерная литература Криптология Кулинария Культура Лингвистика Математика Медицина Менеджмент Металлургия Минералогия Музыка Научная литература Нумизматика Образование Охота Педагогика Политика Промышленные производства Психология Путеводители Религия Рыбалка Садоводство Саморазвитие Семиотика Социология Спорт Столярное дело Строительство Техника Туризм Фантастика Физика Футурология Химия Художественная литература Экология Экономика Электроника Энергетика Этика Юриспруденция
Новые книги
Янин В.Л. "Новгородские акты XII-XV Хронологический комментарий" (История)

Майринк Г. "Белый доминиканец " (Художественная литература)

Хусаинов А. "Голоса вещей. Альманах том 2" (Художественная литература)

Петров Г.И. "Отлучение Льва Толстого " (Художественная литература)

Хусаинов А. "Голоса вещей. Альманах том 1 " (Художественная литература)
Реклама

Микроскопическая техника - Роскин Г.И.

Роскин Г.И., Левинсон Л.Б. Микроскопическая техника — М.: Советская наука, 1957. — 469 c.
Скачать (прямая ссылка): microskopicheskayatehnika1957.djvu
Предыдущая << 1 .. 171 172 173 174 175 176 < 177 > 178 179 180 181 182 183 .. 214 >> Следующая

Фиксация
К фиксации простейших применимы в общем те же правила, которые описаны для фиксации клеток и тканей многоклеточных животных (стр. 95 и сл.). Но подготовка объектов для фиксации имеет свои особенности, которые зависят от того, имеем ли мы дело со свободиоживущими формами, полостными или тканевыми паразитами.
Для приготовления препаратов из тканевых паразитов фиксируют кусочек органа, содержащий простейших, и затем обрабатывают его так же, как обычно.
Из полостных и кровяных паразитов приготовляют мазки па предметных или покровных стеклах (стр. 132). Например, для приготовления мазка из паразитических кишечных инфузорий, грегарин и т. д. берут пинцетом кусочек вскрытого зараженного кишечника, прикладывают к стеклу и слегка размазывают. Часть простейших в результате этого окажется на стекле. При фиксации белок, имеющийся в среде, окружающей простейших (кровя-
391
ная плазма, содержимое кишечника), коагулирует и они приклеиваются к стеклу, что весьма облегчает их дальнейшую обработку.
Мазок следует фиксировать до того, как он высохнет. Высушивать мазки можно в тех случаях, когда желают только убедиться в наличии простейших во взятом материале. В ряде случаев после высушивания простейших хорошо сохраняются их жгуты, реснички, структуры пелликулы; наконец, объект иногда приходится высушивать для дальнейшего цитохимического исследования его, потому что при этом сравнительно мало изменяется химический состав клетки. Во всех остальных случаях нужно фиксировать влажный мазок.
При изготовлении «сухого» мазка следует делать его как можно более топким и быстро высушивать. Абсолютно недопустимо высушивать влажный мазок на какой-либо стадии его дальнейшей обработки.
Сухие мазки фиксируют абсолютным спиртом или смесью равных частей спирта и эфира. Затем мазок вновь быстро высушивают, после чего он может долго сохраняться. Стекла, на которых делают мазки, должны быть совершенно обезжирены, иначе мазок не приклеится.
Влажные мазки лучше делать на покровных стеклах, тогда для дальнейшей обработки их потребуется меньше реактивов и красителей и, кроме того, его можно на любой стадии обработки рассматривать с иммерсионным объективом.
После приготовления мазка его нужно фиксировать как можно быстрее, но в некоторых случаях для лучшего приклеивания (содержимое кишечника и т. п.) приходится мазок несколько подсушить (но не высушить!).
Покровное стекло следует бросить мазком вниз на фиксирующую жидкость так, чтобы стекло на ней плавало. Фиксатор лучше наливать в сосуд с выгнутыми стенками (большое часовое стекло и т. п.), чтобы при опускании стекла в жидкость его можно было легко вынуть.
Дальнейшую обработку мазка следует вести так же, как это указано для наклеенных парафиновых срезов. Нужно только иметь в виду, что простейшие очень тонки и поэтому время промывки может быть сокращено по сравнению со временем, необходимым для промывки кусочков. При промывке и окраске покровные стекла должны плавать на поверхности жидкости.
Удобно также для обработки мазков различными реактивами и красителями пользоваться специальной камерой, которую легко приготовить самому.
На предметное стекло канадским бальзамом приклеивают две полоски стекла (можно приготовить из другого предметного стекла) на таком расстоянии, чтобы на них могло опереться покровное стекло. На эти полоски кладут покровное стекло мазком вниз и образовавшуюся камеру заполняют водой или соответствующим реактивом. Чтобы стекло не сдвинулось, его прикрепляют кусоч-
392
ками воска. Смену жидкостей можно производить, оттягивая одну жидкость полоской фильтровальной бумаги и прибавляя другую пипеткой с противоположной стороны камеры. Верхнюю поверхность покровного стекла надо предварительно насухо вытереть. В такой камере можно наблюдать за объектом даже при помощи иммерсионного объектива.
В некоторых случаях, когда в ткани имеется много паразитических простейших, удобно приготовить препарат-отпечаток. Для этого соответствующий орган разрезают и прижимают поверхностью разреза к покровному стеклу. Дальнейшая обработка ведется. как выше описано для мазков.
Для приготовления препарата из простейших, культивируемых на поверхности агара, покровное стекло накладывают на агаровую пластинку (предварительно убедившись, что в этом месте есть простейшие), снимают и немедленно бросают в фиксирующую жидкость.
Такой мазок очень быстро сохнет и поэтому стекло после снятия с агара надо как можно быстрее класть на фиксатор. Иногда между стеклом и агаром остаются капельки воздуха; чтобы избавиться от них, надо или класть сначала стекло одним ребром на агар и при помощи пинцета осторожно его опускать, или же осторожно надавливать на стекло пальцем.
В некоторых случаях хорошие результаты при -приготовлении препаратов простейших, культивируемых на агаре, дает фиксация их через агар. Из агаровой пластинки с культурой простейших вырезается четырехугольный кусочек, по размерам меньший, чем покровное стекло. Его кладут в плоский сосуд (культурой вверх), накладывают покровное стекло и осторожно приливают фиксатор так, чтобы уровень его несколько не доходил до стекла. Фиксатор диффундирует сквозь агар и фиксирует объекты. При этом способе фиксации следует опасаться возникновения артефактов. После закончившейся фиксации покровное стекло снимают, или лучше через соответствующее для данного фиксатора время приливают фиксирующую жидкость, и-стекло само всплывает.
Предыдущая << 1 .. 171 172 173 174 175 176 < 177 > 178 179 180 181 182 183 .. 214 >> Следующая