Книги
чёрным по белому
Главное меню
Главная О нас Добавить материал Поиск по сайту Карта книг Карта сайта
Книги
Археология Архитектура Бизнес Биология Ветеринария Военная промышленность География Геология Гороскоп Дизайн Журналы Инженерия Информационные ресурсы Искусство История Компьютерная литература Криптология Кулинария Культура Лингвистика Математика Медицина Менеджмент Металлургия Минералогия Музыка Научная литература Нумизматика Образование Охота Педагогика Политика Промышленные производства Психология Путеводители Религия Рыбалка Садоводство Саморазвитие Семиотика Социология Спорт Столярное дело Строительство Техника Туризм Фантастика Физика Футурология Химия Художественная литература Экология Экономика Электроника Энергетика Этика Юриспруденция
Новые книги
Цуканов Б.И. "Время в психике человека" (Медицина)

Суворов С. "Танк Т-64. Первенец танков 2-го поколения " (Военная промышленность)

Нестеров В.А. "Основы проэктирования ракет класса воздух- воздух и авиационных катапульных установок для них" (Военная промышленность)

Фогль Б. "101 вопрос, который задала бы ваша кошка своему ветеринару если бы умела говорить" (Ветеринария)

Яблоков Н.П. "Криминалистика" (Юриспруденция)
Реклама

Микроскопическая техника - Роскин Г.И.

Роскин Г.И., Левинсон Л.Б. Микроскопическая техника — М.: Советская наука, 1957. — 469 c.
Скачать (прямая ссылка): microskopicheskayatehnika1957.djvu
Предыдущая << 1 .. 172 173 174 175 176 177 < 178 > 179 180 181 182 183 184 .. 214 >> Следующая

Свободноживущих простейших приходится обычно фиксировать в часовых стеклах или солонках. Предварительно тонко оттянутой пипеткой из культуры убирают лишнюю воду. Затем быстро приливают большое количество фиксирующей жидкости. Можно также набрать густую взвесь простейших в пипетку и быстро впрыснуть их в фиксатор. Дальнейшую обработку (промывку, обезвоживание и т. д.) ведут, перенося под лупой пипеткой материал из одного часового стекла в другое или (лучше) всю обработку ведут в одном и том же часовом стекле, оттягивая реактивы пипеткой и заменяя их другими.
Иногда свободноживущих простейших удается приклеить к покровному стеклу следующим способом: на покровное стекло помещают простейших в капле воды, оттягивают пипеткой возможно большее количество жидкости так, чтобы простейшие не под-
393
сохли, и затем с небольшой высоты бросают покровное стекло плашмя в фиксатор, простейшими вниз.
Мелких амеб, жгутиковых, инфузорий удобно фиксировать следующим способом: покровное стекло кладут на поверхность культуры простейших так, чтобы оно плавало. Через 15—20 минут на нижней поверхности стекла собираются простейшие. Стек-ло осторожно вынимают, под лупой или микроскопом убеждаются в наличии простейших и фиксируют так же, как указано выше. В большинстве случаев простейшие хорошо приклеиваются, что, понятно, значительно облегчает их дальнейшую обработку.
При всех методах приготовления мазков из свободно живущих простейших полезно стекло покрыть слоем белка с глицерином (см. стр. 151).
Э. Э. Вегенер разработала хороший способ прочной наклейки инфузорий, устраняющий потерю материала и пригодный для любого способа фиксации.
Фиксация материала производится не на предметном стекле, а в солонках или часовых стеклах. Затем парамеций или других простейших доводят до 96-градусного спирта. На чистое предметное стекло, предварительно смазанное белком с глицерином (несколько гуще, чем обычно), наносится маленькая капля спирта с парамециями. Парамеции непрочно приклеиваются. Не давая высохнуть спирту, быстро, но осторожно пускают по стеклу струю смеси абсолютного спирта с эфиром (1 : 1) и наносят на приклеившихся инфузорий каплю очень жидкого целлоидина; все стекло еще раз заливают спиртом с эфиром, затем подсушивают на воздухе 10—20 минут и помещают в 70-градусный спирт для уплотнения целлоидина. После такой наклейки препарат можно красить любыми красителями. Инфузории совершенно не деформируются. Тончайший слой целлоидина не мешает ни прокрашиванию объекта, ни микроскопированию.
Необходимо соблюдать следующие меры предосторожности: 1) не дышать на стекло во время наклейки; 2) употреблять очень жидкий целлоидин, 3) давать стеклу хорошо высохнуть перед опусканием в 70-градусный спирт. Э. Э. Вегенер считает, что этот метод вполне пригоден для наклейки на стекло не только инфузорий, но и других микроскопических организмов.
Время фиксации должно быть не слишком долгим. Нужно помнить, что в микроскопической технике указывается время фиксации для кусочков органов, а размеры простейших весьма малы. Поэтому же время отмывки и обработки различными реактивами может быть короче, чем это обычно указывается. Это относится, конечно, к изготовлению тотальных препаратов или мазков. При фиксации кусочков ткани с паразитами следует руководствоваться обычными сроками.
При фиксации простейших в общем можно пользоваться всеми фиксаторами, употребляемыми в цитологии, или гистохимии как для сохранения общей структуры клетки, так и для выявления от-
394
дельных ее органоидов (аппарат Гольджи, хондриосомы и т. п.).
Ниже будут приведены фиксаторы, чаще всего применяющиеся и дающие лучшие результаты при исследовании простейших.
Пары осмиевой кислоты дают хорошие результаты при фиксации мазков, отпечатков и свободиоживущих простейших (стр. 112). 1-процент-иый или 2-процентиый водный раствор осмиевой кислоты наливают в низкий сосуд, диаметр которого несколько меньше диаметра покровного стекла. Верхний край сосуда должен быть плоско отшлифован и смазаи вазелином. Можно пользоваться также предметным стеклом, к которому канадским бальзамом приклеено стеклянное кольцо с отшлифованным верхним краем. Расстояние между поверхностью осмиевой кислоты и объектом, находящимся на покровном стекле, не должно превышать 0,5 см. Фиксировать 1—5 мииут. Более длительная фиксация ведет к импрегнации объектов осмием (почернение) и вредно действует иа их последующую окраску.
Смесь Флемминга (стр. 113) хорошо фиксирует, но часто дает артефакты. Лучше в ней несколько уменьшать количество уксусной кислоты (до %. или даже до */ю обычного), хотя это несколько ослабляет последующую окраску. Фиксируют от 10 минут до 12 часов. Обязательна длительная (не меньше 1 часа) промывка. Хорошие результаты дает и смесь Мевеса.
Смесь Шаудина (стр. 120) фиксировать от 5 минут до 2 часов, затем поместить в 70-градусиый спирт с иодом и т. д.
Сулема с уксусной кислотой (5-процентиого водного раствора сулемы 100 см3, уксусной кислоты — 3—5 см3). Фиксировать от 10 минут до 6 часов, перенести в 30—70-градусиый спирт. Для фиксации морских простейших сулему следует разводить в морской воде. В этом случае объект до перенесения в спирт Уг—2 часа отмывать й дистиллированной воде. Обычно дает такие же хорошие результаты, как и жидкость Шаудииа.
Предыдущая << 1 .. 172 173 174 175 176 177 < 178 > 179 180 181 182 183 184 .. 214 >> Следующая