Книги
чёрным по белому
Главное меню
Главная О нас Добавить материал Поиск по сайту Карта книг Карта сайта
Книги
Археология Архитектура Бизнес Биология Ветеринария Военная промышленность География Геология Гороскоп Дизайн Журналы Инженерия Информационные ресурсы Искусство История Компьютерная литература Криптология Кулинария Культура Лингвистика Математика Медицина Менеджмент Металлургия Минералогия Музыка Научная литература Нумизматика Образование Охота Педагогика Политика Промышленные производства Психология Путеводители Религия Рыбалка Садоводство Саморазвитие Семиотика Социология Спорт Столярное дело Строительство Техника Туризм Фантастика Физика Футурология Химия Художественная литература Экология Экономика Электроника Энергетика Этика Юриспруденция
Новые книги
Цуканов Б.И. "Время в психике человека" (Медицина)

Суворов С. "Танк Т-64. Первенец танков 2-го поколения " (Военная промышленность)

Нестеров В.А. "Основы проэктирования ракет класса воздух- воздух и авиационных катапульных установок для них" (Военная промышленность)

Фогль Б. "101 вопрос, который задала бы ваша кошка своему ветеринару если бы умела говорить" (Ветеринария)

Яблоков Н.П. "Криминалистика" (Юриспруденция)
Реклама

Микроскопическая техника - Роскин Г.И.

Роскин Г.И., Левинсон Л.Б. Микроскопическая техника — М.: Советская наука, 1957. — 469 c.
Скачать (прямая ссылка): microskopicheskayatehnika1957.djvu
Предыдущая << 1 .. 173 174 175 176 177 178 < 179 > 180 181 182 183 184 185 .. 214 >> Следующая

Смеси Ценкера и Гелли (стр. 119). Фиксировать 1—2 часа. Дают хорошие результаты, ие вредят последующей окраске (иногда только плохо удаются окраски по Романовскому и по Майну). Плохо приклеивают.
. Смесь Буэна (стр. 116). Очень широко применяется для фиксации простейших. Фиксировать 15 мииут — 3 часа, затем хорошо промыть в 70-градусном спирте. Хорошо приклеивает объекты к покровному стеклу. Совершенно ие вредит окраске.
Смесь Буэна — Дюбоска (стр. 116) применяется для фиксации цист простейших и вообще трудно проницаемого материала. Фиксировать от 10 мииут до б часов, затем промывать в 70-градусиом спирте. Очень хорошо приклеивает простейших к стеклу «
Для фиксации цист часто применяется смесь Карнуа (стр. 106), для фиксации фибриллярных структур смесь Суза (стр. 120).
Заливка в парафин
Для заливки в парафин простейших, паразитирующих в тканях, заливают обычным способом кусочек ткани или органа, в которых находятся простейшие. Можно также заливать плотное содержимое кишечника, вырезанные кусочки культур на агаре и т. п. Во всех других случаях, например, свободноживущих простейших приходится заливать поодиночке, перенося их пипеткой из среды в среду, что довольно трудно, или же, чтобы не потерять материал при заливке, следует пользоваться нижеприведенными способами.
1. Простейших фиксируют в центрифужной пробирке (ручной центрифуги) с оттянутым на конце носиком. По истечении времени, необходимого для фиксации, центрифугу приводят в движение, вследствие чего простейшие осаждаются на дне пробирки.
395
Фиксатор сливают, наливают воду или спирт для промывки и вновь центрифугируют. Таким же образом производят обезвоживание спиртами и просветление ксилолом, бензолом или хлороформом. В парафин заливают в часовом стекле. Наливают парафин в стекло, дают ему затвердеть, в застывшем парафине делают ямку, в которую пипеткой переносят простейших из центрифужной пробирки вместе с ксилолом-парафином. Стекло ставят в термостат при 56° на 1—2 часа, чтобы расплавить парафин и дать испариться растворителю. Затем опускают стекло в холодную воду. Чтобы не растерять простейших, полезно их предварительно подкрасить эозином или светлым зеленым; тогда они хорошо видны в застывшем парафине. В случае надобности при дальнейшей обработке эти красители легко отмыть водой,
2. Тонкую стеклянную трубочку, диаметром не меньше 6—
7 мм (иначе будет плохо выливаться жидкость) с одного конца завязывают планктонной сеткой (мельничным газом). Этот конец предварительно слегка оплавляют на пламени горелки, чтобы его края не рвали газ. В трубочку переносят простейших и завязанный конец ее опускают в соответствующий реактив, начиная с 96-градусного спирта, и держат там нужное время. В воде и спиртах меньшей концентрации простейшие иногда прилипают к стенкам трубочки. Для заливки, поме того как простейшие пропитались парафином, верхний конец трубочки зажимают пальцем, а нижний опускают в холодную воду. Затем материю снимают, слегда нагревают трубочку и палочкой выталкивают из нее парафии с залитым в нем материалом.
3. При заливке в целлоидин-парафин (стр. 157) простейших, находящихся в растворе целлоидина в гвоздичном масле, центрифугируют, со дна пробирки набирают их вместе с целлоидином в пипетки с широким отверстием (2—3 мм) и капают в хлороформ. Раствор целлоидина в хлороформе срезу желатинизирует-ся и образует маленькие прозрачные шарики с заключенными в них простейшими. При дальнейшей обработке (хлороформ, парафин) эти шарики переносят из среды в среду.
4. В тех случаях, когда необходима точная ориентировка простейших (и вообще мелких объектов), заливку можно производить на целлоидиновых пластинках. Пластинки готовят следующим образом: 4—6-процентный раствор целлоидина в смеси абсолютного спирта с эфиром наливают в бактериологическую чашку слоем толщиной 5—7 мм и дают застыть под стеклянным колпаком в парах хлороформа. Через 2—3 дня из целлоидина нарезают небольшие кусочки призматической формы, они должны быть эластичны и легко резаться скальпелем. Пластинки хранят в банке с терпинеолом.
Перед заливкой пластинкам придают скальпелем форму прямоугольной призмы со строго перпендикулярными плоскостями, удобный размер — длина 3 мм, ширина 2 мм, высота 1,5 мм. С пластинки фильтровальной бумагой стирают терпинеол и кла-
396
дут ее на предметное стекло широкой поверхностью кверху. Объект из раствора целлоидина в гвоздичном масле тонкой пипеткой переносят на пластинку и под лупой или бииокуляром тонкими иглами ориентируют относительно ее краев, ребер. На одну и ту же пластинку можно положить несколько объектов. Они должны быть только смочены целлоидином, а не плавать в нем. Пластинку с объектами переносят на 15—20 минут в пары хлороформа, где целлоидин желатинизируется, и простейшие плотно приклеиваются к пластинке. Затем ее переносят на 1—1'/2 часа в хлороформ до полного просветления. Далее заливают в парафин обычным способом. Надо только обратить внимание на то, чтобы при заливке объекты располагались ближе к стек чу, а не в толще парафина, тогда при резке объект будет хорошо виден.
Предыдущая << 1 .. 173 174 175 176 177 178 < 179 > 180 181 182 183 184 185 .. 214 >> Следующая