Книги
чёрным по белому
Главное меню
Главная О нас Добавить материал Поиск по сайту Карта книг Карта сайта
Книги
Археология Архитектура Бизнес Биология Ветеринария Военная промышленность География Геология Гороскоп Дизайн Журналы Инженерия Информационные ресурсы Искусство История Компьютерная литература Криптология Кулинария Культура Лингвистика Математика Медицина Менеджмент Металлургия Минералогия Музыка Научная литература Нумизматика Образование Охота Педагогика Политика Промышленные производства Психология Путеводители Религия Рыбалка Садоводство Саморазвитие Семиотика Социология Спорт Столярное дело Строительство Техника Туризм Фантастика Физика Футурология Химия Художественная литература Экология Экономика Электроника Энергетика Этика Юриспруденция
Новые книги
Янин В.Л. "Новгородские акты XII-XV Хронологический комментарий" (История)

Майринк Г. "Белый доминиканец " (Художественная литература)

Хусаинов А. "Голоса вещей. Альманах том 2" (Художественная литература)

Петров Г.И. "Отлучение Льва Толстого " (Художественная литература)

Хусаинов А. "Голоса вещей. Альманах том 1 " (Художественная литература)
Реклама

Микроскопическая техника - Роскин Г.И.

Роскин Г.И., Левинсон Л.Б. Микроскопическая техника — М.: Советская наука, 1957. — 469 c.
Скачать (прямая ссылка): microskopicheskayatehnika1957.djvu
Предыдущая << 1 .. 177 178 179 180 181 182 < 183 > 184 185 186 187 188 189 .. 214 >> Следующая

Культуру освещают по 10—12 часов подряд, выключая свет иа ночь, до тех пор, пока не выведутся нужные организмы.
Через сутки в верхнем слое жидкости с освещенной стороны обычно появляются жгутиковые: различные виды эвглен, факус, синура и др. Через три-четыре дня выводятся инфузории, еще через несколько дней плапарии, малощетинковые черви, коловратки, циклопы. С этого момента начинается уничтожение культуры.
Организмы, которые нужно развести в культурах, изолируются сразу же по выходе из цист.
Ил можно заготовлять и с осени в банках или бутылях. Хранить его необходимо при температуре 4—5°. Этот метод имеет то преимущество, что ил можно брать из таких мест, где заведомо имеются те или иные организмы и зимой безошибочно получать нужный материал.
Планктон
Хорошая фиксация пшаийтона достигается разведенной смесью Флемминга (хромовая кислота 2,5 г, осмиевая кислота 1 г, уксусная кислота 1 см3, дистиллированная вода 100 смъ) или свежеприготовленной смесью равных частей вышеприведенного фиксатора неразведенного формалина (фиксатор Ло-Бианко).
Метод Франкота позволяет одновременно фиксировать и окрашивать микропланктои. Для этой цели каплю планктона смешивают с раствором А, накрывают покровным стеклом, и по мере высыхания жидкости А ее постепенно заменяют раствором Б (не снимая покровного стекла). Затем делают рамку вокруг покровного стекла и получают постоянный препарат. Раствор А: спирт 90-градусный — 20 см3, глицерин — 20 см3, формалин иеразве-
26*
403
денный— 5 см3, везувин — 0,05 г, малахитовый зеленый — 0,1 г, вода — 55 см3. Раствор Б: вода — 50 см3, спирт 96-градусный — 20 см3, глицерин — 30 см3.
НЕКОТОРЫЕ СПЕЦИАЛЬНЫЕ МЕТОДЫ ИЗУЧЕНИЯ МНОГОКЛЕТОЧНЫХ БЕСПОЗВОНОЧНЫХ
При изучении гистологии и цитологии беспозвоночных следуе! помнить, что большинство ранее описанных методов, как прижизненной микроскопии, так и методов фиксации, заливки и окраски могут быть применены и к этим объектам. Поэтому далее приводятся только некоторые специальные указания в отношении отдельных систематических групп.
Кроме обычных методов заливки для специальных целей можно использовать два нижеприводимых способа.
Метод заливки для получения толстых срезов
Этот метод особенно подходит для анатомического исследования организмов длиной 1—2 см, строение которых лучше всего исследовать в срезах толщиной около 100 ц.
В этом случае объект заключают в целлоидин, заранее приготовляя 2-, 4- и 8-процентный раствор его в равных объемах эфира и абсолютного спирта.
Объект проводят через:
1. Абсолютный спирт.
2. Равные части абсолютного спирта и эфира.
3. 2-процентный целлоидин в спирте и эфире (несколько дней).
4. 4-процентный » » » » » » »
5. 8-процентпый » » » » » (неделя)
6. Приготовляют кольцо из полоски бумаги, как на рис. 93. Наполовину наливают его 8-процентным целлоидином.
7. Для затвердевания его помещают в закрытую посуду вместе с ватой, смоченной хлороформом.
8. Когда целлоидин затвердеет, смягчают его поверхность, смазывая ее слегка смесью спирта с эфиром, заполняют кольцо доверху 8-процентиым целлоидином, помещают туда объект и ориентируют его.
9. Кольцо с объектом оставляют затвердевать на ночь или иа более продолжительное время в закрытой посуде с куском ваты, смоченной хлороформом.
10. Вынимают блок, подсунув под него бритвенное лезвие.
11. Просветляют в течение нескольких часов в кедровом масле с несколькими каплями абсолютного алкоголя и хлороформа.
12. Блок обрезают, как показано на рис. 93, в. Избыток кедрового масла удаляют и блок прикрепляют к столику микротома несколькими каплями 8-процентиого целлоидина, который уплотняют в парах хлороформа.
404
13. Лезвие ножа и блок смачивают кедровым маслом и делают срезы толщиной в 100 ц, немедленно помещая их в кедровое масло. Каждый из последовательных срезов помечают срезкой углов, как показно на рис. 93.
Серию из 5 срезов помещают в отдельный сосуд, окрашивая и монтируя их отдельно.
Рис. 93. Схема заливки крупных зоологических объектов. Л — бумажное кольцо, заполненное 8-процентным целлоидином, на предметном стекле; Б — точно ориентированный объект залитый в целлоидиновую массу; В — блок с ориентированным объектом; 1—5 срезы с ориентированного блока.
Для подготовки к окрашиванию срезы помещают в ксилол и далее в смесь из равных частей абсолютного спирта и хлороформа, а затем в 90-градусный спирт и т. д. Окрашивают по методу Маллори и заключают обычным способом.
Метод двойной заливки для малых объектов
Приготовляют густой, как патока, раствор целлоидина в равных частях спирта и эфира, добавляют такой же объем гвоздичного масла и хорошо перемешивают. Помещают в теплое место, иногда помешивая, пока не исчезнет запах эфира. Для уменьшения вязкости раствора к нему добавляют немного гвоздичного масла.
405
Чтобы сделать объекты хорошо видимыми, их предварительно окрашивают эозином в абсолютном спирте. Затем помещают объект б небольшую закрытую стеклянную пробирку, наполненную, как показано на рис. 94, слоями промежуточных сред. Объект, очень медленно опускаясь, постепенно проходит слой гвоздичного масла, слой смеси гвоздичного масла и целлоидина и погружается в густой целлоидин. Через несколько дней пипеткой осторожно удаляют из пробирки слои промежуточных сред, а затем объект в густом целлоидине переносят в кольцо, наполненное целлоидином, и поступают, как было выше описано для крупных объектов.
Предыдущая << 1 .. 177 178 179 180 181 182 < 183 > 184 185 186 187 188 189 .. 214 >> Следующая