Книги
чёрным по белому
Главное меню
Главная О нас Добавить материал Поиск по сайту Карта книг Карта сайта
Книги
Археология Архитектура Бизнес Биология Ветеринария Военная промышленность География Геология Гороскоп Дизайн Журналы Инженерия Информационные ресурсы Искусство История Компьютерная литература Криптология Кулинария Культура Лингвистика Математика Медицина Менеджмент Металлургия Минералогия Музыка Научная литература Нумизматика Образование Охота Педагогика Политика Промышленные производства Психология Путеводители Религия Рыбалка Садоводство Саморазвитие Семиотика Социология Спорт Столярное дело Строительство Техника Туризм Фантастика Физика Футурология Химия Художественная литература Экология Экономика Электроника Энергетика Этика Юриспруденция
Новые книги
Реклама

Микроскопическая техника - Роскин Г.И.

Роскин Г.И., Левинсон Л.Б. Микроскопическая техника — М.: Советская наука, 1957. — 469 c.
Скачать (прямая ссылка): microskopicheskayatehnika1957.djvu
Предыдущая << 1 .. 178 179 180 181 182 183 < 184 > 185 186 187 188 189 190 .. 214 >> Следующая

Бритвенным лезвием вырезают прямоугольный блок целлоидина, вертикальная поверхность которого должна быть параллельной будущей плоскости среза. Чтобы отметить положение объекта в блоке, сбрезают края блока на конце, противоположном объекту. Блок заливают (по обычным правилам) в твердый парафин, обрезают последний параллельно блоку, ориентируют и делают срезы.
Заключают обычным способом, но выравнивание целлоидина завершают высушиванием над парами эфира. Высушивают очень медленно, чтобы избежать сморщивания целлоидина.
Наблюдения над живыми объектами
Для изучения живых мелких животных пригоден способ иммобилизации, предложенный Г. С. Стреляным (1949).
Используют растворы желатины в концентрации от 5 до 15% в зависимости от разных видов животных и разных целей исследования. Несомненно, что для некоторых объектов эта концентрация должна быть понижена, для других более пригодной окажется большая. Во многих случаях бывает достаточно лишь затруднить движение животного, увеличивая немного вязкость среды.
Замурованное в желатине животное не может изменить сколько-нибудь значительно свою внешнюю форму и оказывается, таким образом, почти неподвижным. В то же время оно сохраняется живым в течение значительного срока, не обнаруживая, как правило, заметных патологических изменений. Для разных объектов этот срок различен, от нескольких часов до суток и более, в зависимости от температуры, концентрации желатины, толщины ее слоя и пр.
После заливки в желатину объект может быть из нее освобожден или с помощью препаровальных игл, или легким нагреванием
406
Рис. 94. Схема приспособления для двойной заливки мелких зоологических обп-ектоп:
/ — слой спиртового раствора эозина с объектом; 2 _ слой масла; 3 — слой смеси равных* ч-,чс’т<”1 масла и целлоидина; 4 — слой густого целлоидина; 5 — корковая подставка.
препарата, приводящем к полному или частичному разжижению желатины и не повреждающим животное.
Этот метод Г. Стрелииа применяется к кольчатым червям, турбелляриям, гидре и некоторым другим водным животным.
Для ограничения движений гидры достаточно залить объект в
5—10-процентную желатину.
В условиях относительно медленного застывания желатины {при комнатной температуре) сократившаяся первоначально гидра обычно успевает вытянуться и расправить щупальцы до момента затвердевания среды.
Таким образом, для прижизненных наблюдений удается получить неподвижные объекты, иногда с сильно вытянутыми щупальцами. Это представляет определенное удобство для микроскопи-рованпя; добиться такого положения каким-либо другим путем обычно ке удается.
В нашей лаборатории гидры, находившиеся в желатине в течение 1—2 часов, в дальнейшем после освобождения от лее продолжали нормальное существование.
Заливка животного в желатину может быть использована не только для прижизненных наблюдений и экспериментов над ним, но и как подготовка к консервированию его тем или другим фиксатором.
Разработанная методика иммобилизации животных может быть применена при изучении весьма разнообразных пресноводных и морских существ. Она дает некоторые дополнительные возможности для прижизненного наблюдения под большими увеличениями микроскопа, зарисовки объектов, в частности с помощью рисовального аппарата, фотографирования, требующего больших экспозиций, и для цейграферной съемки движения внутренних органов животных, которой часто мешает общая подвижность организма.
Описанная методика открывает большие возможности и для экспериментальной работы: она позволяет воздействовать тем или другим внешним фактором, например лучистой энергией, на строго определенные части организма, не затрачивая при этом других его частей. Она облегчает в некоторых случаях оперативное вмешательство и, может быть, при дальнейшей разработке окажется полезной при проведении опытов со сращиванием и трансплантацией.
Для окраски нервной системы мелких беспозвоночных можно использовать метод Ромье: небольшое количество бензидина растворяют в нескольких кубических сантиметрах слегка подкисленной дистиллированной воды; через '/г часа фильтруют; живые объекты (предварительно ополоснутые дистиллированной водой) окрашивают в этом растворе 30—60 мин.; затем к раствору добавляют 1—2 капли перекиси водорода; при этом избирательно в синий цвет окрашивается нервная система (контроль под микроскопом), однако окраска исчезает через 2—3 часа.
407
Губки
Мелкие морские роговые губки. Животное помещают на 5 минут в 1-процентный раствор осмиевой кислоты и затем переносят его в крепкий спирт, который необходимо дважды сменить. Обычная заливка в парафин. Срезы можно окрашивать спиртовым кармином. Молодых Sycon можно фиксировать в абсолютном спирте и окрашивать спиртовым кармином. Личинкам Spongilla дают осесть на большом покровном стекле и затем фиксируют 3 минуты в абсолютном спирте, окрашивают их в спиртовом кармине, обезвоживают, просветляют в бергамотовом масле и заключают в бальзам. Абсолютный спирт особенно рекомендуется для более крупных животных. Спиртовый раствор сулемы или смесь пикриновой и серной кислоты также дают хороший результат. Известковые губки перед заключением в парафин необходимо декальщшировать в подкисленном спирте.
Предыдущая << 1 .. 178 179 180 181 182 183 < 184 > 185 186 187 188 189 190 .. 214 >> Следующая