Книги
чёрным по белому
Главное меню
Главная О нас Добавить материал Поиск по сайту Карта книг Карта сайта
Книги
Археология Архитектура Бизнес Биология Ветеринария Военная промышленность География Геология Гороскоп Дизайн Журналы Инженерия Информационные ресурсы Искусство История Компьютерная литература Криптология Кулинария Культура Лингвистика Математика Медицина Менеджмент Металлургия Минералогия Музыка Научная литература Нумизматика Образование Охота Педагогика Политика Промышленные производства Психология Путеводители Религия Рыбалка Садоводство Саморазвитие Семиотика Социология Спорт Столярное дело Строительство Техника Туризм Фантастика Физика Футурология Химия Художественная литература Экология Экономика Электроника Энергетика Этика Юриспруденция
Новые книги
Реклама

Микроскопическая техника - Роскин Г.И.

Роскин Г.И., Левинсон Л.Б. Микроскопическая техника — М.: Советская наука, 1957. — 469 c.
Скачать (прямая ссылка): microskopicheskayatehnika1957.djvu
Предыдущая << 1 .. 181 182 183 184 185 186 < 187 > 188 189 190 191 192 193 .. 214 >> Следующая

Actinia. Помещают животных в стеклянную чашку с морской водой, так чтобы вода покрывала их на 2,5 см или больше,
411
и затем в нее бросают кристаллики ментола, которые медленно растворяются. В зависимости от количества воды и размера животных, наркотизирование продолжается от 12 до 24 часов. Затем, животных помещают в формалин или в смесь формалина и спирта. Можно применять также и кокаин, как описано для медуз. После наркотизации животное может быть зафиксировано в буэповской жидкости нли в сулеме н затем обработано обычным сяособом.
Черви
Нематоды. Фиксирующую и дегидрирующую жидкость составляют из абсолютного спирта — 20 см3; хлороформа — 15 смъ\ ледяной уксусной кислоты — 5 см&\ кристаллического фенола следует прибавить столько, чтобы общий объем смеси увеличился на 10 см3. Хранят в банке со стеклянной пробкой. Так как жидкость портится, материал нельзя в ней хранить больше двух недель. К фиксатору медленно прибавляют кедровое масло или хлороформ, оставляют в этой смеси до просветления, а затем объект переносят в чистое масло или хлороформ, в котором объект можно держать еще 30—60 минут. К маслу прибавляют стружки парафина, ставят в тепло на 2 часа, после чего переносят в чистый парафин при 58° и затем заливают. Окрашивают как желательно. Для монтировки целого животного поступают, как описано выше, но просветляют его предпочтительно в гвоздичном или бергамотовом масле. В этом случае в слегка наклоненное часовое стекло, в котором находится червь в небольшом количестве масла, наносят большую каплю чистого канадского бальзама. Нужно дать канадскому бальзаму диффундировать в ткани, на что нужно 2—3 часа. Если.диффузия проходит хорошо, то червь не сжимается и не сморщивается. Больших червей перед просветлением можно осторожно наколоть препаровальной иглой для проникновения в них бальзама. Фиксированных и окрашенных червей можо заключать и в глицерин.
Червн (нематоды, цестоды, трематоды), которые могут оказаться после фиксации сморщенными, можно затем реставрировать вымачиванием в 35—50-градусном спирте, к которому прибавлена в равном объеме молочная кислота. После этого кислоту отмывают, прополаскивая объект в 70-градусном спирте. Если паразитические нематоды убиты горячей водой нли спиртом, то хотя они и выпрямляются, но окрашиваются с большим трудом. Важно, чтобы переход объекта нз одной жидкости в другую происходил постепенно; нужно, чтобы 6—12 часов уходило иа смену одной жидкости другой. Объект проводят через слабые спирты до 70-градусного спирта, затем окрашивают квасцовым гематоксилином в 70-градусном спирте, к которому прибавлено немного уксусной кислоты. Оставляют на неделю в растворе уксуснокислого натрия нли калия в 70-градусном спирте, затем переносят в более крепкий спирт, далее в абсолютный спирт, две или три смеси спир-
412
та с ккилолом, чистый ксилол; затем заливают по обычной схеме в парафип.
Различных- мелких нематод можно убивать, нагревая их на предметном стекле с луночкой (в нескольких каплях дистиллированной воды). Фиксируют в смеси дистиллированной воды, формалина, 90-градусного спирта и уксусной кислоты (40 : 6 : 20 : 1). Переносят в 30-градусный спирт с 2% глицерина, где оставляют на 6—10 дней, проводят объект через спирты, окрашивают квасцовым кармином, дифференцируют окраску, затем проводят через абсолютный спирт, ксилол, заключают в бальзам.
Нематода Oxyuris. Для тотальных препаратов животное убивают 70-градусным спиртом, подогревая его до 60°. Оставляют в спирте на несколько дней, обезвоживают, затем переносят в кедровое масло+спирт (10 : 90). Помещают в эксикатор при 20°. После трех дней, когда спирт испарится, обновляют кедровое масло. Для срезов червей фиксируют по Флеммингу, Бенда или в осмиевой кислоте. Обезвоживают медленно, разрезая животных на части, и переносят в смесь кедрового масла и абсолютного спирта (20 : 80), ставят на термостат (56°) и через несколько часов помещают в чистое масло, затем в смесь равных частей масла и парафина и, наконец, в парафин на 24 часа. Окрашивают в квасцовом или железном гематоксилине, докрашивают эозином или оранжем G.
G о г d i u s. Для прижизненной окраски применяют 0,001-процентный раствор метиленового синего. Для срезов нли для тотальной монтировки — фиксируют в жидкости Германа или Зелинка (1-процентной хромовой кнелоты 35 частей; дистиллированной воды — 45 частей; уксусной кислоты — 1 часть). Для тотальной монтировки переносят прямо в глицерин, для срезов—сначала промывают в проточной воде, медленно обезвоживают и так же медленно проводят через ксилол до парафина. Эмбрионов режут на срезы толщиной в 5 ц, личинок— 3 ц. Окрашивают в квасцовом гематоксилине или в анилин-генциановом фиолетовом (5 см3 насыщенного раствора в 96-градусном спирте на 100 см3 анилиновой воды) в течение 24 часов, затем дифференцируют. Молодых личинок после фиксации в жидкости Германа без отливки и после медленной проводки монтируют в глицерине.
Предыдущая << 1 .. 181 182 183 184 185 186 < 187 > 188 189 190 191 192 193 .. 214 >> Следующая