Книги
чёрным по белому
Главное меню
Главная О нас Добавить материал Поиск по сайту Карта книг Карта сайта
Книги
Археология Архитектура Бизнес Биология Ветеринария Военная промышленность География Геология Гороскоп Дизайн Журналы Инженерия Информационные ресурсы Искусство История Компьютерная литература Криптология Кулинария Культура Лингвистика Математика Медицина Менеджмент Металлургия Минералогия Музыка Научная литература Нумизматика Образование Охота Педагогика Политика Промышленные производства Психология Путеводители Религия Рыбалка Садоводство Саморазвитие Семиотика Социология Спорт Столярное дело Строительство Техника Туризм Фантастика Физика Футурология Химия Художественная литература Экология Экономика Электроника Энергетика Этика Юриспруденция
Новые книги
Янин В.Л. "Новгородские акты XII-XV Хронологический комментарий" (История)

Майринк Г. "Белый доминиканец " (Художественная литература)

Хусаинов А. "Голоса вещей. Альманах том 2" (Художественная литература)

Петров Г.И. "Отлучение Льва Толстого " (Художественная литература)

Хусаинов А. "Голоса вещей. Альманах том 1 " (Художественная литература)
Реклама

Микроскопическая техника - Роскин Г.И.

Роскин Г.И., Левинсон Л.Б. Микроскопическая техника — М.: Советская наука, 1957. — 469 c.
Скачать (прямая ссылка): microskopicheskayatehnika1957.djvu
Предыдущая << 1 .. 20 21 22 23 24 25 < 26 > 27 28 29 30 31 32 .. 214 >> Следующая

Для прижизненной окраски мелких водных животных, головастиков и водных беспозвоночных трипановым синим, водным
¦63
синим или витальным красным, рекомендуется помещать этих животных в аквариумы, куда добавлен краситель. Концентрация красителя должна быть 1 : 5000. Если раствор обесцвечивается, необходимо снова прибавить краситель. Краситель накапливается в некоторых отделах почки и почти одновременно появляется в звездчатых клетках печени; в гистиоцитах соединительной ткани окрашивание наступает позднее. Первое окрашивание у головастиков наступает через несколько дней, интенсивное обычно через пару недель. Отдельные кусочки тканей и органов головастика можно рассматривать в физиологическом -растворе. Целых окрашенных головастиков фиксируют в насыщенном растворе сулемы, приготовленном на физиологическом растворе в течение 24 часов. Затем промывают их в продолжение нескольких часов в дистиллированной воде и, ие иодируя, заключают обычно в парафин. Срезы можно докрашивать гематоксилином Гансена с последующей диффереицировкой пикриновой кислотой. Процессы выделения в почке и печени можно изучать с помощью прижизненного окрашивания трипановым синим.
Литиевый к а р м и и хорошо переносит фиксацию и действие спиртов, но несколько более ядовит, чем трипановый синий. Наилучший способ введения красителя — внутривенный.
Изготовление красителя: 2,5 г кармииа растворяют в 100 см3 насыщенного раствора углекислого лития, кипятят на водяной бане 10—15 минут, после чего фильтруют.
Перед введением красителя животным — из основного раствора приготовляют 20'Процентный раствор. Мышам краситель вводят в хвостовую вену, начиная с дозы 0,2 см3. Обычно необходимы многократные инъекции. Кроликам вводят 10-процентный раствор по 10 см3. Кусочки окрашенной ткани фиксируют в 10-процентном формалине (на физиологическом растворе поварепной соли); срезы, изготовляемые на замораживающем микротоме, можно докрашивать гематоксилином. Для парафиновых срезов материал фиксируют в 10-процептном формалине или в смеси 1 части формалина и 8,5 частей насыщенной сулемы. Иодирования следует избегать. Срезы докрашиваются квасцовым гематоксилином или метиловым зеленым — пиронином. Кусочки ткаии, окрашенные литиевым кармином, можно также обрабатывать различными методами для выявления митохондрий.
Литиевый кармин употребляется для прижизненной окраски культур ткани in vitro. К культуре пипеткой прибавляют каплю 20-процентного раствора красителя. Окрашенные культуры ткани можно фиксировать вышеуказанными фиксаторами и докрашивать квасцовым1 гематоксилином.
Тушь очень часто применяется для изучения явлений фагоцитоза. Обычно ее вводят внутривенно. Для этого приготовляют 10—20-процентиый раствор туши на дистиллированной воде, филь-труют и для стерилизации кипятят 10 минут. Мышам вводят внут
69
тривеино 0,4 см3 10-процентного раствора; кроликам—2 см3 20-процентного раствора на 1 кг веса.
Кусочки ткани с частичками туши хорошо переносят фиксацию. Хорошим фиксатором служит смесь «суза». Срезы можно докрашивать кармином.
Раствор туши используют также для изучения фагоцитоза в культуре тканей.
Ferrum saccharatum (железный сахар) применяется для изучения клеток ретикуло-эидотелиальной системы. Раствор готовят на дистиллированной воде или на физиологическом растворе; для стерилизации его можно прокипятить. Раствор должен быть свежеприготовленным.
Н. Г. Хлопин (1930) вводит лягушкам в лимфатические спинные мешки 0,5 см3 5-процентиого раствора железного сахара; через 24 часа наблюдается интенсивное накопление частиц железа в купферовских клетках печени. После двухдневного перерыва можно повторить инъекцию для усиления накопления частиц железа.
В некоторых случаях следует делать 7—10 последовательных инъекций железного сахара. Мышам вводят внутрибрюшиино 1 см3 4-процентиого раствора железного сахара однократно или по 0,5—0,7 см3 четыре раза каждый третий день; внутривенно вводят 0,7—1 см3 однократно; некоторые авторы указывают меньшую дозу — 0,3 см3 или же рекомендуют вводить 0,5 см3 3-про-центного раствора.
Кроликам вводят ежедневно в течение ряда дней и даже недель по 2 см3 50-процеитиого раствора железного сахара (в физиологическом растворе поваренной соли); можно инъицировать кроликам ежедневно 1 см3 30-процеитиого раствора в течение 4—6 недель.
Кусочки ткани фиксируют в 20-процеитном формалине. Изготовляют срезы на замораживающем микротоме. Железо в клетках выявляют обычными микрохимическими методами. Срезы можно затем докрашивать кармином.
Бесцветные карбинолы некоторых кислых красителей, например, кислого фуксина, светлого зеленого, водного синего обладают «элективной гистотропией», в отличие от своей цветной формы. Для получения элективного окрашивания указанные красители растворяют в физиологическом растворе и в виде 2,5-процеитного раствора вводят подкожно. В организме краситель переходит в свою бесцветную форму. Через некоторое время фиксируют органы подопытного животного в формалине с уксусной кислотой и, проведя через спирты и хлороформ, заключают в парафин. Освобожденные от парафина срезы доводят до воды и кладут иа несколько часов в 0,1 -процентную соляную кислоту. Срезы вначале бесцветны, ио затем происходит восстановление бесцветной, формы красителя в цветную. Этот метод окраски называют «непрямым витальным окрашиванием».
Предыдущая << 1 .. 20 21 22 23 24 25 < 26 > 27 28 29 30 31 32 .. 214 >> Следующая