Книги
чёрным по белому
Главное меню
Главная О нас Добавить материал Поиск по сайту Карта книг Карта сайта
Книги
Археология Архитектура Бизнес Биология Ветеринария Военная промышленность География Геология Гороскоп Дизайн Журналы Инженерия Информационные ресурсы Искусство История Компьютерная литература Криптология Кулинария Культура Лингвистика Математика Медицина Менеджмент Металлургия Минералогия Музыка Научная литература Нумизматика Образование Охота Педагогика Политика Промышленные производства Психология Путеводители Религия Рыбалка Садоводство Саморазвитие Семиотика Социология Спорт Столярное дело Строительство Техника Туризм Фантастика Физика Футурология Химия Художественная литература Экология Экономика Электроника Энергетика Этика Юриспруденция
Новые книги
Янин В.Л. "Новгородские акты XII-XV Хронологический комментарий" (История)

Майринк Г. "Белый доминиканец " (Художественная литература)

Хусаинов А. "Голоса вещей. Альманах том 2" (Художественная литература)

Петров Г.И. "Отлучение Льва Толстого " (Художественная литература)

Хусаинов А. "Голоса вещей. Альманах том 1 " (Художественная литература)
Реклама

Микроскопическая техника - Роскин Г.И.

Роскин Г.И., Левинсон Л.Б. Микроскопическая техника — М.: Советская наука, 1957. — 469 c.
Скачать (прямая ссылка): microskopicheskayatehnika1957.djvu
Предыдущая << 1 .. 22 23 24 25 26 27 < 28 > 29 30 31 32 33 34 .. 214 >> Следующая

72
вается в виде зерен, поврежденные или некротические клетки окрашиваются диффузно.
Различные факторы физиологического химического и физического порядка могут изменять характер нормального гранулярного окрашивания: сперва диффузно окрашивается цитоплазма, а затем и ядро. Эти стадии окрашивания обратимы, если степень повреждения клеток не переходит известного предела.
Фиксация кусочков ткани, окрашенных нейтральным красным, представляет значительные трудности. Их можно фиксировать в течение 24 часов смесью: 43 см3 жидкости Ценкера (без уксусной кислоты) и 7 см3 формалина, к которому прибавлено 2 капли ! N NaOH. Маленькие кусочки ткани переносят в свежую смесь на 12—24 часа, промывают их в течение 15 минут водой; затем помещают в 80-градусный спирт на 10 минут; в первый абсолютный спирт на 1 минуту, во второй абсолютный спирт — на 5 минут дважды, в ацетон по 20 минут, дважды в ксилол по 20 минут, дважды в парафин 56° по 1—2 часа и окончательная заливка.
Полученные срезы можно докрашивать гематоксилином нли полихромным синим. Некоторые исследователи рекомендуют окраску фиксировать парами иода или, что гораздо лучше, смесью: 60 см3 насыщенного водного раствора пикриновой кислоты, 20 c.ifi формалина, 20 смъ насыщенного, водного раствора молибденовокислого аммония.
Метиленовый синий употребляется для прижизненного окрашивания Protozoa, изолированных клеток, в культурах ткани,, изолированных тонких тканевых мембран и пленок; обычное раз-ведение 1:1000—1:10 000. 10-процентный метиленовый синий’ применяют для подкожных инъекций, например, при изучении лимфатических мешков амфибий.
Для изучения митохондрий в клетках почки в спинные лимфатические мешки Bufo vulgaris ииъицируют 1-процентный метиленовый синий и на следующий день, вскрыв животное, рассматривают под микроскопом маленькие кусочки почечной ткаии, слегка раздавив их покровным стеклом; другие кусочки можно зафиксировать вышеописанной смесью из пикриновой кислоты, формалина и молибденовокислого аммония. Затем залить в парафин н докрасить сафранином.
Для окраски нервной системы низших организмов (гидроидов, червей, моллюсков, водных рачков) к среде, в которой находятся животные, прибавляют метиленовый синий. Наилучшие результаты дают разведения 1 : 1000—1 : 10 000.
Применение метиленового синего для окраски нервной ткани позвоночных см. стр. 374.
Можно получить окраску митохондрий в клетках культур тканей, применяя метиленовый синий в разведении 1:10 000 (в физиологическом растворе); продолжительность окраски 4—8 минут; для интравитальной окраски животному инъицируют 0,5-процентный раствор метиленового синего и через 15—30 минут производят
73
вскрытие; для суправитальной окраски помещают кусочки ткани в 1 : 10 000 раствор красителя (в физиологическом растворе) на 15—30 минут в термостат при температуре 37°. Прижизненно окрашенные митохондрии быстро обесцвечиваются. Для прижизненной -окраски митохондрий можно также применить толуидиновый •синий и яркий крезиловый синий.
Нафтоловый синий рекомендуют для специфической прижизненной окраски тканей щитовидной и паращитовидной желез, которые он дифференцированно окрашивает в интенсивно синий цвет, а другие ткани — мускульную, слюнные железы и т. д.— в бледный зеленовато-синий цвет. Краситель разводят 1 ; 40 000 в физиологическом растворе поваренной соли. Окрашивание ведется методом перфузии, причем подопытным крупным лабораторным животным вводят в кровяное русло 500—1000 см3 раствора в течение 10—30 минут.
Прижизненная окраска гипосульфитными .лейкобазами (Роскин и Маслова 1935, Роскин и Семенов 1933). Эти лейкобазы приготовляют обработкой основных красителей гипосульфитом. Наблюдения показали, что гипосульфитные лейкобазы весьма мало токсичны и могут служить как для витального окрашивания многих Protozoa, так и для различных клеток и тканей Metazoa.
Метод приготовления гипосульфитных лейкобаз следующий: к 100 см3 0,01-процентного красителя прибавляется 1—2,5 см3 0,1 N раствора гипосульфита и 1—4 см3 0,1 N раствора соляной кислоты: полученную смесь тщательно перемешивают стеклянной палочкой и ставят в темноту при обычной комнатной температуре. В зависимости от красителя и концентрации употребляемых реактивов происходит быстрое нлн более медленное образование бесцветной лейкобазы.
В среднем обесцвечивание происходит через 2—3 часа, но иногда тянется до 24 часов.
Растворы гипосульфитных лейкобаз бесцветны, прозрачны и ^весьма стойки к окислению, но нх надо сохранять в темноте. '
При окраске прибавляют 1—2 капли гипосульфитной лейкобазы к объекту, который может находиться в физиологическом растворе поваренной соли.
Можно изготовить лейкобазы из метиленового синего, азура I, тионина, а также из толуидинового синего или яркого крезилового синего.
Для окраски можно употреблять также смеси двух лейкобаз, .например, метиленового синего и азура I.
Объектами окрашивания могут служить:
1) брыжейка белой мыши или лягушки; 2) кровь лягушки; 3) пленка .лука; 4) саркомные клетки опухоли крысы; 5) раковые клетки опухоли молочной железы человека; 6) клетки культуры ткани и т. д.
Предыдущая << 1 .. 22 23 24 25 26 27 < 28 > 29 30 31 32 33 34 .. 214 >> Следующая