Книги
чёрным по белому
Главное меню
Главная О нас Добавить материал Поиск по сайту Карта книг Карта сайта
Книги
Археология Архитектура Бизнес Биология Ветеринария Военная промышленность География Геология Гороскоп Дизайн Журналы Инженерия Информационные ресурсы Искусство История Компьютерная литература Криптология Кулинария Культура Лингвистика Математика Медицина Менеджмент Металлургия Минералогия Музыка Научная литература Нумизматика Образование Охота Педагогика Политика Промышленные производства Психология Путеводители Религия Рыбалка Садоводство Саморазвитие Семиотика Социология Спорт Столярное дело Строительство Техника Туризм Фантастика Физика Футурология Химия Художественная литература Экология Экономика Электроника Энергетика Этика Юриспруденция
Новые книги
Янин В.Л. "Новгородские акты XII-XV Хронологический комментарий" (История)

Майринк Г. "Белый доминиканец " (Художественная литература)

Хусаинов А. "Голоса вещей. Альманах том 2" (Художественная литература)

Петров Г.И. "Отлучение Льва Толстого " (Художественная литература)

Хусаинов А. "Голоса вещей. Альманах том 1 " (Художественная литература)
Реклама

Микроскопическая техника - Роскин Г.И.

Роскин Г.И., Левинсон Л.Б. Микроскопическая техника — М.: Советская наука, 1957. — 469 c.
Скачать (прямая ссылка): microskopicheskayatehnika1957.djvu
Предыдущая << 1 .. 29 30 31 32 33 34 < 35 > 36 37 38 39 40 41 .. 214 >> Следующая

Светофильтры ставятся на пути светового пучка между источником света и микроскопом.
Рис. 52. Приспособленке фотоаппарата типа «ФЭД» для микрофотографии.
91
В тех случаях, когда при съемке надо выявить отдельные участки препарата на окружающем фоне, следует употреблять светофильтры, пропускающие спектральные цвета, дополнительные к цвету, которым окрашены эти участки препарата. Для выявления деталей препарата, имеющего сплошную окраску, употребляют светофильтры, пропускающие спектральные цвета, близко стоящие к окраске препарата.
Во многих случаях в качестве светофильтра рекомендуется специальная смесь. Для ее приготовления в 1000 СЛ13 дистиллированной воды растворяют 115 г сернокислой меди и 11,5 г двухромовокислого калия; к указанному раствору осторожно добавляют 3 см3 серной кислоты, после чего фильтруют. При съемке с фильтром установку иа резкость и другие манипуляции производят со включенным фильтром.
В качестве негативного материала из сортов, имеющихся в продаже, можно указать на ортохроматические и панхроматические пластинки, дающие хорошее покрытие и имеющие довольно мелкое зерно. Для съемок малоконтрастных объектов можно пользоваться орторепродукционными пластинками. Хороших результатов можно также добиться на противоореольных пластинках или на панхроматической пленке.
Точное определение экспозиции — времени освещения, необходимого для получения нормального негатива, — очеиь важно и в то же время наиболее трудно достижимо при микрофотографировании. Это н понятно, так как экспозиция зависит от многих условий: от силы источника света, диаметра диафрагмы, плотности и окраски самого объекта, увеличения микроскопа и степени растяжения камеры. Из всего вышесказанного ясно, что п каждом отдельном случае экспозиция подбирается опытным путем.
Лучше всего на одну пластинку дать несколько экспозиций, вдвигая крышку кассеты каждый раз на 1 см. Таким образом, получив на одной пластинке ряд участков с разной экспозицией (например 1, 2, 3, 4, 5 н т. д. секунд), после проявления определяют, какая экспозиция дает лучший результат, и производят с ней съемку на целую пластинку.
РАЗДЕЛ ПЯТЫЙ
ФИКСАЦИЯ И ФИКСАТОРЫ
Все методы фиксации преследуют основную цель: убивая объект, сохранить его прижизненную структуру. Фиксировать — значит закреплять. Природа и динамика микроструктур не могут быть с достаточной полнотой и достоверностью изучены на фиксированном и обычными методами окрашенном препарате. Отсюда поиски новых методов прижизненного исследования клеток и тканей, позволяющих широко использовать эксперимент, — исследование в темном поле, флуоресцентная микроскопия, витальные окраски, микрохирургия, культура тканей и т. д. Все же нужно признать, что фиксированный препарат по-прежнему является основным объектом исследования, так как никакой другой метод не выявляет столь четко структуру, не дает возможности так детально проводить морфологический анализ клеток и тканей.
Некоторые исследователи пришли к поспешному выводу о том, что витальная микроскопия отменяет классическую микрогехнику с ее изучением фиксированного препарата. Это неверно. Наоборот, комбинация этих двух направлений — об этом говорит новейшая цитологическая и гистологическая литература — сулит новые и глубокие успехи в дапе изучения жизни клеток и тканей. Поэтому современный биолог-микроскопист работает, как правило, параллельно с фиксированными и с живыми объектами.
Надо также помнить, что методы прижизненного изучения не могут в настоящее время дать исчерпывающей картины строения клеток и тканей, так как составляющие их компоненты имеют весьма сходные коэффициенты преломления и в силу этого трудно отличимы друг от друга.
Фиксация, вызывая коагуляцию или преципитацию клеточного содержимого, тем самым изменяет более или менее резко коэффициенты преломления отдельных клеточных элементов. Таким образом, рационально проведенная фиксация, как правило, усиливает разницу в коэффициенте преломления отдельных частей и органоидов клетки и тем самым делает их более различимыми друг от друга.
93
Последующая же окраска еще резче выявляет различные клеточные компоненты.
Убить клетку и одновременно сохранить ее, насколько это возможно, в состоянии, в котором она находилась при жизни, — вот цель фиксации. Хорошая фиксация, как бы остановив процессы, текущие в клетке, сохраняет все составные части клетки и не вызывает образования новых структур. Быстрое и энергичное действие фиксаторов предохраняет объект от посмертных изменений, но само воздействие примененных реактивов не может не вызвать тех или иных изменений в клетках. Наилучшие фиксаторы действуют быстро, вызывают наименьшее изменение в тонких структурах и не затрудняют проведения последующей элективной окраски.
Фиксация должна, кроме того, «закреплять» ткань, делая ее более устойчивой и способной без заметной деформации перенести ряд последующих операций: обезвоживание, заливку, резку на микротоме. Большинство применяемых фиксаторов в достаточной, хотя и в разной степени, закрепляет объекты. Фиксаторы должны не только сохранять и закреплять клеточные структуры, но и переводить по возможности все компоненты клетки в нерастворимое состояние, при котором промывка в воде, пребывание в спиртах, просветляющих средах, красочных растворах не удаляло бы различных клеточных частей и тем самым не извращало бы коренным образом картину строения изучаемых тканей. Кроме того, хороший фиксатор не должен черни ;ь структуры, делать их хрупкими и ломкими, сморщивать ткани, а тем более вредным образом влиять на последующее окрашивание.
Предыдущая << 1 .. 29 30 31 32 33 34 < 35 > 36 37 38 39 40 41 .. 214 >> Следующая