Книги
чёрным по белому
Главное меню
Главная О нас Добавить материал Поиск по сайту Карта книг Карта сайта
Книги
Археология Архитектура Бизнес Биология Ветеринария Военная промышленность География Геология Гороскоп Дизайн Журналы Инженерия Информационные ресурсы Искусство История Компьютерная литература Криптология Кулинария Культура Лингвистика Математика Медицина Менеджмент Металлургия Минералогия Музыка Научная литература Нумизматика Образование Охота Педагогика Политика Промышленные производства Психология Путеводители Религия Рыбалка Садоводство Саморазвитие Семиотика Социология Спорт Столярное дело Строительство Техника Туризм Фантастика Физика Футурология Химия Художественная литература Экология Экономика Электроника Энергетика Этика Юриспруденция
Новые книги
Янин В.Л. "Новгородские акты XII-XV Хронологический комментарий" (История)

Майринк Г. "Белый доминиканец " (Художественная литература)

Хусаинов А. "Голоса вещей. Альманах том 2" (Художественная литература)

Петров Г.И. "Отлучение Льва Толстого " (Художественная литература)

Хусаинов А. "Голоса вещей. Альманах том 1 " (Художественная литература)
Реклама

Микроскопическая техника - Роскин Г.И.

Роскин Г.И., Левинсон Л.Б. Микроскопическая техника — М.: Советская наука, 1957. — 469 c.
Скачать (прямая ссылка): microskopicheskayatehnika1957.djvu
Предыдущая << 1 .. 31 32 33 34 35 36 < 37 > 38 39 40 41 42 43 .. 214 >> Следующая

Прогресс электронной микроскопии, исследования в фазовоконтрастном микроскопе позволили по-новому поставить изучение изменений, возникающих в живом веществе под влиянием фиксаторов: речь идет не только о сохранении основных тканевых или клеточных структур, но и об иммобилизации макромолекулярных структур. Поэтому понятие о фиксации имеет различный смысл в зависимости от тех величин, с которыми имеет дело исследователь. В тех случаях, когда исследователь изучает структуры, види-
96
мые в оптический микроскоп (т. е. до предела 0,2—0,1 и), то задачей фиксации, в первую очередь, является перевод в нерастворимое состояние различных составных частей структур: белков, липоидов, углеводов. Среди этих веществ одни находятся и в живой клетке в нерастворенном виде (иапример, склеропротеины, хитин и т. д.) и задача фиксации сводится только к сохранению формы этих образований. Сложнее дело обстоит с веществами, находящимися в растворенном состоянии. При фиксации необходимо их коагулировать или осадить, не вызывая заметных смещений или изменений такого порядка, которые были бы заметны в оптический микроскоп.
В области же субмикроскопических величин, т. е. в интервале
о
от 0,1 ц до 50А понятие фиксации имеет другой смысл, так как здесь идет речь об иммобилизации макромолекул живого вещества и сохранении их связей между собой, причем надо избежать как раздвигания, так и слипания макромолекул в кучеобразные новообразования и появления иовых связей между ними. Само собой разумеется, что задачи фиксации в этой области чрезвычайно сложны.
Возвращаясь снова к изменениям, вызываемым фиксатором в области величин, доступных изучению в обычном микроскопе, необходимо указать на одно весьма важное обстоятельство, играющее существенную роль: коагуляты растворенных протеинов практически (т. е. в условиях обычно изготовленных препаратов) мало заметны, если только не применена специальная окраска. Эти коагуляторы могут быть не видны на обычных микроскопических препаратах, но они тем не менее существуют, что доказывают наблюдения, проведенные с фазово-контрастным микроскопом (Поликар н сотрудники, 1952). При этом уместно напомнить, что существенным моментом гистологической техники всегда являлось стремление оставить бесцветным и тем самым и незаметным все, что не входит в задачи примененной микротехнической методики. В этом смысле примером может служить окрашивание железным гематоксилином.
При выборе фиксатора и оценке фиксированного препарата надо учитывать ряд моментов.
Под влиянием фиксаторов происходит изменение объема фиксируемого объекта. Наиболее часто оно заключается в сморщивании, реже наблюдается набухание объекта. Эти изменения зависят от характера примененных фиксирующих смесей и, в не-меныдей мере, от физико-химических свойств взятой ткани или органа. Последующая обработка — проводка через спирты, заливка в парафин изменяет величину объекта до 20—40% от исходной.
В большинстве фиксаторов входят кислоты и, в первую очередь, уксусная кислота; поэтому pH фиксатора имеет немаловажное значение. Считают, что pH фиксатора должен быть ниже изоэлек-трической точки тканевых протеинов, т. е. pH фиксатора, как правило,<4—4,5. Уксусная кислота не только фиксирует, но и под-
7 Микроскопическая техника 97
кисляет ткани, что является важным моментом для всего процесса фиксации, гак как большинство применяемых для фиксации реактивов способно интенсивно коагулировать и осаждать составные части ткани только в нейтральной или кислой, но не в щелочной среде.
Медленное проникновение фиксатора может обусловить значительные посмертные изменения глубоких слоев фиксируемой ткани.
л Коэффициент ИзмШное ШШа д Лоэффициент
проницаемости 8»процентат эластичности
Рис. 53. Коэффициент проницаемости ряда фиксирующих веществ (Л), изменение объема печеночной ткаии (Б) и эластичности (В) под влиянием различных фиксирующих веществ (по Бекеру, 1950):
Черные столбики—действие фиксатора, белые столбики — действие фиксатора и последующей обработки спиртом, заштрихованные столбики — действие фиксатора и последующей заливки п парафин.
Поэтому надо по возможности фиксировать кусочки незначительной толщины. Скорость проникновения фиксатора зависит от физико-химических свойств объекта, а эти свойства у одного и того же органа могут быть различны в зависимости от его функционального состояния, не говоря уже о возрастных или патологических изменениях.
Различная скорость диффузии компонентов фиксатора нередко приводит к тому, что разные зоны фиксируются различно. Так, при употреблении смеси Флемминга фиксирующее действие осмия проявляется только в поверхностно лежащих слоях, в глубокие
же слои проникает главным образом уксусная кислота. Подобные явления наиболее четко сказываются на фиксации тончайших клеточных структур.
Представление о скорости проникновения фиксаторов в ткань, об изменении ее объема при фиксации, а также об изменении эластичности ткани при фиксации дают рис. 53, 54 и табл. IV (приложение) .
Предыдущая << 1 .. 31 32 33 34 35 36 < 37 > 38 39 40 41 42 43 .. 214 >> Следующая