Книги
чёрным по белому
Главное меню
Главная О нас Добавить материал Поиск по сайту Карта книг Карта сайта
Книги
Археология Архитектура Бизнес Биология Ветеринария Военная промышленность География Геология Гороскоп Дизайн Журналы Инженерия Информационные ресурсы Искусство История Компьютерная литература Криптология Кулинария Культура Лингвистика Математика Медицина Менеджмент Металлургия Минералогия Музыка Научная литература Нумизматика Образование Охота Педагогика Политика Промышленные производства Психология Путеводители Религия Рыбалка Садоводство Саморазвитие Семиотика Социология Спорт Столярное дело Строительство Техника Туризм Фантастика Физика Футурология Химия Художественная литература Экология Экономика Электроника Энергетика Этика Юриспруденция
Новые книги
Янин В.Л. "Новгородские акты XII-XV Хронологический комментарий" (История)

Майринк Г. "Белый доминиканец " (Художественная литература)

Хусаинов А. "Голоса вещей. Альманах том 2" (Художественная литература)

Петров Г.И. "Отлучение Льва Толстого " (Художественная литература)

Хусаинов А. "Голоса вещей. Альманах том 1 " (Художественная литература)
Реклама

Микроскопическая техника - Роскин Г.И.

Роскин Г.И., Левинсон Л.Б. Микроскопическая техника — М.: Советская наука, 1957. — 469 c.
Скачать (прямая ссылка): microskopicheskayatehnika1957.djvu
Предыдущая << 1 .. 34 35 36 37 38 39 < 40 > 41 42 43 44 45 46 .. 214 >> Следующая

102
называют, что все липоиды постепенно уменьшаются в тканях, фиксированных формалином, так как имеющаяся в клетках липаза не разрушается этим фиксатором.
Формалин не является фиксатором для углеводов, но консервирует протеины таким образом, что гликоген удерживается ими и не легко растворяется водой.
Формалин не сокращает ткани, но наблюдается последующее значительное сокращение их в абсолютном алкоголе и парафине.
Поскольку формалин нейтрализует основные группы, он делает протеины более кислыми, чем, например, после фиксации спиртом; в результате протеины, фиксированные формалином, имеют особое средство к основным красителям. Одновременно протеины в значительной мере утрачивают свое сродство к кислотным красителям, хотя все же ие настолько, чтобы перестать окрашиваться.
При какой бы температуре и концентрации и как долго не действовал бы формальдегид, — всегда остаются некоторые свободные аминогруппы и возможно, что они обеспечивают сохранение известного сродства к кислым красителям.
Не выяснено, почему ткани, фиксированные формалином, плохо окрашиваются кармином. Физико-химические сдвиги, вызываемые формалином, производят известные изменения и в микроскопических структурах. Эти изменения были в последнее время изучены с помощью фазово-контрастного микроскопа (Поликар, 1952). При использовании 5-процентного формалина наблюдается начальный короткий период сжатия, после чего происходит снова увеличение объема клетки и затем вторичное сжатие. 10-процент-ный формалин вызывает вначале большее сжатие, но последующее набухание бывает незначительным или полностью отсутствует. Под влиянием формалина может происходить образование особых пузыревидных тел, которые появляются в клетках а затем могут из них выделяться, создавая картину «загадочных шаровидных новообразований», лежащих рядом или на некотором расстоянии от клеток.
При фиксации формалином изменения ядра протекают, примерно, параллельно изменениям всей клетки. При набухании нуклеоплазма становится более гомогенной, причем скопления хроматина (например, в ядрах сперматогоиий) сильно набухают и перестают быть видимыми. При длительной фиксации, когда наблюдается вторичное сжатие клетки, предсуществовавшие внут-риядрные сгущения становятся более плотными, а в первоначально гомогенных областях ядра появляются новые сгущения. Кроме того в ядре под влиянием фиксатора могут образовываться «шаровидные белковые тела», иногда выделяющиеся в цитоплазму. Формалин также вызывает определенные изменения и в цитоплазме. Как правило, после длительной фиксации можно наблюдать появление в гомогенной цитоплазме зернистых и сет-
103
чатых структур. При более концентрированных растворах формалина в ней появляются светлые вакуоли.
Для фиксации наиболее употребительны два разведения формалина: 1 часть формалина и 4 части воды (20-процентпый раствор), либо 1 часть формалина и 9 частей воды (10-процентный раствор); для низших позвоночных и некоторых беспозвоночных лучше к последней смеси добавлять 1 часть уксусной кислоты.
Этот способ хорош для получения гистологических препаратов, имеющих целью дать общую картину строения объекта. После фиксации объект можно перенести непосредственно в 80-градусный спирт.
Формалин сравнительно быстро проникает в ткань; поэтому им можно фиксировать как маленькие, так и довольно большие кусочки (до 0,5 см толщиной). Если толщина кусочков больше,— лучше их надрезать бритвой для более быстрого проникновения фиксатора в ткань. Время фиксации формалином зависит от величины кусочка. Не слишком большие кусочки достаточно фиксировать 24 часа.
В формалине фиксированные кусочки можно хранить долго (месяцами). Обычно материал фиксируют в 20-процентном формалине, а затем переносят в 10-процентный. Фиксированный в формалине материал после основательной промывки в проточной воде режут на замораживающем микротоме. После фиксации в формалине иногда в тканях образуются мелкие бурые зерна. Для удаления их можно применить метод Девицкого; срезы обрабатывают несколько минут перекисью водорода; если зерна не исчезают, повторяют обработку более крепким раствором перекиси водорода и несколько удлиняют время обработки.
Формалин часто употребляется для фиксации при изготовлении тотальных препаратов, а также для фиксации планктона. В последнем случае к улову прибавляют 'Д или '/б неразведен-ного формалина; спустя 24 часа раствор разводят таким же количеством морской или пресной воды, так как иначе объекты слишком уплотняются.
Формалин часто употребляют для фиксации тканей, содержащих жировые вещества.
Можно рекомендовать 5-процентный формалин (1 часть формалина, 19 частей воды) для фиксации легкого, 10-процентный — для фиксации мускулатуры; часто указывают, что формалин неудовлетворительно фиксирует соединительную ткань, которая при этом сильно набухает.
Лучшей прописью формалинового фиксатора, по-видимому, является формол-кальций по Бекеру:
формалин—10 см3, 10-процентный хлористый кальций (безводный) — 10 см3, дистиллированная вода —80 см3.
Предыдущая << 1 .. 34 35 36 37 38 39 < 40 > 41 42 43 44 45 46 .. 214 >> Следующая