Книги
чёрным по белому
Главное меню
Главная О нас Добавить материал Поиск по сайту Карта книг Карта сайта
Книги
Археология Архитектура Бизнес Биология Ветеринария Военная промышленность География Геология Гороскоп Дизайн Журналы Инженерия Информационные ресурсы Искусство История Компьютерная литература Криптология Кулинария Культура Лингвистика Математика Медицина Менеджмент Металлургия Минералогия Музыка Научная литература Нумизматика Образование Охота Педагогика Политика Промышленные производства Психология Путеводители Религия Рыбалка Садоводство Саморазвитие Семиотика Социология Спорт Столярное дело Строительство Техника Туризм Фантастика Физика Футурология Химия Художественная литература Экология Экономика Электроника Энергетика Этика Юриспруденция
Новые книги
Янин В.Л. "Новгородские акты XII-XV Хронологический комментарий" (История)

Майринк Г. "Белый доминиканец " (Художественная литература)

Хусаинов А. "Голоса вещей. Альманах том 2" (Художественная литература)

Петров Г.И. "Отлучение Льва Толстого " (Художественная литература)

Хусаинов А. "Голоса вещей. Альманах том 1 " (Художественная литература)
Реклама

Микроскопическая техника - Роскин Г.И.

Роскин Г.И., Левинсон Л.Б. Микроскопическая техника — М.: Советская наука, 1957. — 469 c.
Скачать (прямая ссылка): microskopicheskayatehnika1957.djvu
Предыдущая << 1 .. 37 38 39 40 41 42 < 43 > 44 45 46 47 48 49 .. 214 >> Следующая

Хромовая кислота является единственным из применяемых в цитологии веществом, которое действительно фиксирует гликоген, т. е. делает его нерастворимым в воде.
Считают, что хромовая кислота проникает в ткани медленно. Она не сильно сокращает ткани, которые, однако, могут значительно уменьшиться в объеме при последующей обработке.
Промывка после хромовой кислоты имеет важное значение, так как если она не проведена достаточно тщательно, то появляются осадки и ткани будут весьма трудно окрашиваться. Кусочки, обычно используемые в гистологии, достаточно промывать в течение 12 часов в проточной воде. Если ткани перенести непосредственно из хромовой кислоты в алкоголь, то образуется нерастворимый осадок. После обработки хромовой кислотой ткани легко окрашиваются основными красителями, ио плохо — кармином.
Ткани, фиксированные хромовой кислотой, не следует подвергать влиянию яркого света, так как это ухудшает результаты фиксации.
Под действием хромовой кислоты, применяемой в отдельности, в большинстве случаев, как в ядрах, так и в цитопдазме образуется обильный плотный осадок. Тем ие менее хромовая кислота является ценной составной частью фиксирующих смесей. Она проникает примерно с такой же скоростью, как четырех-окисный осмий. Хромовая кислота придает тканям лучшую консистенцию для заливки в парафин и обеспечивает лучшее окрашивание тканей. В то же время оиа в смесях допускает консервацию осмием митохондрий и элементов Гольджи и не мешает достаточно гомогенной фиксации цитоплазмы и покоящихся ядер.
Двухромовокислый калий растворим в воде примерно на 12 процентов. Водные растворы его слабо кислотны. Он является сильно окисляющим агентом, ио все же слабее, чем хромовая кислота. Его не следует смешивать с алкоголем, в смеси с формальдегидом ои нестоек.
1 Те фиксаторы, в которых применяются одновременно хромовая кислота и формалин (например, Санфеличе), готовятся непосредственна перед употреблением.
109
I
Двухромовокислый калий делает альбумин нерастворимым, но не осаждает его; в этом отношении он напоминает четырех-окисный осмий. Двухромовокислый калий медленно изменяет протеины так, что они становятся нерастворимыми в воде и не дают уже затем плотного губчатого осадка под влиянием алкоголя. Гомогенность цитоплазмы сохраняется. Недостатком бихромата калия является то, что он растворяет хроматин, и его пе следует применять для фиксации хромосом (если только он не подкислен).
Бихромат калия фиксирует двумя совершенно различными способами в зависимости от того, подкислен он или нет. При pH ниже, чем 4,6, он фиксирует как хромовая кислота. При меньшей кислотности он фиксирует совершенно по-другому (фактически критический pH варьирует между pH 4,2 и 5,2).
При большей кислотности хромосомы сохраняются хорошо, цитоплазма н хроматин осаждаются в виде сетки, а митохондрии не сохраняются. Когда кислотность меньше критической цифры, — хромосомы растворяются, хроматиновая сетка не появляется, цитоплазма гомогенна и прекрасно сохраняется, а митохондрии хорошо фиксируются.
Одним из наиболее важных для цитологии свойств двухромовокислого калия является его сильное фиксирующее действие на многие липоиды. Жиры не подвергаются его воздействию, но липоиды становятся нерастворимыми в липоидных растворителях. Это действие, гораздо более сильное, чем действие формальдегида, делает бихромат калия весьма полезным при изучении митохондрий. Реакция, по-видимому, не является простым окислением, так как хромовая кислота не сохраняет митохондрий, хотя она и является сильным окислителем.
Двухромовокислый калий не фиксирует углеводов.
Фиксированный двухромовокислым калием материал следует отмывать в течение 12 часов в проточной воде. После этого фиксатора окрашивание кислыми красителями идет хорошо, но хроматин окрашивается только в том случае, если к фиксатору добавляется вещество, осаждающее нуклеиновую кислоту. При этом бихромат не мешает окрашиванию.
Двухромовокислый калий служит прекрасным фиксатором1 клетки в целом (не считая хроматина), и в особенности — митохондрий. Он сохраняет цитоплазму в состоянии, сходном с прижизненным. Ткани часто погружают в него после фиксации с целью сохранить липоиды, в особенности при изучении митохондрий. Это «последующее хромирование» удобно производить посредством насыщенного раствора в термостате при 37° С. Процесс не должен быть слишком длительным (оптимальным сроком считается два дня), так как иначе митохондрии будет трудно окрасить.
В известной мере К2СГ2О7 предотвращает влияние заливки, в парафин: объем тканей при этом мало меняется.
110
Из фиксаторов, содержащих хромовую кислоту, следует отметить жидкость Санфеличе: 1-процентной хромовой кислоты — 160 см3, формалина — 80 см3. Фиксировать 24 часа, промывать в проточной воде 48 часов.
Хорошие результаты при фиксации морских животных дает смесь С. Г. Навашина: 1-процентной хромовой кислоты 10 см3, формалина 4 см3, уксусной кислоты 1 см3-, фиксировать 12— 24 часа, промывать проточной водой 24 часа.
Предыдущая << 1 .. 37 38 39 40 41 42 < 43 > 44 45 46 47 48 49 .. 214 >> Следующая