Книги
чёрным по белому
Главное меню
Главная О нас Добавить материал Поиск по сайту Карта книг Карта сайта
Книги
Археология Архитектура Бизнес Биология Ветеринария Военная промышленность География Геология Гороскоп Дизайн Журналы Инженерия Информационные ресурсы Искусство История Компьютерная литература Криптология Кулинария Культура Лингвистика Математика Медицина Менеджмент Металлургия Минералогия Музыка Научная литература Нумизматика Образование Охота Педагогика Политика Промышленные производства Психология Путеводители Религия Рыбалка Садоводство Саморазвитие Семиотика Социология Спорт Столярное дело Строительство Техника Туризм Фантастика Физика Футурология Химия Художественная литература Экология Экономика Электроника Энергетика Этика Юриспруденция
Новые книги
Янин В.Л. "Новгородские акты XII-XV Хронологический комментарий" (История)

Майринк Г. "Белый доминиканец " (Художественная литература)

Хусаинов А. "Голоса вещей. Альманах том 2" (Художественная литература)

Петров Г.И. "Отлучение Льва Толстого " (Художественная литература)

Хусаинов А. "Голоса вещей. Альманах том 1 " (Художественная литература)
Реклама

Микроскопическая техника - Роскин Г.И.

Роскин Г.И., Левинсон Л.Б. Микроскопическая техника — М.: Советская наука, 1957. — 469 c.
Скачать (прямая ссылка): microskopicheskayatehnika1957.djvu
Предыдущая << 1 .. 40 41 42 43 44 45 < 46 > 47 48 49 50 51 52 .. 214 >> Следующая

Пикриновая кислота и фиксаторы, содержащие пикриновую кислоту
Пикри новая кислота представляет собою желтое кристаллическое твердое вещество. Растворимость ее в воде колеблется от 0,9% до 1,2%, в зависимости от температуры. Она растворима также в алкоголе, бензоле и ксилоле; горит спокойно, но от детонации дает* сильный взрыв. Не растирать сухую
114
пикриновую кислоту в ступке, опасаться взрыва. Во избежание несчастных случаев ее всегда держат смочеииой водой; в этом состоянии она совершенно безопасна.
Пикриновая кислота дает осадки с альбумином, глобулином, гистоном и иуклеииовой кислотой; последний растворим в воде, остальные — нерастворимы.
Считают, что она дает с протеинами химические соединения-, протеино-пикраты.
Фиксация пикриновой кислотой ие защищает протеины от пе-реваривания пепсином или трипсином и, по-видимому, не влияет на липоиды, но мешает фиксирующему действию бихромата калия. Она не фиксирует углеводы, однако, очевидно, осаждает протеины в такой форме, которая противодействует растворению гликогена в воде.
Существует общее мнение, что пикриновая кислота в ткани проникает медленно.
Пикриновая кислота ие только резко сокращает ткани, ио и оставляет их в таком состояния, что они испытывают дальнейшее сокращение при последующей обработке. Сокращение, вызываемое пикриновой кислотой, не сопровождается затвердением.
Пикриновую кислоту отмывают в 70—80- или 96-градусном спирте. Обычно утверждают, что пикриновую кислоту ни в коем случае не следует отмывать водой, но это основано на ошибочном представлении о растворимости пикрата альбумина.
Вообще особой отмывки пикриновой кислоты не требуется, так как ее избыток извлекается в процессе обезвоживания объекта и желтый цвет сам по себе не вреден и не мешает последующему окрашиванию объекта. После фиксации пикриновой кислотой объект легко окрашивается. Количество свободной пикриновой кислоты, остающейся в тканях, незначительно, поскольку она экстрагируется большинством обычно применяемые растворителей (вода, алкоголь, бензол, ксилол). Для устранения желтого- окрашивания фиксированного материала рекомендуется промывка в водном растворе углекислого лития.
Пикриновая кислота, как осаждающая белки, рекомендуется для использования в смесях с другими фиксаторами, в особенности, когда необходимо избежать затвердения объекта. При применении в отдельности она слишком сокращает ткани. Кроме того, под влиянием чистой пикриновой кислоты маленькие жировые капли в клетках сливаются в более круп-ные капли, вероятно в связи с изменениями цитоплазмы, нитевидные митохондрии образуют нечеткие ряды зерен, а в прижизненно гомогенных ядрах могут возникать губчатые структуры и хроматин выявляется в виде комочков. Поэтому чистая пикриновая кислота не применяется для фиксирования, но она входит в состав большого числа фиксирующих смесей.
Смеси с насыщенным водным раствором пикриновой кислоты применимы в разнообразных случаях и дают прекрасные резуль-
8*
П5
тэты. Насыщенный раствор пикриновой кислоты получается при растворении 25—30 г пикриновой кислоты в 1 л горячей воды. Выпадающие снова после остывания и оседающие на дно кристаллы этой кислоты следует оставлять в виде осадка на дне сосуда. После применения пикриновых смесей обычно не удается заливка в целлоидин. Поэтому лучше для целлоидиновой заливки фиксировать другими смесями.
Смесь Буэна. Этот превосходный фиксатор применяется в гистологической технике для самых разнообразных целей. Состав: насыщенного водного раствора пикриновой кислоты— 15 частей, формалина —5 частей, уксусной кислоты —1 часть. Фиксация длится не мепее 2 часов. Большое преимущество этой смеси, особенно в экскурсиях и экспедициях, состоит в том, что объекты можно дни и даже месяцы оставлять в этом фиксаторе без заметного для них вреда. Фиксированные объекты промывают в 70— 80-градусном спирте, сменяя его 2—3 раза. Объекты, фиксированные в смеси Буэна, иногда крошатся после заливки в целлоидин.
Смесь Буэна отлично фиксирует эпителиальные ткани, хорошо фиксирует различные железы и не всегда удачно — мускульную ткань.
Дюбоск и Бразиль предложили модификацию смеси Буэна, пригодную как для фиксации влажных мазков, так и для фиксации труднопроницаемых объектов (например, членистоногих): пикриновой кислоты— 1 г, 80-градусного спирта— 150 см3.
Непосредственно перед употреблением к этому раствору добавляют 60 см3 формалина и 15 сма уксусной кислоты. Фиксируют
1—3 дня. Для очень мелких объектов достаточно 30 минут. После фиксации объект переносят непосредственно в 90-градусный спирт.
Не раз приходилось отмечать, что прибавление двухромовокислого калия к смеси Буэна — Бразиля улучшает фиксацию плазмы:
12-процентного двухромовокислого калия 1 часть, формалина нейтрального 1 часть, 95-градусного спирта 2 части, насыщенного' раствора пикриновой кислоты в 25-процентной уксусной кислоте
1 часть.
Фиксируют в течение 2 дней, затем объект переносят еще на
2 дня в смесь, извлекающую пикриновую кислоту:
Предыдущая << 1 .. 40 41 42 43 44 45 < 46 > 47 48 49 50 51 52 .. 214 >> Следующая