Книги
чёрным по белому
Главное меню
Главная О нас Добавить материал Поиск по сайту Карта книг Карта сайта
Книги
Археология Архитектура Бизнес Биология Ветеринария Военная промышленность География Геология Гороскоп Дизайн Журналы Инженерия Информационные ресурсы Искусство История Компьютерная литература Криптология Кулинария Культура Лингвистика Математика Медицина Менеджмент Металлургия Минералогия Музыка Научная литература Нумизматика Образование Охота Педагогика Политика Промышленные производства Психология Путеводители Религия Рыбалка Садоводство Саморазвитие Семиотика Социология Спорт Столярное дело Строительство Техника Туризм Фантастика Физика Футурология Химия Художественная литература Экология Экономика Электроника Энергетика Этика Юриспруденция
Новые книги
Янин В.Л. "Новгородские акты XII-XV Хронологический комментарий" (История)

Майринк Г. "Белый доминиканец " (Художественная литература)

Хусаинов А. "Голоса вещей. Альманах том 2" (Художественная литература)

Петров Г.И. "Отлучение Льва Толстого " (Художественная литература)

Хусаинов А. "Голоса вещей. Альманах том 1 " (Художественная литература)
Реклама

Микроскопическая техника - Роскин Г.И.

Роскин Г.И., Левинсон Л.Б. Микроскопическая техника — М.: Советская наука, 1957. — 469 c.
Скачать (прямая ссылка): microskopicheskayatehnika1957.djvu
Предыдущая << 1 .. 41 42 43 44 45 46 < 47 > 48 49 50 51 52 53 .. 214 >> Следующая

70-градусного спирта—100 см3, уксуснокислого аммония — 10 е. .
СмесьБуэна — Аллена: насыщенного водного раствора пикриновой кислоты — 75 см3, формалина (хим. чистого)— 25 см3, уксусной кислоты — 5 см3. Перед фиксацией смесь нагревают до 38° и при постоянном взбалтывании растворяют в ней 1,5 г кристаллов хромовой кислоты (хим. чистой), а затем добавляют 2 <г кристаллической мочевины. Полученная смесь должна иметь тем-ио-коричневый цвет и быть совершенно прозрачной. Появление зеленых оттенков показывает, что хромовая кислота недостаточно чистая, и что фиксатором нельзя пользоваться.
116
Смесь надо готовить непосредственно перед употреблением, так как она быстро портится. Для фиксации смесь должна быть нагрета до 37—38й.
Смесь Буэна — Аллена применяется для кариологических исследований и особенно для изучения хромосом. Кусочки семенников молодых животных (толщиной не более 0,5 см) фиксируют
2—3 часа, после чего дают смеси остыть до комнатной температуры н переносят материал в 70-градусный спирт.
Смесь в а н-Л е е у в е н а: 1-процентного раствора пикриновой кислоты в абсолютном спирте — 24 см3, хлороформа — 4 cms, формалина — 4 см3.
Перед употреблением добавляют 2 см’> ледяной уксусной кислоты. Фиксируют 24 часа, затем промывают в 90-градусном спирте. Фиксатор специально рекомендуется для объектов, имеющих хитиновые покровы.
Модификация Г. И. Роскин а. Насыщенного водного раствора пикриновой кислоты — 30 частей, формалина—10 частей, 1-процентного трихлоруксусной кислоты — 2 части.
Трихлоруксусную кислоту прибавляют непосредственно перед фиксацией. При этой фиксации особенно хорошо сохраняются плазматические структуры, внутриклеточные фибриллы, фибриллы мускульных клеток, центросомный аппарат. В некоторых' объектах хорошо фиксируются и митохондрии. Продолжительность фиксации 12—24 часа. Затем объект переносят для промывки в 80—90-градусный спирт.
Сулема и сулемовые смеси
Сильное осаждающее действие растворов сулемы на белки показано в многочисленных опытах. Сулема дает осадки с альбумином, глобулином и нуклеиновой кислотой; все они нерастворимы в воде. В литературе есть указания, что сулема образует соединения с аминокислотами, присоединяясь к группе NH2.
Сулема образует дополнительные соединения с некоторыми липоидами, но растворимость этих соединений в жидкостях, применяемых в цитологической технике, слабо изучена, и сулему едва ли можно назвать фиксатором липоидов. Возможно, что некоторые липоиды она разрушает. Сулема не фиксирует н не разрушает углеводы.
Считается, что сулема проникает в ткани со средней или большой скоростью и сокращает их меньше, чем какое-либо другое из веществ, осаждающих протеин. Наблюдается значительное последующее сокращение материала в алкоголе и парафине, но окончательное уменьшение объема все же меньше, чем при применении других фиксаторов.
Сулема вызывает значительное затвердение тканей, и в этом отношении ее превосходят только алкоголь и формальдегид. При
117
последующей обработке объекта алкоголем наблюдается его дополнительное затвердевание.
Выдающейся особенностью сулемы как фиксатора является ее благоприятное влияние на окрашивание. Все красители, включая кармин, хорошо окрашивают после нее. Сулема непригодна для использования в отдельности, ввиду сильного осаждения ею белков. Под действием сулемы как в ядрах, так и в цитоплазме образуется грубый осадок, а жировые капельки сливаются в массы неправильной формы; однако, митохондрии не разрушаются, и поэтому сулему ьключают в число фиксаторов для митохондрий и для элементов Гольджи.
При растворении в воде сулема частично гидролизуется. Насыщенный раствор имеет pH = 3,2. В воде растворяется около 7% сулемы, а в алкоголе примерно в 5 раз больше. Она более растворима в растворах хлористого натрия, нежели в воде, а именно 8 0,75% хлористого натрия растворяется около 10%.
Насыщенный водный раствор сулемы — главная составная часть ряда очень употребительных фиксирующих смесей. Для его приготовления надо вскипятить 1 л дистиллированной воды и растворить в нем 70 е сулемы. Кристаллы, вновь выпадающие после остывания раствора, оставляют лежать на дне склянки. Прибавлением поваренной соли можно повысить концентрацию сулемы в растворе.
Все металлические инструменты (ножницы, иглы, пинцеты) надо беречь от сулемы. Работают поэтому роговыми, стеклянными, деревянными инструментами или изготовляют из тонкого картона узкие полоски, которые употребляют как шпатели для переноски препаратов, и потом выбрасывают.
Для растягивания мембран употребляют вместо металлических иголок деревянные.
Сулема — сильный яд и при работе с ней надо соблюдать должную осторожность.
Рекомендуется фиксировать в сулеме не очень большие кусочки: она не всегда проникает достаточно глубоко. Фиксируют
не дольше, чем это необходимо для полного проникновения фиксатора, и затем удаляют сулему сначала в 70-градусном спирте, затем в спиртовом растворе иода (к 60 см3 70-градусного спирта прибавляют 1 см3 10-процентной йодной тинктуры и 10 см3 раствора Люголя), который перестает обесцвечиваться, как только вся сулема удалена. При некоторых способах окрашивания присутствие иода может мешать, поэтому его.отмывают из кусочков, промывая объект в 70-градусном спирте, или же удаляют из срезов, окуная предметное стекло со срезами в 0,25-процентиый водный раствор гипосульфита.
Предыдущая << 1 .. 41 42 43 44 45 46 < 47 > 48 49 50 51 52 53 .. 214 >> Следующая