Книги
чёрным по белому
Главное меню
Главная О нас Добавить материал Поиск по сайту Карта книг Карта сайта
Книги
Археология Архитектура Бизнес Биология Ветеринария Военная промышленность География Геология Гороскоп Дизайн Журналы Инженерия Информационные ресурсы Искусство История Компьютерная литература Криптология Кулинария Культура Лингвистика Математика Медицина Менеджмент Металлургия Минералогия Музыка Научная литература Нумизматика Образование Охота Педагогика Политика Промышленные производства Психология Путеводители Религия Рыбалка Садоводство Саморазвитие Семиотика Социология Спорт Столярное дело Строительство Техника Туризм Фантастика Физика Футурология Химия Художественная литература Экология Экономика Электроника Энергетика Этика Юриспруденция
Новые книги
Янин В.Л. "Новгородские акты XII-XV Хронологический комментарий" (История)

Майринк Г. "Белый доминиканец " (Художественная литература)

Хусаинов А. "Голоса вещей. Альманах том 2" (Художественная литература)

Петров Г.И. "Отлучение Льва Толстого " (Художественная литература)

Хусаинов А. "Голоса вещей. Альманах том 1 " (Художественная литература)
Реклама

Микроскопическая техника - Роскин Г.И.

Роскин Г.И., Левинсон Л.Б. Микроскопическая техника — М.: Советская наука, 1957. — 469 c.
Скачать (прямая ссылка): microskopicheskayatehnika1957.djvu
Предыдущая << 1 .. 50 51 52 53 54 55 < 56 > 57 58 59 60 61 62 .. 214 >> Следующая

К недостаткам метода надо отнести его длительность, трудность изготовления серийных срезов, относительную трудность наклейки срезов и, наконец, большую толщину получаемых срезов по сравнению с парафиновыми. Следует также подчеркнуть, что целлоидиновая заливка требует применения полностью безводных реактивов, а объекты должны быть безукоризненно обезвожены.
Заливку в целлоидин применяют:
1) для объектов, имеющих большие полости или лакуны;
2) для объектов, имеющих слон различной консистенции (например, членистоногие);
3) для объектов больших размеров, с которых трудно получить хорошие парафиновые срезы;
4) для изготовления толстых срезов, необходимых для специальных целей.
Преимущества обоих способов — целлоидиновой и парафиновой заливки — скомбинированы в целлоидин-парафиновом методе, при котором объект сперва заливается в целлоидин, а затем заключается в парафин.
Заливка в желатину применяется для рыхлых и легко распадающихся тканей, подготовляемых для резки на замораживающем микротоме, а также при изучении жировых и липоидных включений, не переносящих действия спиртов, ксилола и т. д. При заливке в желатину происходит минимальное изменение объема объекта, что особо важно при изучении интерцеллюлярных пространств, рыхлой соединительной ткани и т. д.
Заливка в парафин
То, что обычно называют парафином, представляет собой, как известно, смесь (в различных пропорциях) разных гомологичных парафиновых углеводородов. Продажные смеси различаются по их точкам плавления, а химический состав их различен в зависимости от условий получения парафипа.
С точки зрения гистологической техники, условия затвердения парафина при заливке объекта весьма важны. Когда расплавленный парафин начинает застывать, то в определенный момент на его поверхности возникает пленка в виде хлопьевидного облака1,,
137
а затем начинают образовываться кристаллы, из которых состоит
твердый парафин. Это изменение состояния парафина влечет за собою уменьшение его объема приблизительно на 5—10%, что обусловливает константные деформации заделанной в парафин ткани. Перед исследователями стоит важная задача: получить парафиновые смеси, дающие минимальную деформацию объекта.
Кристаллы парафина имеют форму пластинок или игл более или менее тонких, в зависимости от охлаждения. Чем охлаждение медленнее, тем тоньше кристаллы. Кристаллы, выпадающие в тканевых пространствах при заключении объекта в парафин, не оказывают деформирующего влияния, поскольку они слишком малы для этого.
Следующая таблица дает % растворения парафина (при температуре 50° в граммах на 100 г растворителя):
тслуол . . . :........... 25,0 кедре вге масло.......... 3,8
бензол...................21,5 диоксан.................. 0,2
ксилсл............ .... 20,8 бутиловый спирт . . . . 0,2
хлороформ................25,0
Когда парафин начинает затвердевать — он непрозрачен, затем он становится прозрачным, с блестящей поверхностью. В этот момент сжатие парафина прекращается.
Обычно считают, что чем быстрее охлаждение и затвердение парафина, тем меньше кристаллы и лучше проходит микротоми-рование. Однако на самом деле неизвестно, какие кристаллы лучше для микротомирования: мелкие или крупные. Здесь, по-видимо-му, играет роль связь кристаллов между собою. Если они лежат в достаточной мере плотно, то парафин становится прозрачным и гомогенным и легко режется па микротоме.
Весьма важную роль в застывании парафина играет растворенный в нем воздух. При охлаждении определенного объема парафина сперва затвердевает его поверхностный слой. Поскольку растворимость воздуха в застывающем парафине снижена — в месте соприкосновения жидкого парафина и затвердевающего слоя выделяется воздух. Часть этого воздуха снова растворяется в более теплой и еще жидкой центральной массе, а другая часть остается в газообразном состоянии между кристаллами парафина. Таким образом могут создаваться полости, заполненные воздухом. Это обусловливает зернистый вид в центре блока после его затвердевания.
Чтобы избежать подобной грануляции парафина в ходе заделки объекта, можно применять различные средства. Небольшие кусочки ткани (2—3 мм) можно заделывать на часовом стекле в малом количестве парафина, который медленно наливают пипеткой. В таких количествах парафина грануляция не играет существенной роли. При более крупных объектах хорошие результаты получаются, если объекты заливать в глубоком и узком сосуде, так чтобы затвердевание парафина начиналось в глубине и
138
постепенно распространялось бы кверху на жидкую еще поверхность. Освобождающийся при застывании парафина воздух выделяется тогда на поверхности. Пользуясь удлиненными сосудами, можно заделывать в парафин довольно крупные объекты.
Для заливки в парафин объект необходимо сперва обезводить, затем провести через промежуточную среду, растворимую как в парафине, так и в спирте. Таким образом, в процессе заливки объекта в парафин имеется четыре основные этапа: 1) обезвоживание спиртом; 2) пропитывание промежуточной средой (ксилол, толуол, бензол и т.д.); 3) пропитывание парафином; 4) окончательное заключение в парафин.
Предыдущая << 1 .. 50 51 52 53 54 55 < 56 > 57 58 59 60 61 62 .. 214 >> Следующая