Книги
чёрным по белому
Главное меню
Главная О нас Добавить материал Поиск по сайту Карта книг Карта сайта
Книги
Археология Архитектура Бизнес Биология Ветеринария Военная промышленность География Геология Гороскоп Дизайн Журналы Инженерия Информационные ресурсы Искусство История Компьютерная литература Криптология Кулинария Культура Лингвистика Математика Медицина Менеджмент Металлургия Минералогия Музыка Научная литература Нумизматика Образование Охота Педагогика Политика Промышленные производства Психология Путеводители Религия Рыбалка Садоводство Саморазвитие Семиотика Социология Спорт Столярное дело Строительство Техника Туризм Фантастика Физика Футурология Химия Художественная литература Экология Экономика Электроника Энергетика Этика Юриспруденция
Новые книги
Янин В.Л. "Новгородские акты XII-XV Хронологический комментарий" (История)

Майринк Г. "Белый доминиканец " (Художественная литература)

Хусаинов А. "Голоса вещей. Альманах том 2" (Художественная литература)

Петров Г.И. "Отлучение Льва Толстого " (Художественная литература)

Хусаинов А. "Голоса вещей. Альманах том 1 " (Художественная литература)
Реклама

Микроскопическая техника - Роскин Г.И.

Роскин Г.И., Левинсон Л.Б. Микроскопическая техника — М.: Советская наука, 1957. — 469 c.
Скачать (прямая ссылка): microskopicheskayatehnika1957.djvu
Предыдущая << 1 .. 51 52 53 54 55 56 < 57 > 58 59 60 61 62 63 .. 214 >> Следующая

Для обезвоживания объекта после фиксации и промывки его проводят через ряд спиртов восходящей концентрации. Чем нежнее объект и чем больше опасность его сжатия или сморщивания, тем осторожнее и постепеннее надо повышать концентрацию спирта. Обычно приготовляют ряд спиртов: 40-, 70-, 96- и 100-градусный (абсолютный) спирт. Если объект очень нежен и в нем необходимо сохранить тончайшие цитологические детали, то его последовательно проводят через следующий ряд спиртов: 40-, 50-, 60-, 70-, 80-, 90-, 96- и 100-градусный спирт. Обезвоживание и пропитывание в промежуточных средах и парафине лучше всего производить в небольших стеклянных цилиндриках с хорошо притертой пробкой, в которые наливают столько спирта, чтобы его уровень был выше объекта по крайней мере иа 1—2 см. Спирты не следует слишком долго употреблять, так как они загрязняются веществами, извлекаемыми из объектов. Время пребывания в спиртах в первую очередь определяется размерами объекта. Для очень маленьких объектов бывает достаточно пребывание по
25—30 минут в каждом из спиртов. Объекты, толщина которых не превышает 2 мм, достаточно держать 2—3 часа. Надо, однако, помнить, что полное обезвоживание объекта — существеннейшее условие успешной заливки, и не следует спешить и укорачивать пребывание его в спиртах, если на то пет особых специальных для данного объекта, указаний. Абсолютный спирт надо дважды сменять.
Признаком хорошего обезвоживания объекта служит отсутствие каких-либо признаков помутнения ксилола при переносе в него объекта из абсолютного спирта. Если такая муть появилась, надо объект снова переложить в абсолютный спирт для полного обезвоживания. После абсолютного спирта можно перенести объект в смесь равных частей ксилола и абсолютного спирта, а потом прямо в чистый ксилол (сменить два-три раза). После ксилола объект переносят на 2—12 часов в термостат при температуре 37°, в насыщенный раствор парафина в ксилоле, затем объект переносят в чистый парафин (в термостате при температуре 55— 56е), сменяют его дважды, после чего приступают к окончательной заливке в парафин. При переносе объекта из ксилола в парафин надо остерегаться заносить в последний остатки ксилола: загряз-
139
нение парафина ксилолом вредно отражается на результатах окончательной заливки и изготовлении срезов. Употребляют парафин с точкой плавления 54—55°.
Кристаллизаторы с парафином в термостате лучше всегда держать открытыми, чтобы испарялись даже следы ксилола.
Если парафин плохо режется на микротоме, крошится и т. д., то прибавление к нему 5—10% чистого воска обычно улучшает его^качества. Для хрупких и крошащихся объектов можно употреблять смесь: парафин 60-градусный — 85 г, стеарин—Юг, воск пчелиный — 5 г.
Рис. 62. Угольники для приготовления парафинового блока.
Плохо режущийся, крошащийся или неравномерно застывающий парафин можно также улучшить, если его несколько раз подряд расплавить и снова остудить в вытяжном шкафу. Такой переплавленный парафин нужно оставить на несколько недель в вы-А
1 Э с
А
Г

Ряс. 63. Схема приготовления бумажной коробочки для заливки в парафин.
тяжпом шкафу для того, чтобы загрязняющие его летучие вещест-ва могли испариться. Для окончательной заливки парафин наливают в чистое часовое стекло, стенкн которого предварительно смазывают тончайшим слоем чистого глицерина для того, чтобы застывший парафин можно было легко вынуть из стекла. Затем в еще жидкий парафин переносят (с помощью осторожно нагретого шпателя) объект, причем парафин должен в достаточной мере покрывать его. В часовых стеклах заливают относительно небольшие объекты, для более крупных используют особые стеклянные (или металлические) угольнички, которые располагают на маленькой стеклянной пластинке (рис. 62) соответственно размерам заливаемого объекта. Можно также пользоваться бумажными коробочками (рис. 63). Слегка нагретыми иглами располагают объ-
140
ект в нужном положении. Затем необходимо остудить парафин, учитывая приведенные ранее замечания (см. стр. 140). Для этого часовое стекло с парафином опускают в холодную воду так, чтобы вода ие заливала парафин. Как только на поверхности парафина появляется тонкая твердая пленка, часовое стекло тотчас же погружается иа дно сосуда с водой. Через некоторое время, когда парафин полностью затвердеет, его легко вынуть из часового стекла.
Из затвердевшего парафинового диска с заключенным в нем объектом скальпелем вырезают блок. Блок должен иметь достаточно широкое основание, чтобы его легко можно было прикрепить к столику микротома. Стенки блока надо очень аккуратно обрезать так, чтобы грани его были параллельны друг другу. Вырезая блок, следует учитывать необходимую ориентировку объекта.
При заливке объектов, имеющих поверхность не более 1 см2 и толщину не более 3—5 мм, можно пользоваться следующей примерной схемой:
1) 40-градусный спирт — 2—4 часа, 2) 70-градусиый спирт — 4—6 часов (объект можно оставлять неограниченное время),
3) 96-градусный спирт — 6—12 часов, 4) абсолютный спирт —
Предыдущая << 1 .. 51 52 53 54 55 56 < 57 > 58 59 60 61 62 63 .. 214 >> Следующая