Книги
чёрным по белому
Главное меню
Главная О нас Добавить материал Поиск по сайту Карта книг Карта сайта
Книги
Археология Архитектура Бизнес Биология Ветеринария Военная промышленность География Геология Гороскоп Дизайн Журналы Инженерия Информационные ресурсы Искусство История Компьютерная литература Криптология Кулинария Культура Лингвистика Математика Медицина Менеджмент Металлургия Минералогия Музыка Научная литература Нумизматика Образование Охота Педагогика Политика Промышленные производства Психология Путеводители Религия Рыбалка Садоводство Саморазвитие Семиотика Социология Спорт Столярное дело Строительство Техника Туризм Фантастика Физика Футурология Химия Художественная литература Экология Экономика Электроника Энергетика Этика Юриспруденция
Новые книги
Янин В.Л. "Новгородские акты XII-XV Хронологический комментарий" (История)

Майринк Г. "Белый доминиканец " (Художественная литература)

Хусаинов А. "Голоса вещей. Альманах том 2" (Художественная литература)

Петров Г.И. "Отлучение Льва Толстого " (Художественная литература)

Хусаинов А. "Голоса вещей. Альманах том 1 " (Художественная литература)
Реклама

Микроскопическая техника - Роскин Г.И.

Роскин Г.И., Левинсон Л.Б. Микроскопическая техника — М.: Советская наука, 1957. — 469 c.
Скачать (прямая ссылка): microskopicheskayatehnika1957.djvu
Предыдущая << 1 .. 54 55 56 57 58 59 < 60 > 61 62 63 64 65 66 .. 214 >> Следующая

Т
96% спирт 1 час
t
96% спирт 1 час
Т
96% спирт 1 час _________f
70% спирт 2 часа -f
50% спирт 2 часа Т
30% спирт 2 часа ц Т
Водный фиксатор
Метилбензоат 1 час
t
Метилбензоат 1 час Т
Смссь раяных частей 100% спирта и метилбензоата 1 час Т
100% спирт 1 час
Т
96% спирт 2 часа Т
96% спирт 2 часа i
* Макклюнг (1950) считает возможным переносить из толуола нли хлороформа непосредственно в парафин.
4) диоксан—парафин (1:1) — 1 час; 5) парафин (2 раза сменить) — 1 час; 6) окончательная заливка в парафин.
Для яйцевых клеток, яичников и эмбрионов, находящихся на ранних стадиях развития, рекомендуют следующий метод фиксации и заливки через диоксан: 1) фиксировать материал в смеси из двух частей смеси Буэна и 1 части диоксана; 2) промыть в диоксане; 3) обезводить и просветлить в свежем растворе диоксана; 4) перенести в смесь (при температуре 50°): диоксан — 25 см3, ксилол — 5 см3, парафин (с температурой плавления 50— 52°) — 20 г; 5) чистый парафин (легкоплавкий); 6) чистый парафин (тугоплавкий); 7) заливка в парафин.
В зарубежной литературе все чаще и чаще предлагаются новые промежуточные среды как для обезвоживания, так и для заливки в парафин. Для обезвоживания многие авторы используют бутиловый спирт вместо этилового. Макклюнг (1950) рекомендует использовать триэтилфосфат при заливке в парафин, а также при обезвоживании уже окрашенных срезов и мазков. Триэтилфосфат (С2Н50)3Р04, молекулярный вес 182, точка кипения 210—220°. Этот реактив отлично растворим в воде, в спиртах, ксилоле, эфире и хлороформе. При заливке через триэтилфосфат можно пользоваться следующей схемой (объект толщиной 2—4 мм): из водного фиксатора объект переносят в воду на 10 минут, затем проводят последовательно через три сосуда с триэтилфосфатом (в каждом по 8 часов), бензол 15 минут, бензол 15 минут, парафин 1,5—2 часа, парафин 1.5—2 часа. Таким образом действие спиртов при этой смене заливки исключается. Многие зарубежные гистологи и эмбриологи для заливки в парафин с успехом применяют амилацетат, в котором можно при желании длительно сохранять фиксированные ткани и различные эмбриологические объекты, так как они при этом методе обработки не становятся излишне твердыми и хрупкими (Барон, 1934; Дрери, 1941).
Резка парафинового блока на микротоме
Для разложения залитого объекта на срезы служат микротомы. Два основных типа микротомов—салазочный с подвижным ножом и микротом с неподвижным ножом (рис. 64 и 65).
Кусочек, залитый в парафин, тщательно обрезают, придавая ему форму, указанную на стр. 141.
При этом надо помнить, что объект должен быть покрыт со всех сторон слоем парафина, примерно в 1—2 мм толщиной. Для того, чтобы прикрепить блок к столику микротома, на последний наносят слой расплавленного парафина и дают ему застыть.
Затем с помощью нагретого железного шпателя расплавляют этот парафин и быстро прижимают блок к предметному столику. Для лучшего закрепления опускают столик с прикрепленным блоком на некоторое время в холодную воду. Важно, чтобы блок был прочно прикреплен к столику микротома.
?0 Микроскопическая техника
,145
Рис. 64. Салазочный микротом.
Рис. 65. Микротом с неподвижным иожом.
В некоторых микротомах нет предметных столиков, а кусочек, залитый в парафии, приклеивается на деревянный блок, который специальными зажимами закрепляется в микротоме.
Затем ориентируют окончательно блок с залитым объектом: длинная продольная ось объекта должна идти параллельно мик-ротомиому ножу.
После этого скальпелем подравнивают края блока: его противоположные граии должны быть параллельны друг другу, так как
146
в противном случае трудно получить серийные срезы. Обычно микротомиый иож устанавливается перпендикулярно к парафиновому блоку.
Рис. 66. Положение мик-ротомного ножа при. резке парафинового блока. А, Б— неправильное положение ножа; В — правильное положение ножа.
Рис, 67. Правка (Л) и точка (Б) мнкро-томного иожа
Предыдущая << 1 .. 54 55 56 57 58 59 < 60 > 61 62 63 64 65 66 .. 214 >> Следующая