Книги
чёрным по белому
Главное меню
Главная О нас Добавить материал Поиск по сайту Карта книг Карта сайта
Книги
Археология Архитектура Бизнес Биология Ветеринария Военная промышленность География Геология Гороскоп Дизайн Журналы Инженерия Информационные ресурсы Искусство История Компьютерная литература Криптология Кулинария Культура Лингвистика Математика Медицина Менеджмент Металлургия Минералогия Музыка Научная литература Нумизматика Образование Охота Педагогика Политика Промышленные производства Психология Путеводители Религия Рыбалка Садоводство Саморазвитие Семиотика Социология Спорт Столярное дело Строительство Техника Туризм Фантастика Физика Футурология Химия Художественная литература Экология Экономика Электроника Энергетика Этика Юриспруденция
Новые книги
Янин В.Л. "Новгородские акты XII-XV Хронологический комментарий" (История)

Майринк Г. "Белый доминиканец " (Художественная литература)

Хусаинов А. "Голоса вещей. Альманах том 2" (Художественная литература)

Петров Г.И. "Отлучение Льва Толстого " (Художественная литература)

Хусаинов А. "Голоса вещей. Альманах том 1 " (Художественная литература)
Реклама

Микроскопическая техника - Роскин Г.И.

Роскин Г.И., Левинсон Л.Б. Микроскопическая техника — М.: Советская наука, 1957. — 469 c.
Скачать (прямая ссылка): microskopicheskayatehnika1957.djvu
Предыдущая << 1 .. 60 61 62 63 64 65 < 66 > 67 68 69 70 71 72 .. 214 >> Следующая

ской стойке в опрокинутом виде. Перед употреблением привезенного нового баллона с углекислотой следует, открыв кран баллона, спустить накопившуюся в нем жидкость, дождаться появления чистой струи углекислоты и только тогда соединить баллон со шлангом с помощью специальной шайбы.
Для получения хороших срезов надо эмпирически подобрать оптимальный наклон микротомного ножа. Объект кладут на столик микротома в капле воды так, чтобы весь кусочек был покрыт водой. Степень промораживания объекта регулируют, пропуская углекислоту небольшими порциями, закрывая и открывая клапан каждые 1—2 секунды. Как общее правило: сперва объект замораживают несколько сильнее, чем это необходимо для успешной резки. Если при резке объект крошится, значит он переохлажден. Тогда немного выжидают и вновь делают пробные срезы, которые должны правильно ложиться на лезвие ножа. Если кусочек начал оттаивать, его снова замораживают, процуская порциями углекислоту.
При работе на замораживающем микротоме надо соблюдать два условия: 1) следует брать небольшие, равномерно промерзшие кусочки (равномерность промерзания трудно достигается при замораживании крупных объектов); 2) нужно подбирать необходимую степень замораживания объекта. При соблюдении этих условий можно добиться получения хороших срезов толщиной в 10—20 (<.. Значительно труднее делать более тонкие срезы, голшиной в 5—7 ц.
Полученные срезы кисточкой снимают с ножа и переносят в физиологический раствор поваренной соли со следами тимола, где срезы хорошо расправляются. Затем с помощью стеклянной палочки срезы переносят в нужные красители или реактивы.
Можно также наклеить срезы на предметные стекла. Для этого их сначала уплотняют в 50-градусном спирте, затем вылавливают на предметное стекло, предварительно смазанное тонким слоем белка-глицерина. Дают спирту стечь и опускают предметное стекло на 30—60 секунд в 96-градусный спирт (для жировой ткани берут смесь равных частей 50-градусного спирта и 7,5-процентного формалина), после чего переносят срезы в 70-градусный спирт н затем в водные растворы красителей. Или же, выловив срезы на чисто вымытое предметное стекло, их осторожно прижимают к стеклу фильтровальной бумагой. Эти способы не всегда удаются, так как срезы отклеиваются, и поэтому лучше красить замороженные срезы, не наклеивая их на предметные стекла.
Срезы можно также уплотнять в 70-градусном спирте, а затем перенести на предметное стекло, смазанное белком-глицерином, иногда рекомендуют непосредственно из физиологического раствора поваренной соли выловить их на предметное стекло, налить на них несколько капель смеси равных частей эфира и 70-градусного спирта; эту операцию повторяют, после чего предметное стекло осторожно окунают в 0,25-процентный раствор цел-
i GO
лоидина. Затем наливают иа предметное стекло 80-градусный спирт для закрепления целлоидина. Наклеенные таким образом срезы после окраски не проводят через абсолютный спирт, а непосредственно из 96-градусного спирта перекладывают в карбол-ксилол и затем в чистый ксилол, бальзам.
Качество микротомных срезов в большей мере зависит от сохранности лезвия микротомного ножа. Микротомный нож после употребления каждый раз необходимо править иа ремне. Для сохранения постоянного уклона, под которым обточено лезвие, на нож надевают специальный обух для правки. Микротомный нож проводят несколько раз спинкой вперед по ремню, на котором тонким слоем нанесена особая паста. При регулярной правке микротомные иожи долго не тупятся, но, в конце концов, их все же приходится отдавать мастеру-специалисту, для точки па специальном камне. Качество точки на камне проверяется под слабым объективом микроскопа, когда ясно выступает малейшая зазубринка.
При точке иа камне также применяют специальные надевающиеся на бритвы обухи, позволяющие стачивать лезвие ножа всегда под одним и тем же углом. На камне инструмент под данным ему углом ведут всегда лезвием вперед, причем используется вся длина камня. При равномерном движении конец лезвия должен прийтись к концу камня. После этого поднимают нож и точат его другую сторону в обратном направлении. Не следует придавливать нож к камню. Камень смазывается костяным или деревянным маслом (предварительно профильтрованным). После точки на камне бритву надо еще непременно направить на ремне.
ОКРАСКА СРЕЗОВ Окраска срезов, наклеенных иа предметное стекло
Весь процесс освобождения от парафина и проводки через промежуточные среды — ксилол, спирты, диоксан и т. д. — удобнее всего производить в стеклянных цилиндрах (в так называемых «биологических стаканчиках»), примерно высотой 8,5—9 см. и диаметром 3,5 см, плотно закрывающихся пробкой или стеклянной крышкой. В стаканчики наливают нужные реактивы и растворы красителей. «Биологические стаканчики» для удобства можно расположить в ряды (смотри далее схему окраски препарата), поместив их в особые деревянные стойки (рис. 75). Перенос предметных стекол из одного стаканчика в другой удобно производить специальным пинцетом (рис. 76).
Предыдущая << 1 .. 60 61 62 63 64 65 < 66 > 67 68 69 70 71 72 .. 214 >> Следующая