Книги
чёрным по белому
Главное меню
Главная О нас Добавить материал Поиск по сайту Карта книг Карта сайта
Книги
Археология Архитектура Бизнес Биология Ветеринария Военная промышленность География Геология Гороскоп Дизайн Журналы Инженерия Информационные ресурсы Искусство История Компьютерная литература Криптология Кулинария Культура Лингвистика Математика Медицина Менеджмент Металлургия Минералогия Музыка Научная литература Нумизматика Образование Охота Педагогика Политика Промышленные производства Психология Путеводители Религия Рыбалка Садоводство Саморазвитие Семиотика Социология Спорт Столярное дело Строительство Техника Туризм Фантастика Физика Футурология Химия Художественная литература Экология Экономика Электроника Энергетика Этика Юриспруденция
Новые книги
Янин В.Л. "Новгородские акты XII-XV Хронологический комментарий" (История)

Майринк Г. "Белый доминиканец " (Художественная литература)

Хусаинов А. "Голоса вещей. Альманах том 2" (Художественная литература)

Петров Г.И. "Отлучение Льва Толстого " (Художественная литература)

Хусаинов А. "Голоса вещей. Альманах том 1 " (Художественная литература)
Реклама

Микроскопическая техника - Роскин Г.И.

Роскин Г.И., Левинсон Л.Б. Микроскопическая техника — М.: Советская наука, 1957. — 469 c.
Скачать (прямая ссылка): microskopicheskayatehnika1957.djvu
Предыдущая << 1 .. 71 72 73 74 75 76 < 77 > 78 79 80 81 82 83 .. 214 >> Следующая

В целом можно считать, что так как точки уменьшения окрашиваемое™ тканей на срезах совпадают с изоэлектрическими точками, определенными методом катафореза, то имеется полная возможность с достаточной уверенностью определять изоэлектри-ческие точки составных частей клеток и ткаией. При этом следует употреблять высокодисперсные красители, имеющие свойства чистого электролита и, кроме того, не содержащие в составе своей молекулы добавочных групп (основных групп для красителей кислых и кислых групп — для красителей основных).
Надо особо подчеркнуть, что электроколлоидальная теория красочного процесса касается окрасок, проводимых в определенных условиях: фиксация объекта абсолютным спиртом, применение одного прогрессивно красящего красителя без протрав, причем применяемый краситель не должен быть коллоидальным. При этих условиях процесс окрашивания имеет ха-, рактер адсорбции, тесно связанной с электрическим зарядом ткаией, а интенсивность окрашивания при данной величине pH раствора (и равном времени крашения) будет тем выше, чем величина pH будет дальше от изоэлектрической точки ткани в щелочной стороне для красителей кислых, в кислой стороне—для красителей основных. Таким образом, старые понятия «б а з о ф и л и я» и «о к с и ф и л и я» могут быть определены более точно; базофилия и оксифилии тесно связаны с электрополярностью клеточных элементов, поэтому можно заменить термины «базофильная ткань» и «ацидофильная ткань» терминами: «ткань, заряженная положительно» и «ткань, заряженная отрицательно». Эти понятия не абсолютны: положительный нли отрицательный заряд одного и того же протеина, т. е. его базофилия нли ацидофилия зависят от концентрации водородных ионов в среде, в которой находится белок. В ряде случаев было показано, что окраска в высокой степени зависит от электрополярности красителя и тканей. Окраска происходит толь-
184
ко тогда, когда заряды частей клетки и красителя имеют противоположные знаки. Заряд красителя зависит от его химической природы, заряд ткани обусловлен одновременно изоэлекгрической точкой протеина и pH раствора, в котором он находится. Вопрос, в каком отношении находятся изоэлектрические точки фиксированных тканей к изоэлектрическим точкам нефиксированных и живых тканей, по-видимому, решается в том смысле, что такие индифферентные фиксаторы, как спирт, вряд ли могут вызвать значительные сдвиги изоэлектрической точки; во всяком случае мало вероятно, что относительное положение изоэлектрических точек разных тканей должно было бы быть значительно изменено.
Подводя итоги основным современным теориям гистологического окрашивания, мы приходим к выводу, что исследователь не должен стоять перед альтернативой выбора — химической или физической теории окраски. И то, и другое направление может принести свою пользу. Как мы это видели, в защиту каждой теории имеется достаточное количество серьезных аргументов. Нам кажется, что каждая из этих теорий, взятая изолированно, не точна. Гораздо правильнее рассматривать окрашивание как весьма сложный процесс, в котором играют роль как физические, так и химические факторы.
Результат окраски зависит от сочетания свойств красителя и протоплазмы
Свойства протоплаз-м ы:
Изоэлектрические точки белков.
Субмикроскопическая плотность.
Способность образовывать с красителем лабильные или более прочные соединения. Концентрация солей, липидов, групп СООН, NH2 и т. д. Способность восстанавливать или окислять краситель. Проницаемость.
В каждом конкретном случае (с учетом как особенностей красителя, так и субстрата) могут превалировать то химические, то физические факторы. Один из важнейших факторов, определяющих характер процесса окрашивания, — это коллоидные свойства субстрата и красителей. Исходя из этого положения, можно выдвинуть следующую рабочую гипотезу. Все субстраты имеют кол-
Свойства красителя:
Электрический заряд.
Размер частиц красителя.
Присутствие групп, дающих соединение с белками.
Способность к восстановлению или окислению.
Поверхностное натяжение. Вязкость.
Растворимость.
Чувствительность к pH.
185
лоидный характер, но одни из них электролитически инертны (агар, целлюлоза), другие электролитически активны (желатина, альбумин, нуклеин и т. д.). Все красители электролитически активны, но одни из них находятся в состоянии молекулярного растворения (метиловый зеленый, трипафлавин, ауранция), другие же представляют собой коллоидные растворы (пироловый синий и др.). Таким образом, процесс окрашивания будет зависеть от комбинации этих двух факторов. Основываясь на этих соображениях, можно дать следующую таблицу:
I. Субстрат электролитически инактив- а) краситель не коллоидальный—окра-
ный шивание отсутствует;
б) краситель коллоидальный — окрашивание «коллоидального типа»;
Предыдущая << 1 .. 71 72 73 74 75 76 < 77 > 78 79 80 81 82 83 .. 214 >> Следующая