Книги
чёрным по белому
Главное меню
Главная О нас Добавить материал Поиск по сайту Карта книг Карта сайта
Книги
Археология Архитектура Бизнес Биология Ветеринария Военная промышленность География Геология Гороскоп Дизайн Журналы Инженерия Информационные ресурсы Искусство История Компьютерная литература Криптология Кулинария Культура Лингвистика Математика Медицина Менеджмент Металлургия Минералогия Музыка Научная литература Нумизматика Образование Охота Педагогика Политика Промышленные производства Психология Путеводители Религия Рыбалка Садоводство Саморазвитие Семиотика Социология Спорт Столярное дело Строительство Техника Туризм Фантастика Физика Футурология Химия Художественная литература Экология Экономика Электроника Энергетика Этика Юриспруденция
Новые книги
Янин В.Л. "Новгородские акты XII-XV Хронологический комментарий" (История)

Майринк Г. "Белый доминиканец " (Художественная литература)

Хусаинов А. "Голоса вещей. Альманах том 2" (Художественная литература)

Петров Г.И. "Отлучение Льва Толстого " (Художественная литература)

Хусаинов А. "Голоса вещей. Альманах том 1 " (Художественная литература)
Реклама

Микроскопическая техника - Роскин Г.И.

Роскин Г.И., Левинсон Л.Б. Микроскопическая техника — М.: Советская наука, 1957. — 469 c.
Скачать (прямая ссылка): microskopicheskayatehnika1957.djvu
Предыдущая << 1 .. 74 75 76 77 78 79 < 80 > 81 82 83 84 85 86 .. 214 >> Следующая

Краситель должен «созревать» примерно 14 дней. Раствор сохраняет свою красящую силу долгое время. Если вместо гематоксилина взять 0,25—0,5 г гематина, то краситель пригоден к употреблению тотчас же после изготовления. Окрашивание производят так же, как и гематоксилином Майера. После окрашивания хорошо промывают проточной водой — срезы должны интенсивно посинеть. Ядра окрашиваются в темно-синий цвет.
. Квасцовый гематоксилин по Караччи. Гематоксилина — 0,5 г, калийных квасцов — 25 г, нодноватокислого калия KJ03 — 0,01 г, глицерина—100 см3, дистиллированной воды — 400 см3.
Гематоксилин дает отличное, очень интенсивное окрашивание ядер на срезах. Способ окрашивания tijt же, что и гематоксилином Майера, Обычно красят прогрессивно, но можно также перекрашивать и дифференцировать подкисленным спиртом,
. Квасцовый гематоксилин по Бемеру. 1 г гематоксилина растворяют в 10 см3 абсолютного спирта и вливают в 200 см3 10-пропентного раствора калийных квасцов (квасцы растворяют при нагревании, охлаждают и фильтруют). Краситель на несколько недель оставляют на' свету в широкогорлой открытой банке для «созревания».
Красят 3—5 минут, в зависимости от зрелости гематоксилина^ промывают водопроводной водой, в которую можно прибавить несколько капель нашатырного спирта. Через несколько минут окраска среза из красно-фиолетовой станет интенсивно синей, В результате ядра будут окрашены в синий цвет. Можно дифференцировать 1-процентной соляной кислотой.
- Квасцовый гематоксилин по Делафильду.. Растворяют 4 г гематоксилина в 25 см3 абсолютного или 96-градусного спирта. Отдельно приготовляют насыщенный (приблизительно 14-процентный) раствор аммиачных квасцов. Постепенно вливают гематоксилин в квасцы. Оставляют 3—4 дня стоять на
190
свету в открытой банке (прикрыть марлей от пыли). После этого фильтруют и добавляют 100 см3 глицерина и 100 см3 метилового спирта. Через несколько дней вновь фильтруют.
Для окрашивания основной раствор разбавляют дистиллированной водой. При разбавлении в 3—4 раза время окраски измеряется несколькими минутами; часто основной раствор разводят в 20—50 раз и красят 12—24 часа. Если препарат перекрашен,, можно его дифференцировать в 2-процентном солянокислом 70-градусном спирте. Можно красить и прогрессивно. Для этого основной раствор красителя разводят в двести раз. После окраски и дифференцировки препарат длительно промывают проточной, водой, в которой краситель синеет.
В результате элективно окрашиваются ядра в синий цвет, во-лютин (у простейших) —в красно-буро-фиолетовый.
Железный гематоксилин. В литературе приводится очень много методов окраски с помощью железных лаков гематоксилина. Все эти методы применяются для окраски срезов или мазков.
При окраске по методу Гейденгайна приготовляют два раствора.
А. Протрава: приготовляют 3-процентный водный раствор железных квасцов. Пригодны только светло-фиолетовые кристаллы; разложившиеся буровато-желтые крошащиеся кристаллы употреблять не следует. Кристаллы, покрытые буровато-желтым порошком, следует обмыть дистиллированной водой.
Б. Краситель: растворяют 0,5 г гематоксилина в 10 сж3 96-градусного спирта и затем добавляют 90 смг дистиллированной воды; раствор должен созревать в течение месяца; перед употреблением его разводят пополам дистиллированной водой. Раствор сохраняет долгое время свои красящие свойства.
Можно пользоваться и свежеприготовленным раствором. Тогда краситель дает чистые голубовато-серые оттенки. Чем раствор старее, тем более черные тона он дает, и препарат медленнее дифференцируется. Наконец, наиболее старые и окисленные растворы вызывают неприятный рыжий топ окраски и практически уже непригодны.
Мо^кно использовать следующий способ быстрого получения «созревшего» раствора гематоксилина; при кипячении растворяют 1 г гематоксилина в 95 см3 дистиллированной воды, после чего добавляют 5 с.и3 жидкой карболовой кислоты.
Для тех же целей Г. В. Эпштейн рекомендует к каждым 100 см1 свежеприготовленного красителя прибавлять 1 каплю 21/2-про-центного раствора квасцов. Раствор долго сохраняет свои красящие свойства. При появлении осадка жидкость следует фильтровать.
Окрашивание препаратов производят по следующей схеме.
1) Срезы протравляют в 3-процентных железных квасцах — 12—24 часа; 2) споласкивают дистиллированной водой, 3) окра-
191
шивают раствором гематоксилина — 12—24 часа; 4) споласкивают дистиллированной водой; 5) дифференцируют 3-процентными железными квасцами (или лучше 1-процентным раствором), контролируя под микроскопом; 6) промывают проточной водой — 15—60 минут; 7) обезвоживают в спиртах и, проведя через ксилол, заключают в бальзам или предварительно докрашивают в течение 3— 10 минут 0,1-процентным водным раствором эозина, кислого фуксина или светлого зеленого и затем обезвоживают, как сказало в п. 7.
Процесс протравления и окраски можно значительно ускорить (1—2 часа), если проводить его в термостате при температуре 45—50°.
При правильной дифференцировке зерна хроматина, ядрышки, различные гранулы, центросомы, фибриллы и т. п. окрашиваются в черный цвет. Так как раскрашивание различных элементов идет с различной скоростью, то при известном навыке исследователь, пользуясь этим обстоятельством, может по желанию выявить нужные структуры. Скорость раскрашивания в значительной мере обусловливается толщиной срезов, характером фиксации, физико-химическими свойствами клеток и т. д.
Предыдущая << 1 .. 74 75 76 77 78 79 < 80 > 81 82 83 84 85 86 .. 214 >> Следующая