Книги
чёрным по белому
Главное меню
Главная О нас Добавить материал Поиск по сайту Карта книг Карта сайта
Книги
Археология Архитектура Бизнес Биология Ветеринария Военная промышленность География Геология Гороскоп Дизайн Журналы Инженерия Информационные ресурсы Искусство История Компьютерная литература Криптология Кулинария Культура Лингвистика Математика Медицина Менеджмент Металлургия Минералогия Музыка Научная литература Нумизматика Образование Охота Педагогика Политика Промышленные производства Психология Путеводители Религия Рыбалка Садоводство Саморазвитие Семиотика Социология Спорт Столярное дело Строительство Техника Туризм Фантастика Физика Футурология Химия Художественная литература Экология Экономика Электроника Энергетика Этика Юриспруденция
Новые книги
Янин В.Л. "Новгородские акты XII-XV Хронологический комментарий" (История)

Майринк Г. "Белый доминиканец " (Художественная литература)

Хусаинов А. "Голоса вещей. Альманах том 2" (Художественная литература)

Петров Г.И. "Отлучение Льва Толстого " (Художественная литература)

Хусаинов А. "Голоса вещей. Альманах том 1 " (Художественная литература)
Реклама

Микроскопическая техника - Роскин Г.И.

Роскин Г.И., Левинсон Л.Б. Микроскопическая техника — М.: Советская наука, 1957. — 469 c.
Скачать (прямая ссылка): microskopicheskayatehnika1957.djvu
Предыдущая << 1 .. 79 80 81 82 83 84 < 85 > 86 87 88 89 90 91 .. 214 >> Следующая

Трехцветный метод Маллорн употребляется для дифференцирования окраски различных тканей, особенно соединительной ткани. Метод хорошо удается после сулемовых фиксаторов. Срезы с объектов, зафиксированных формалином, спиртом, смесью Буэна илн Флемминга,— также можно успешно окрашивать по Маллори, если их предварительно перед окраской обработать в течение 15—60 минут смесью Ценкера, хорошо сполоснуть и затем красить, как указано ниже.
1) Красить 3 минуты в 0,1-процентном растворе кислого фук-сЯЙ; 2) сполоснуть водой и положить на 3—5 минут в 1-процент-нук} фосфорномолибденовую кислоту; 4) сполоснуть водой н красить 2 минуты смесью: анилинового синего — 0,5 г, оранж G —
2 г, щавелевой кислоты — 2 г, дистиллированной воды — 100 смг; смесь нагревают до кипения и после охлаждения фильтруют:
4) сполоснуть водой, дифференцировать 90-градусным спиртом (пока не останутся ярко-синими только коллагеновые волокна), провести через абсолютный спирт, ксилол н заключить в бальзам.
Коллагеновые и ретикулярные волокна соединительной ткани — темно-синие, слизь — голубая, эритроциты — оранжевые, мускульная ткань от ярко-желтой до красноватой, нейроглия и ганглиозные клетки—красно-фиолетовые, ядра — желто-коричневые или желто-красные.
Для улучшения эффекта окраски по способу Маллорн кислый фуксин можно разводить в буферном растворе: кислого фукси-
200
на— 1 г, раствора* цитрата (по Серепсену) —40 см3, N/10 соляной кислоты — 60 см3, дистиллированной воды — 900 см3. Раствор цитрата: 21 г кристаллической лимонной кислоты + 200 см3 1 N едкого натрия на 1 л раствора.
Метиловый синий — эозин по Манну. Этот метод дает хорошие результаты при изучении топкой цитологии (отличная окраска ядрышек), особенно нервной системы, телец Негри, а также при изучении строения простейших. Его можно использовать в качестве хорошей докраски после окраски квасцовым гематоксилином. Применяется как для мазков, так и для срезов после пикриновых или сулемовых фиксаторов.
1) Срезы доводятся до воды; 2) красить 5—24 часа в следующей смеси: 1-процентного метилового синего — 35 см3, 1-процентного водного эозина — 45 см3, дистиллированной воды — 100 см3;
3) сполоснуть водой; обезвоживают в 100-градусном спирте, где срезы принимают синий цвет; 4) дифференцируют в щелочном абсолютном спирте, пока срезы не станут красными; 5) отмывают едкнй натр в чистом абсолютном спирте; 6) переносят в подкисленную воду (4—5 капель уксусной кислоты па 60 слФ воды) на 2—3 минуты, где ядра должны опять принять синий оттенок;
7) проводят через абсолютный спирт, ксилол к заключают в бальзам.
Результат: ядрышки — красные, протоплазма — фиолетовая, секреторные зерна — синие и красные, мышцы и соединительная ткань — светло-розовые, эритроциты — красные.
Для приготовления щелочного абсолютного спирта смешивают 10 см3 абсолютного спирта с 0,33 см3 30-процентного водного раствора едкого натра. 10 капель этого раствора прибавляют к 60 см3 абсолютного спирта.
Хорошие результаты дает следующий способ окраски: срезы окрашивают смесью Манна в течение 12 часов и затем дифференцируют их слабым раствором оранжа в 70-градусном спирте, после чего быстро обезвоживают в 100-градусном спирте и, проведя через ксилол, заключают в бальзам.
Трехцветный метод Массона. 1) Срезы (после фиксаторов Ценкера или Буэна) помещают в 5-процентные железные квасцы на 24 часа (или на 30 минут в термостат при температуре 50°). 2) Красят в гематоксилине 24 часа (или 30 минут при нагревании до 50)°. Гематоксилин (по Массону) готовят следующим образом: гематоксилина — 1 з, спирта 96-градусного— 10 см3, глицерина— 10 г, дистиллированной воды — 80 см?. Гематоксилин растворяют при нагревании в воде и затем прибавляют спирт и глицерин. Гематоксилин должен «зреть» несколько дней. 3) Споласкивают дистиллированной водой. 4) Дифференцируют раствором железных квасцов или лучше пикриновым спиртом (к 2 частям насыщенного водного раствора пикриновой кислоты прибавляют 1 часть 96-градусного спирта) до_получения элективной ядерной окраски. 5) Промывают проточной водой. 6) Окра-
201
шивяют протоплазму в течение 5 минут в следующей смеси: кислого фуксина — 1 г, уксусной кислоты — 1 см3, дистиллированной воды — 200 см3. 7) Споласкивают дистиллированной водой. 8) Дифференцируют в 1-процентной фосфорномолибденовой кислоте — 5 минут. 9) Не споласкивая, красят, наливая насыщенный в 2,5-процентной уксусной кислоте раствор анилинового синего на стекло 2 минуты. 10) Споласкивают дистиллированной водой.
11) Дифференцируют в 1-процентной уксусной кислоте для удаления излишков анилинового синего 5—30 минут. Помещают в абсолютный спирт, подкисленный уксусной кислотой 1 : 1000.
12) Проводят через абсолютный спирт, ксилол и заключают в бальзам.
В результате: ядра— черные, протоплазма — красноватая, коллагеновые волокна — синие, нейроглиальные волокна — красные.
Этот метод один из лучших для выявления коллагена, а также различных протоплазматичсских структур.
Предыдущая << 1 .. 79 80 81 82 83 84 < 85 > 86 87 88 89 90 91 .. 214 >> Следующая