Книги
чёрным по белому
Главное меню
Главная О нас Добавить материал Поиск по сайту Карта книг Карта сайта
Книги
Археология Архитектура Бизнес Биология Ветеринария Военная промышленность География Геология Гороскоп Дизайн Журналы Инженерия Информационные ресурсы Искусство История Компьютерная литература Криптология Кулинария Культура Лингвистика Математика Медицина Менеджмент Металлургия Минералогия Музыка Научная литература Нумизматика Образование Охота Педагогика Политика Промышленные производства Психология Путеводители Религия Рыбалка Садоводство Саморазвитие Семиотика Социология Спорт Столярное дело Строительство Техника Туризм Фантастика Физика Футурология Химия Художественная литература Экология Экономика Электроника Энергетика Этика Юриспруденция
Новые книги
Янин В.Л. "Новгородские акты XII-XV Хронологический комментарий" (История)

Майринк Г. "Белый доминиканец " (Художественная литература)

Хусаинов А. "Голоса вещей. Альманах том 2" (Художественная литература)

Петров Г.И. "Отлучение Льва Толстого " (Художественная литература)

Хусаинов А. "Голоса вещей. Альманах том 1 " (Художественная литература)
Реклама

Микроскопическая техника - Роскин Г.И.

Роскин Г.И., Левинсон Л.Б. Микроскопическая техника — М.: Советская наука, 1957. — 469 c.
Скачать (прямая ссылка): microskopicheskayatehnika1957.djvu
Предыдущая << 1 .. 85 86 87 88 89 90 < 91 > 92 93 94 95 96 97 .. 214 >> Следующая

Второй способ импрегнации заключается в том, что ткань предварительно пропитывают солями серебра, а затем обрабатывают редуцирующими реактивами. Этот способ наиболее распространен в гистологической технике. Он сводится к тому, что свежую или фиксированную ткань сперва обрабатывают раствором азотнокислого или аммиачного серебра, а затем подвергают действию редуцирующего реактива, чаще всего формалина; при этом при определенных условиях можио достигнуть элективного почернения элементов нервной ткани.
В процессе импрегнации важную роль играют размеры межмицелляриых пространств тканевых элементов и частиц серебра. Исследованиями Секи (1940) и Ляппа (1951) показано значение структурной плотности тех или иных тканевых элементов, подвергающихся импрегнации серебром.
Контрастность выявления тех или иных тканевых элементов при импрегнации достигается тем, что восстанавливающееся из солей серебра металлическое серебро откладывается в этих элементах более интенсивно, чем в других. В начале этого процесса образуются мельчайшие участки («зародыши») серебра, которые затем более или менее быстро увеличиваются за счет вновь восстановленного серебра. Этим путем получаются значительные аггрегаты частиц серебра. Такие серебряные частицы могут образоваться как в микроскопических, так и в субмикроскопических порах тканевых элементов, и, откладываясь по их стенкам, чернить их. Если же субмикроскопические поры слишком узки, то отложение серебра становится невозможным. Прн слишком широких порах или же тканевых элементах, богатых защитными коллоидами, также не наступает почернения, так как азотнокислое или аммиачное серебро будет быстро удаляться при промывке водой. Различными химическими агентами можно значительно изменить как сродство серебряных солей к тканевым элементам, так и ширину и коллоидальный
212
состав субмикроскопических пор. Прибавление к формалиновому фиксатору веществ, вызывающих набухание, т. е. расширение пор, вызывает смешение оптимальной импрегнации в сторону более плотных тканевых элементов.
Фиксация кусочков мозга безводными жидкостями сильно уменьшает пористость тканей и в силу этого существенно меняет результаты последующей импрегнации серебром. В общем можно считать, что подходящая микроскопическая и субмикроскопическая плотность тканевых элементов и их бедность защитными коллоидами являются важными условиями серебрения.
Для течения процесса импрегнации существенное значение имеет размер образовавшихся частиц серебра. С увеличением размеров частиц цвет солей серебра смещается от желтого к красному, фиолетовому и т. д. Полагают, что размер частиц серебра иа черных посеребренных препаратах больше 120 тц. Поэтому надо считать, что субмикроскопические поры тканевых элементов, в крторых откладывается черное серебро, должны, конечно, иметь не меньшие размеры. Используя различные реактивы, в первую очередь при фиксации, можно направленно изменять структурную плотность ткани и тем самым подготовить ее к элективной импрегнации исследуемых элементов. Поэтому при серебрении особое значение имеет процесс фиксации и выбор фиксатора.
В различных методах импрегнации — серебрения особое значение имеет процесс фиксации и выбор фиксатора.
В различных методах импрегнации серебром рекомендуется предварительно фиксировать ткань формалином. Под влиянием формалина в клетках происходят химические и физико-химические изменения, которые необходимо учитывать. В литературе описаны следующие реакции формальдегида с протеинами:
а) реакция с аминогруппами; б) реакция с амидо-, аминогидроксильными и сульфогидрильными группами; в) реакция с ароматическими кольцами тирозина, триптофана, фенилаланина и гистидина; г) реакция метиленирования; д) реакции, связанные с редуцирующими свойствами формальдегида и е) реакции, обусловленные примесями, встречающимися в продажном формальдегиде: продуктами полимерации формальдегида,
муравьиной кислотой, метиловым спиртом. Существенно отметить, что реакции (а) и (г) были изучены в пробирочных опытах. Предполагают, что формалин способен сетеобразно объединять пептидные цепи белков.
Поскольку формалин нейтрализует основные группы, он делает протеины более кислыми, чем это наблюдается, например после фиксации спиртом. Таким образом формалиновая фиксация приводит к некоторому сдвигу изоэлектрических точек протеинов в кислую сторону, что не безразлично для последую-
213
щего процесса импрегнации серебром, так как при этом возрастает сродство к ионам серебра некоторых элементов нервной ткани, например, нейрофибрилл. Формалиновая фиксация не оставляет неизменными липоидные компоненты клеток. Наблюдения показывают, что в тканях, фиксированных формалином, постепенно, хотя и весьма медленно, уменьшается содержание липоидов, так как имеющаяся в клетках липаза не разрушается этим реактивом. Наблюдая фиксированные формалином участки центральной нервной системы, можно установить, что лецитин и галакто-липины остаются более или менее неизменными, а цефалин и сфингомиэлин постепенно исчезают. Эти изменения в липоидном составе нервной ткани не безразличны для процесса импрегнации серебром. Некоторые гистологи считают, что удаление липоидов из нервной ткани является весьма желательным для успеха импрегнации и рекомендуют использовать для этой цели, например, спиртовую фиксацию. Физико-химические сдвиги, вызываемые формалином, приводят также к известным изменениям и в микроскопических структурах.
Предыдущая << 1 .. 85 86 87 88 89 90 < 91 > 92 93 94 95 96 97 .. 214 >> Следующая