Книги
чёрным по белому
Главное меню
Главная О нас Добавить материал Поиск по сайту Карта книг Карта сайта
Книги
Археология Архитектура Бизнес Биология Ветеринария Военная промышленность География Геология Гороскоп Дизайн Журналы Инженерия Информационные ресурсы Искусство История Компьютерная литература Криптология Кулинария Культура Лингвистика Математика Медицина Менеджмент Металлургия Минералогия Музыка Научная литература Нумизматика Образование Охота Педагогика Политика Промышленные производства Психология Путеводители Религия Рыбалка Садоводство Саморазвитие Семиотика Социология Спорт Столярное дело Строительство Техника Туризм Фантастика Физика Футурология Химия Художественная литература Экология Экономика Электроника Энергетика Этика Юриспруденция
Новые книги
Янин В.Л. "Новгородские акты XII-XV Хронологический комментарий" (История)

Майринк Г. "Белый доминиканец " (Художественная литература)

Хусаинов А. "Голоса вещей. Альманах том 2" (Художественная литература)

Петров Г.И. "Отлучение Льва Толстого " (Художественная литература)

Хусаинов А. "Голоса вещей. Альманах том 1 " (Художественная литература)
Реклама

Микроскопическая техника - Роскин Г.И.

Роскин Г.И., Левинсон Л.Б. Микроскопическая техника — М.: Советская наука, 1957. — 469 c.
Скачать (прямая ссылка): microskopicheskayatehnika1957.djvu
Предыдущая << 1 .. 87 88 89 90 91 92 < 93 > 94 95 96 97 98 99 .. 214 >> Следующая

Как показали исследования Петерса (1955), при пропитывании азотнокислым серебром (после спиртовой фиксации) происходят, по существу, две различные реакции между ионами серебра и элементами фиксированной ткани. Значительная часть серебра соединяется с тканью в невосстановленной форме, а меньшая часть—восстанавливается, образуя «зародыши» серебра, па которых могут отлагаться дополнительно новые частицы серебра. Невосстановленная часть серебра комбинируется преимущественно с гистидином. Невосстановленное серебро распределяется однородно (за исключением клеточных ядер) по всему срезу; количество поступающего в срезы ткани невосстановленного серебра зависит от концентрации ионов серебра в растворе. Фракция же восстановленного серебра прогрессивно увеличивается в зависимости от времени, повышения pH н температуры пропитывающей ванны. При этом ионы серебра превращаются в частицы («зародыши») серебра и в дальнейшем остаются без изменения. Отложение частиц серебра происходит только после пропитывания объекта при pH от 7,5 до 9.0. Только в этих условиях впитывается такое количество невосстановленного серебра, которое достаточно для интенсивного окрашивания после действия восстановителя (Петерс, 1955). Следует также указать па коллоидальные изменения, происходящие в тканях при импрегнации. Раствор азотнокислого серебра вызывает отбухание и сморщивание тканей. Поэтому последующий успех серебрения, определяемый в значительной степени размером межмицелляриых пространств тканевых элементов, будет зависеть также от изменений ткани под влиянием раствора азотнокислого серебра. Время пребывания в нем имеет существенное значение, тем более, что при излишне длительном пребывании в растворе азотнокислого серебра начинается откладывание частиц серебра в различных тканях, а не только в нервной.
Важную роль играет вторичная обработка срезов формалином. В прописях Б. И. Лаврентьева, а также Гросс-Шульце рекомендуется срезы, пробывшие некоторое время в растворе
азотнокислого серебра, подвергать обработке формалином. При этом желто-коричневый тон срезов темнеет, причем в нервной ткани этот процесс протекает гораздо более интенсивно, чем в других окружающих тканях. Под влиянием формалина происходит дальнейшее восстановление «зародышевых» частиц серебра и одновременное присоединение к ним новых ионов серебра. В то же время, наряду с потемнением аксонов, может происходить посветление и даже исчезновение окраски мякот-ных оболочек. Это показывает, что образовавшиеся «зародышевые» частицы серебра не обязательно остаются связанными с тканью, а могут вымываться из ткани возникающими диффузионными токами. Чем более рыхло субмикроскопическое строение ткани, чем шире ее межмицеллярные пространства, тем интенсивнее идет процесс вымывания уже образовавшихся солеобразных комплексов серебра — «зародышевых» частиц серебра.
При импрегнации по Билыновскому, как известно, после формалиновой фиксации изготавливают срезы на замораживающем микротоме, пропитывают их в растворе азотнокислого серебра и затем переносят в раствор аммиачного серебра’, где и заканчивается процесс импрегнации. При контакте имеющегося уже в ткани AgN03 и аммиачного серебра в плотных и рыхлых тканевых элементах образуется осадок AgsO. Вскоре этот осадок вымывается из рыхлых частей (как, например, коллагеновых тяжей) и растворяется в растворе аммиачного серебра, так как тот содержит избыток аммиака. При последующем переносе срезов в формалин, в этих рыхлых элементах откладывается металлическое серебро. Образующийся осадок металлического серебра откладывается и в плотных тканевых элементах, главным образом на основе ранее образовавшегося осадка Ag?0, но накапливается в них в очень малых количествах вследствие узости пор и, возможно, в силу присутствия там защитных коллоидов.
Количество едкого натрия, находящегося в растворе аммиачного серебра, имеет большое значение для возникновения явлений мацерации ткани и образования защитных коллоидов из веществ, входящих в ее состав.
Для успеха импрегнации по Билыновскому следует учитывать другие моменты. Так, например, краткое споласкивапие водой среза, обработанного аммиачным серебром, необходимо для диффе-
1 При изготовлении аммиачного серебра надо иметь в виду, что добавление избытка аммиака к исходному раствору ведет к образованию комплексной солн [AgfNHsblNOs. Константа диссоциации этой соли очеиь мала и концентрация свободного серебра [Ag+] чрезвычайно низка. Совершенно другой эффект получается при добавлении к A^N03 сильной щелочи, как N'aOH-При добавлении NaOH к раствору комплексного аммиачно-серебряного нитрата образуется легко диссоциирующийся [Aq-(NH3)гОН], и концентрация свободного серебра в растворе повышается. Таким образом, действие избытка аммиака и NaOH на раствор AffNOa противоположно. Это позволяет регулировать концентрацию свободного серебра.
217
ренцировки тканевых элементов. Если срезы непосредственно перенести в восстановитель, то специфичность серебрения аксонов и нейрофибрилл сильно пострадает, так как образуются осадки серебра на поверхности почти всех элементов ткани. С другой стороны, слишком долгая промывка ведет к сильному ослаблению импрегнации, получаются бледные, нечеткие препараты.
Предыдущая << 1 .. 87 88 89 90 91 92 < 93 > 94 95 96 97 98 99 .. 214 >> Следующая